散养云南地方猪源乳酸菌分离、鉴定及其益生特性的研究

本试验旨在筛选优质猪源乳酸菌,为猪用益生菌制剂研发奠定基础。以散养云南地方猪新鲜粪便为菌株分离来源,采用MRS+碳酸钙固体培养基分离纯化乳酸菌,经生理生化和16S rRNA测序鉴定得到9株乳酸菌,测定并评价其抗生素敏感性、抑菌活性、胃肠道耐受性、黏附能力和抗炎能力,综合比较不同菌株之间的益生特性。结果表明:从散养云南地方猪新鲜粪便中分离筛选出9株对氨苄青霉素、头孢噻吩和青霉素G等6种抗生素敏感或中度敏感且抑菌活性较强的菌株,经过16S rRNA基因序列分析和生理生化鉴定,DBS4-3、DBS5-5、DBS2-3、SBC4-9、SBC5-3和ZK3-1为罗伊氏乳杆菌,SBC1-6和ZK7-2为发酵乳杆菌,ZK2-2为黏膜乳杆菌。DBS2-3、SBC5-3和ZK7-2可耐受低pH和高胆盐环境;SBC5-3和ZK7-2对肠上皮细胞HT-29具有较强的黏附能力;SBC5-3可显著降低肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导HT-29细胞白细胞介素-8(IL-8)基因相对表达量(P<0.05)。综上所述,SBC5-3是一株具有良好的黏附和抗炎效果、抑菌能力强、对抗生素敏感且能耐受胃肠道环境的猪源乳酸菌,可用作微生态制剂候选菌株进一步开展深层次研究。

固态发酵饲料工艺优化及抗营养因子降解效果研究

本研究旨在对黑曲霉和乳酸杆菌(植物乳杆菌和发酵乳杆菌)二段固态发酵大豆皮和菜籽饼工艺条件进行优化,并对其发酵前后营养物质和抗营养因子含量变化进行研究。采用单因素试验设计,以发酵产物中还原糖含量为指标,筛选出黑曲霉发酵阶段适宜的发酵温度、料液比、发酵时间、大豆皮和菜籽饼原料比例和接种量,并通过四因素三水平(L 934)正交试验探究料液比、发酵时间、大豆皮和菜籽饼原料比例和接种量对黑曲霉发酵产物中还原糖含量的影响。在黑曲霉固态发酵的最佳工艺基础上,采用单因素试验设计,以发酵产物中乳酸杆菌活菌数为指标,探究乳酸杆菌发酵阶段适宜的发酵时间、发酵温度、接种量和尿素添加量,并通过四因素三水平(L 934)正交试验探究发酵时间、发酵温度、接种量和尿素添加量对乳酸杆菌发酵产物中乳酸杆菌活菌数的影响。结果表明:黑曲霉最优发酵工艺为发酵温度35℃,料液比1.0∶2.8 g/mL,发酵时间60 h,大豆皮和菜籽饼原料比例2∶1,接种量5×107 CFU/g。乳酸杆菌最优发酵工艺为发酵温度35℃,发酵时间60 h,接种量5×106 CFU/g,尿素添加量1.0%。经黑曲霉和乳酸杆菌二段固态发酵后,发酵产物中粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分含量较发酵前均显著增加(P<0.05),粗纤维、大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白、硫代葡萄糖苷和单宁含量较发酵前均显著降低(P<0.05)。由此可见,黑曲霉和乳酸杆菌(植物乳杆菌和发酵乳杆菌)二段固态发酵可提高大豆皮和菜籽饼饲用价值。

昆明犬源乳酸菌的分离、鉴定与益生特性研究

本试验旨在筛选优质犬源乳酸菌,为犬用微生态制剂的研发奠定基础。以昆明犬新鲜粪便作为菌株分离来源,通过MRS+碳酸钙固体培养基分离纯化乳酸菌,经16S rRNA测序鉴定得到21株乳酸菌,测定并评价其抗生素敏感性、抑菌活性、胃肠道耐受性、黏附能力和抗炎能力,综合比较不同菌株之间的益生特性。结果表明:从昆明犬新鲜粪便中分离筛选出7株具有良好的抗生素敏感性、抑菌活性和胃肠道耐受性的乳酸菌菌株,经过16S rRNA基因序列分析,MKLQ3807-13、MKLQ3807-35、MKLQ4704-19、MKLQ4704-30、MKLQ4704-49和MKCH1884-30为罗伊氏乳杆菌,MKCH1884-43为格氏乳杆菌。MKLQ3807-13、MKLQ3807-35、MKLQ4704-19、MKLQ4704-30和MKCH1884-43对肠上皮细胞HT-29具有较强的黏附能力;MKLQ3807-13和MKCH1884-43可显著降低肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的HT-29细胞白细胞介素-8(IL-8)基因相对表达量,且具有较好的自聚集能力与表面疏水性。综上所述,MKLQ3807-13和MKCH1884-43这2株乳酸菌有优良的益生特性,可为警犬专用微生态制剂的研发奠定基础。