Toll样受体9的功能及其致病机制

Toll样受体9(TLR9)是Toll样模式识别受体家族成员之一,表达于免疫细胞,通过与细菌DNA作用而诱导机体的固有免疫反应。近年来的研究发现,TLR9也表达于其他几种非免疫细胞,包括肾小球足细胞,并以线粒体DNA为配体,激活细胞的损伤信号通路,从而参与细胞损伤。本文就TLR9在免疫和非免疫细胞中的作用及其机制作一综述。

Toll样受体9在嘌呤霉素氨基核苷导致足细胞损伤中的作用

目的:我们发现Toll样受体9(TLR9)在嘌呤霉素氨基核苷(PAN)处理的足细胞中上调。本研究试图确定TLR9是否参与PAN对足细胞的损伤作用。方法:(1)用PAN诱导体外培养的足细胞损伤模型,以定量逆转录PCR(qRT-PCR)和Western Blot检测足细胞TLR9及该通路其他组分的变化。同时,利用流式细胞术检查足细胞凋亡情况。用PAN诱导大鼠足细胞损伤,以qRT-PCR和免疫组化法检测大鼠肾小球中TLR9表达变化。(2)将TLR9干扰RNA(siRNA)表达质粒和对照质粒分别转染足细胞,用Western Blot检测比较核因子κB(NF-κB)p65和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)磷酸化、qRT-PCR比较白细胞介素12(IL-12)的mRNA变化,流式细胞仪比较足细胞凋亡情况。结果:(1)与对照组相比,经PAN刺激的足细胞,其TLR9、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、IL-12的mRNA水平明显上调,磷酸化p65和磷酸化p38显著增加,细胞凋亡增加。PAN大鼠模型的肾小球中TLR9 mRNA表达上调,免疫组化显示TLR9蛋白显著增加。(2)足细胞转染TLR9干扰质粒后,TLR9的mRNA和蛋白表达水平降低;而经PAN处理后,该细胞与转染对照siRNA的细胞相比,其磷酸化p65和磷酸化p38的水平降低,IL-12 mRNA表达降低,足细胞凋亡减少。结论:TLR9信号通路参与了PAN诱导的足细胞损伤过程,其机制可能是促进炎症因子产生及p38 MAPK依赖的细胞凋亡。