副溶血性弧菌直接溶血毒素65位氨基酸突变体的构建

目的 将副溶血性弧菌直接溶血毒素 6 5位氨基酸进行突变。方法 酶切 tdh基因获得tdhm2 6 8- 5 70 bp,一对突变引物扩增出 tdhm 1- 2 6 7bp,与载体 p U C19连接并转化大肠杆菌 JM10 9;对重组质粒进行测序鉴定。结果 DNA测序结果表明 tdhm和 tdh的序列有 2个碱基的差别。结论 按照预期设计成功突变了副溶血性弧菌的直接溶血毒素的 6 5位氨基酸 。

副溶血性弧菌直接溶血毒素基因的原核表达及产物的性质

目的实现副溶血性弧菌直接溶血毒素tdh基因在大肠杆菌中的表达,鉴定表达产物的生物学活性和免疫原性。方法构建tdh基因的原核表达系统NWⅡtdh/Trc99A/JM109,并在30℃条件下,用0.8mmol/LIPTG诱导表达。用SDS-PAGE分析蛋白表达;溶血试验检测表达蛋白的溶血活性。将表达产物腹腔注射免疫兔,用试管凝集反应试验检测特异性抗体。用溶血抑制试验检测该抗体体外对TDH溶血活性的抑制作用。结果NWⅡ在上述条件下诱导后,TDH呈可溶性、融合性表达。SDS-PAGE表明,表达蛋白的相对分子质量Mr约23000。薄层扫描显示,细菌的周质腔中的蛋白量最高,占总蛋白的13.4%。溶血试验表明,表达的蛋白具有溶血活性。用表达蛋白免疫兔产生的相应抗体,在体外具有抑制TDH溶血活性的作用。结论tdh基因在原核表达系统Trc99A/JM109中获得成功表达,为基因工程大规模制备TDH抗原,制备抗TDH的多克隆和/或单克隆抗体,构建基因工程菌苗,阐明该菌的致病机制打下了基础。

副溶血性弧菌耐热直接溶血毒素基因的克隆

目的探讨克隆副溶血性弧菌（Ｖｐ）耐热直接溶血毒素基因的方法。方法用ＰＣＲ技术扩增目的基因，双酶切载体 ｐＵＣ１９和目的基因 ＤＮＡ，连接并转化大肠杆菌 ＪＭ１０９。对重组质粒进行 ＰＣＲ鉴定、酶切鉴定和序列分析。结果凝胶电 泳显示，标准株Ｖｐｌ４－９０基因组ＤＮＡ的ＰＣＲ产物长约６００ ｂｐ。阳性克隆的ＰＣＲ产物也为一长约６００ ｂｐ）的条带，经双 酶切可切出一约 ６００ ｂｐ的条带。 ＤＮＡ 测序结果表明与 Ｇｅｎｅｂａｎｋ中的序列有 ９９．６５％的同源性。结论利用该方法成功 克隆了目的基因，为制备用于现场检测的基因探针和Ｖｐ的保护性菌苗以及阐明Ｖｐ的致病机理奠定了基础。

抗生素应用与医院感染及监控管理初探

目的初步探讨抗生素合理应用的方法，以降低医院感染。方法通过某综合医院上报 省医院感染管理协调指导组的医院感染监控资料，院内感染病例排除侵袭性操作、糖尿病、免疫抑 制剂、化疗、输血或血制品等危险因素，由单因素──抗生素所致，对照选自本院同科室且非院内 感染者，逐个查阅病案，对其抗生素应用进行了调查分析。结果医院感染发生率与抗生素不合理 应用呈正相关。结论医院各个部门必须切实监督、控制抗生素的不合理应用。

社区护理干预对老年高血压患者的效果分析

现如今,我国高血压患者的患病率处于上升趋势,高血压是心脑血管疾病中最为常见的一种,高血压疾病可防可控,其中最有效的干预方式是社区干预。随着国家对基层医疗的加大投入,社区对于高血压疾病的加大防控,但是也增加了社区医护人员的工作压力[1,2]。根据研究资料显示,对老年高血压患者采取社区护理干预,可有效地提升患者依从性,改善血压控制效果[3]。本次研究探讨社区护理干预运用于老年高血压患者的护理效果。现报道如下。

家庭支持与四月龄婴儿母乳喂养相关性调查研究

目的了解本社区4月龄婴儿母乳喂养率和家庭支持之间的关系,为探索进一步提高母乳喂养率的措施提供参考。方法采取自行设计的调查问卷对本社区4月龄婴儿母乳喂养情况和家庭支持情况进行调查,采用SPSS 12.0对数据进行统计分析。结果本社区4月龄婴儿母乳喂养率仅为41.5%,不同喂养方式的调查对象家庭支持得分的差异有统计学意义(F=19.29,P<0.001),两两比较后发现母乳喂养与混合喂养,母乳喂养与人工喂养之间的差异均有统计学意义(均有P<0.001)。结论本社区4月龄婴儿母乳喂养率较低,家庭支持对提高母乳喂养率具有较重要的影响,应重视对家庭的知识宣教。