目的探讨固本降消汤联合达格列净经腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路、沉默信息调节因子调治2型糖尿病(T2DM)伴肥胖的效果及机制。方法选取2021年1—12月收治的T2DM伴肥胖120例,根据治疗方案不同将其分为观察组和对照组2组各60例。观...目的探讨固本降消汤联合达格列净经腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路、沉默信息调节因子调治2型糖尿病(T2DM)伴肥胖的效果及机制。方法选取2021年1—12月收治的T2DM伴肥胖120例,根据治疗方案不同将其分为观察组和对照组2组各60例。观察组采用固本降消汤联合达格列净治疗,对照组采用达格列净治疗,连续治疗3个月。比较2组治疗3个月后临床效果,治疗前及治疗1、3个月后血糖指标[空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后2 h血糖(2 h PG)]、氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]、腺苷酸活化蛋白激酶α1/Toll样受体4(AMPKα1/TLR4)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、核因子-κB(NF-κB)、能量平衡相关蛋白(Adropin)、鸢尾素(Irisin)、趋化素(Chemerin)及沉默信息调节因子1(SIRT1)、沉默信息调节因子3(SIRT3),以及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗3个月后,总有效率观察组为96.67%高于对照组83.33%(P<0.05)。治疗1和3个月后,FPG、HbA1c、2 h PG、MDA、ROS、TGF-β1、NF-κB及Chemerin 2组均较治疗前降低,且观察组低于对照组;GSH-Px、AMPKα1/TLR4、Adropin、Irisin及SIRT1、SIRT32组均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P<0.05,P<0.01)。治疗期间,不良反应总发生率观察组为13.33%,对照组为10.00%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论固本降消汤联合达格列净调治T2DM伴肥胖可提高临床效果,改善血糖水平,减轻氧化应激损伤,并可经AMPK信号通路抑制肾损伤,调节SIRT1和SIRT3,延缓病情进展。展开更多
目的表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的人LINGO-1胞外段(hLINGO-1aa76-319)融合蛋白,并制备兔源性抗hLINGO-1aa76-319的多克隆抗体(pAb)。方法利用PCR从pCMV-SPORT6获得hLINGO-1aa76-319编码序列,将其亚克隆至原核表达载体pET30...目的表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的人LINGO-1胞外段(hLINGO-1aa76-319)融合蛋白,并制备兔源性抗hLINGO-1aa76-319的多克隆抗体(pAb)。方法利用PCR从pCMV-SPORT6获得hLINGO-1aa76-319编码序列,将其亚克隆至原核表达载体pET30a(+),构建重组表达质粒pET30a(+)-hLINGO-1aa76-319;将阳性重组质粒转化大肠杆菌,IPTG诱导表达6×His-hLINGO-1aa76-319融合蛋白,经Ni-NTA螯合树脂纯化,纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗血清,Protein A Sepharose柱纯化获得多抗,ELISA法检测抗体效价,Western blot法检测抗体特异性。结果成功构建了pET30a(+)-hLINGO-1aa76-319原核表达载体,原核蛋白hLINGO-1aa76-319以包涵体形式在大肠杆菌高水平表达,通过复性与亲和层析获得纯度在90%以上的hLINGO-1aa76-319蛋白,蛋白浓度为4600mg/L,制备的抗hLINGO-1aa76-319多抗效价高达1:1.6×106,Western blotting鉴定其具有良好的特异性。结论获得高纯度hLINGO-1aa76-319蛋白并成功制备特异性pAb,为进一步研究LINGO-1的生物学功能提供实验基础。展开更多
文摘目的探讨固本降消汤联合达格列净经腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路、沉默信息调节因子调治2型糖尿病(T2DM)伴肥胖的效果及机制。方法选取2021年1—12月收治的T2DM伴肥胖120例,根据治疗方案不同将其分为观察组和对照组2组各60例。观察组采用固本降消汤联合达格列净治疗,对照组采用达格列净治疗,连续治疗3个月。比较2组治疗3个月后临床效果,治疗前及治疗1、3个月后血糖指标[空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后2 h血糖(2 h PG)]、氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]、腺苷酸活化蛋白激酶α1/Toll样受体4(AMPKα1/TLR4)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、核因子-κB(NF-κB)、能量平衡相关蛋白(Adropin)、鸢尾素(Irisin)、趋化素(Chemerin)及沉默信息调节因子1(SIRT1)、沉默信息调节因子3(SIRT3),以及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗3个月后,总有效率观察组为96.67%高于对照组83.33%(P<0.05)。治疗1和3个月后,FPG、HbA1c、2 h PG、MDA、ROS、TGF-β1、NF-κB及Chemerin 2组均较治疗前降低,且观察组低于对照组;GSH-Px、AMPKα1/TLR4、Adropin、Irisin及SIRT1、SIRT32组均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P<0.05,P<0.01)。治疗期间,不良反应总发生率观察组为13.33%,对照组为10.00%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论固本降消汤联合达格列净调治T2DM伴肥胖可提高临床效果,改善血糖水平,减轻氧化应激损伤,并可经AMPK信号通路抑制肾损伤,调节SIRT1和SIRT3,延缓病情进展。
文摘目的表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的人LINGO-1胞外段(hLINGO-1aa76-319)融合蛋白,并制备兔源性抗hLINGO-1aa76-319的多克隆抗体(pAb)。方法利用PCR从pCMV-SPORT6获得hLINGO-1aa76-319编码序列,将其亚克隆至原核表达载体pET30a(+),构建重组表达质粒pET30a(+)-hLINGO-1aa76-319;将阳性重组质粒转化大肠杆菌,IPTG诱导表达6×His-hLINGO-1aa76-319融合蛋白,经Ni-NTA螯合树脂纯化,纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗血清,Protein A Sepharose柱纯化获得多抗,ELISA法检测抗体效价,Western blot法检测抗体特异性。结果成功构建了pET30a(+)-hLINGO-1aa76-319原核表达载体,原核蛋白hLINGO-1aa76-319以包涵体形式在大肠杆菌高水平表达,通过复性与亲和层析获得纯度在90%以上的hLINGO-1aa76-319蛋白,蛋白浓度为4600mg/L,制备的抗hLINGO-1aa76-319多抗效价高达1:1.6×106,Western blotting鉴定其具有良好的特异性。结论获得高纯度hLINGO-1aa76-319蛋白并成功制备特异性pAb,为进一步研究LINGO-1的生物学功能提供实验基础。