基于β2AR/β-arrestin2/NF-κB通路探讨预电针“内关”“间使”对阿尔茨海默病样大鼠学习记忆及蓝斑核-海马神经环路的作用机制

目的观察预电针对阿尔茨海默病(AD)样大鼠空间学习记忆能力、蓝斑核-海马神经环路及神经炎症的影响,探讨预电针防治AD的潜在作用机制。方法36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、电针组、假电针组,每组9只。除正常组外,其余各组通过腹腔注射D-半乳糖[120 mg/(kg·d),连续8周]制备AD样大鼠模型。每日腹腔注射后,电针组大鼠予电针刺激“内关”“间使”,连续波,频率50 Hz,电流1 mA,20 min/次,每日1次,共8周。假电针组仅于“内关”“间使”位置浅刺至皮下,不通电,其余操作均与电针组同。干预结束后,以Morris水迷宫实验评估大鼠空间学习记忆能力,免疫荧光标记法检测蓝斑核多巴胺β羟化酶和c-Fos共定位去甲肾上腺素能神经元表达数、海马CA1区胶质纤维酸性蛋白和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)共定位星形胶质细胞数,蛋白质印迹法测定大鼠海马去甲肾上腺素(NE)、β2肾上腺素受体(β2AR)、β-抑制蛋白2(β-arrestin2)、核转录因子-κB(NF-κB)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)蛋白表达水平,酶联免疫吸附测定法检测海马组织TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)含量。结果与正常组比较,模型组大鼠平均逃避潜伏期延长,平台穿越次数和在目标象限探索时间减少(P<0.01);电针干预能缩短大鼠平均逃避潜伏期,增加平台穿越次数和在目标象限探索时间(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠共定位去甲肾上腺素能神经元数减少、共定位星形胶质细胞数增多(P<0.01),NE、β2AR、β-arrestin2及IκBα蛋白表达降低(P<0.01),NF-κB蛋白表达增加(P<0.01),TNF-α、IL-1β及IL-6含量增加(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠共定位去甲肾上腺素能神经元数增多、共定位星形胶质细胞减少(P<0.01),NE、β2AR、β-arrestin2及IκBα蛋白表达增加(P<0.01),NF-κB蛋白表达减少(P<0.01),TNF-α、IL-1β及IL-6含量减少(P<0.01)。与模型组比较,假电针组大鼠上述各项指标差异均无统计学意义。结论预电针“内关”“间使”可缓解AD样大鼠学习记忆功能障碍,减轻蓝斑核去甲肾上腺素能神经元丢失,抑制星形胶质细胞激活,保护蓝斑核-海马神经环路,其作用机制可能与抑制了β2AR/β-arrestin2/NF-κB炎性通路的激活相关。