三七提取物抗谷氨酸损伤PC12细胞的活性筛选及成分分析

目的研究三七提取物抗谷氨酸损伤PC12细胞的活性筛选,并分析活性部位的化学成分。方法以谷氨酸损伤PC12细胞为模型,实验分为对照组、模型组、石油醚提取物和超临界CO_2萃取物组(6.25、12.50、25、50、100、200μg/m L)。采用MTT比色法对三七石油醚提取和超临界CO_2萃取部位进行活性筛选,并利用气质联用技术(GC-MS)对三七石油醚提取物和超临界CO_2萃取物进行化学成分鉴定分析。结果与对照组比较,25 mmol/L谷氨酸作用PC12细胞24 h,细胞生长抑制率接近50%。不同浓度石油醚提取物组与模型组的细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05),25、50、100μg/m L石油醚提取物组间的细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度超临界CO_2萃取物组与模型组的细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05),25、50、100μg/m L超临界CO_2萃取物组间的细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05)。50、100μg/m L超临界CO_2萃取物组与石油醚提取物组的细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05)。经GC-MS技术分析得出,超临界CO_2萃取物中主要的脂溶性成分人参炔醇含量(13.09%)高于石油醚提取物(4.10%)。结论石油醚提取物与超临CO_2萃取物对PC12细胞均有保护作用,但超临界CO_2萃取物具有较好的细胞保护作用。

三七超临界CO_2萃取物对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用

目的研究三七超临界CO_2萃取物(SFE)对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法以谷氨酸损伤PC12细胞为模型,采用MTT法检测细胞存活率,LDH法检测乳酸脱氢酶的漏出率,Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡,Fluo-3/AM荧光染色法检测细胞内钙离子浓度,Western blot法检测PICK1、GluR2蛋白的表达。结果谷氨酸对PC12细胞具有兴奋性毒性作用,其半数抑制浓度(IC50)为25 mmol·L^(-1)。不同浓度三七SFE(25、50、100 mg·L^(-1))、PICK1抑制剂FSC231(100μmol·L^(-1))、三七SFE(100 mg·L^(-1))+FSC231(100μmol·L^(-1))预处理可明显提高细胞存活率,减少LDH的释放,降低PC12细胞的凋亡率,减少钙离子内流,降低PICK1蛋白表达,增加GluR2蛋白表达。结论三七超临界CO_2萃取物对谷氨酸损伤后的PC12细胞具有保护作用,机制可能与抑制PICK1、增加GluR2蛋白表达有关。