山莨菪碱舒张微血管作用与血管内皮的关系

目的 研究山莨菪碱舒张微血管作用与内皮细胞的关系及其可能的作用机制。方法 以去甲肾上腺素预收缩大鼠肠系膜血管床后给予山莨菪碱 ,观察去除血管内皮、给予NO合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯 (L NAME)、环氧酶抑制剂吲哚美辛和ATP敏感性钾通道 (KATP)开放抑制剂格列本脲后对血管张力变化的影响。结果 山莨菪碱对肠系膜血管床的舒张作用在去除血管内皮后 ,以 1μmol·L- 1的吲哚美辛、10 μmol·L- 1的L NAME或 1μmol·L- 1的格列本脲预处理后均显著减弱。结论 山莨菪碱的舒张微血管作用有内皮依赖性 ,且与内皮源性舒张因子。

抑制PPAR-α表达对ET-1诱导的心肌肥大和PI3K/Akt/GSK3β-NFATc4通路的影响

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PPAR-α)在病理性心肌肥大中的作用及其信号机制。方法:应用Invitrogen's Stealth RNAi抑制心肌细胞PPAR-α的表达;采用[3H]-亮氨酸掺入法和RT-PCR检查心肌细胞蛋白质合成和心房利钠因子(ANF)mRNA的表达;采用Western blotting法检测Akt/GSK3β的磷酸化表达;应用免疫荧光技术检测NFATc4的胞核移位。结果:(1)RSS304168是最有效的PPAR-αRNAi,特异性地抑制了PPAR-α的表达。(2)非诺贝特预处理抑制了内皮素-1(ET-1)诱导的心肌细胞肥大(蛋白质合成和ANF mRNA的表达);RSS304168加强了ET-1的诱导效应,而且逆转了非诺贝特对心肌肥大的抑制效应。(3)非诺贝特降低了ET-1诱导的Akt/GSK3β的磷酸化表达,RSS304168增强了ET-1的诱导效应,ET-1和RSS304168的上述作用可被PI3K阻断剂LY294002所阻断;RSS304168逆转了非诺贝特对Akt/GSK3β的磷酸化表达的负性调控作用。(4)非诺贝特抑制了ET-1诱导的NFATc4的胞核移位;而RSS304168加强了ET-1的诱导作用,逆转了非诺贝特对NFATc4胞核移位的抑制作用。结论:PPAR-α激活可以通过PI3K/Akt/GSK3β-NFATc4通路抑制ET-1诱导的心肌肥大反应。

依那普利对2型糖尿病大鼠肠系膜血管内皮细胞的保护作用

目的 糖尿病血管病变的初始原因是血管内皮细胞损害。本研究观察依那普利对糖尿病大鼠肠系膜血管内皮细胞是否有保护作用。方法 大鼠用高脂饮食饲养 4周后 ,ip链佐霉素 30mg·kg- 1诱导 2型糖尿病 ,继续饲以高脂饮食 4周后 ,依那普利组给予依那普利 10mg·kg- 1·d- 1,ig ,连续 4周。采用大鼠离体肠系膜血管灌流技术 ,用去甲肾上腺素 1μmol·L- 1预收缩血管 ,再给予乙酰胆碱 (ACh) 1μmol·L- 1使血管舒张。观察ACh的舒张率来反映内皮细胞功能。结果 糖尿病大鼠肠系膜血管ACh舒张率为 (33±8) % ,较对照组 (79± 8) %明显降低 ,依那普利治疗组血管ACh舒张率为 (5 2± 6 ) % ,较糖尿病组明显改善。用皂素去内皮后 ,三个组肠系膜血管对ACh舒血管的反应性均明显降低 ,三组间无显著性差异。去内皮前后 ,三个组肠系膜血管对硝普钠舒张血管的反应性无显著变化。结论 依那普利对 2型糖尿病大鼠肠系膜血管内皮细胞具有保护作用。

山莨菪碱对大鼠肠系膜微循环及产时宫颈水肿微循环的影响

目的 :探讨山莨菪碱 (anisodamine ,Ani)对大鼠肠系膜微循环及与安定合用时对宫颈水肿产妇宫颈微循环的影响。方法 :静注高分子右旋糖酐造成大鼠微循环障碍 ,观察Ani对肠系膜微血管管径、流速、流态的影响。宫颈水肿产妇治疗组宫颈注射Ani并静注安定 ;对照组徒手上推宫颈并加用 0 .5 %催产素静滴。结果 :Ani能明显改善微循环障碍大鼠肠系膜微血管流速和流态 ;治疗组产妇剖宫产率为 9.35 % ,明显低于对照组 (剖宫产率 81.81% )。结论 :Ani能明显改善大鼠肠系膜微循环障碍 ;Ani加安定能明显改善人宫颈水肿微循环 ,有利于阴道分娩 ,降低剖宫产率。

野黄芩苷联合用药抗肿瘤机制研究进展

野黄芩苷是一种天然的黄酮类化合物,具有抗氧化,抗纤维化、抗炎、改善心脑缺血等多种药理活性,主要用于脑卒中、冠心病和心绞痛等心脑血管疾病的防治。此外,大量研究证实野黄芩苷单用具有抗肿瘤活性,对非小细胞肺癌、乳腺癌、结直肠癌、卵巢癌和肝癌等具有一定的治疗作用。近年来,野黄芩苷与其他药物联合运用抗肿瘤的策略也越来越受到重视,其作用机制包括抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡、抑制肿瘤细胞的侵袭和转移、提高肿瘤耐药细胞对化疗药物的敏感性、诱导肿瘤细胞自噬等。本文综述野黄芩苷联用抗肿瘤的作用及分子机制,为其进一步开发利用提供科学依据。

参三七皂苷Rb_1对缺氧复氧损伤心肌细胞[Ca^(2+)]i含量和钙稳态的影响

目的:探讨参三七皂苷Rb1预处理对肥厚心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤游离钙([Ca2+]i)的影响及其与心肌细胞保护作用与关系。方法:采用体外培养乳鼠心肌细胞,血管紧张素I(IAngII)刺激形成肥厚模型,实验分为7组:①正常对照组(C);②肥厚细胞模型对照组;③肥厚细胞H/R损伤组(H+H/R);④-⑦:Rb1预处理(0.01～10μmol/L)+H/R组;用激光共聚焦显微镜测定[Ca2+]i以及对电压依赖和受体操纵性激动剂KCl,NE诱发细胞内钙离子变化的影响。结果:经缺氧2h复氧1h后,肥厚细胞H/R组[Ca2+]i荧光强度较对照组显著增高,Rb1预处理组细胞内[Ca2+]i荧光强度较肥厚细胞H/R损伤组显著降低(P<0.01)。Rb1预处理使KCl、NE诱发的细胞内钙荧光强度仅增加61.3%和78.9%,升幅显著下降(P<0.01)。结论:参三七皂苷Rb1预处理具有显著减轻H/R肥厚心肌细胞钙超载作用,是其细胞保护作用的重要机制。

注射用头孢呋辛钠特殊安全性研究

目的:本文采用溶血性、血管刺激性试验、肌肉刺激性试验、全身主动过敏试验(ASA)和被动皮肤过敏试验(PCA)检测供试品注射用头孢呋辛钠与市售注射用头孢呋辛钠局部毒性和过敏性。方法:以125 mg/mL浓度进行体外溶血性试验;以150 mg/mL、125 mg/mL浓度给药进行新西兰兔血管刺激性试验;以250 mg/mL、125 mg/mL浓度给药进行新西兰兔肌肉刺激性试验;采用豚鼠进行ASA,致敏剂量分别为0.58、0.29 mg/只,激发剂量分别为1.16、0.58 mg/只;采用大鼠进行PCA,致敏剂量分别为75.0、62.5 mg/只,激发剂量与致敏剂量一致。结果:供试品及市售参比制剂无体外溶血、无红细胞凝聚作用、无血管刺激性;最大给药浓度的供试品及市售参比制剂可引起明显肌肉刺激性,恢复期结束时供试品组与市售参比制剂组高剂量组呈恢复趋势,低剂量组完全恢复;供试品及市售参比制剂ASA和PCA试验过敏反应发生率均为0。结论:供试品注射用头孢呋辛钠与市售参比制剂的溶血性、刺激性和过敏反应情况基本一致,为临床应用提供了安全性依据。

激活PPAR-γ对ET-1诱导心肌肥厚及calcineurin信号通路的影响

目的:观察PPAR-γ激动剂罗格列酮对内皮素-1(ET-1)诱导心肌肥大的作用,并探讨PPAR-γ激活后抑制心肌肥厚的机制。方法:采用[3H]亮氨酸掺入法、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)等实验方法,观察罗格列酮对ET-1诱导培养新生SD大鼠心肌细胞肥大的作用,罗格列酮对ET-1诱导的心肌细胞钙调神经磷酸酶(calcineurin)活性、mRNA及蛋白表达增加的影响。结果:罗格列酮可显著抑制ET-1所致心肌细胞蛋白合成增加、肥大基因表达、Calcineurin酶活性增高、mRNA及蛋白表达增加(P<0.01),该作用可被PPAR-γ受体拮抗剂GW9662逆转(P<0.01)。结论:ET-1可通过激活calcineurin信号通路诱导心肌肥厚,罗格列酮以PPAR-γ依赖的方式抑制calcineurin信号通路,防止心肌肥大发生。

人参总皂苷对心理应激高血压大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用

目的探讨人参总皂苷预适应对慢性心理应激高血压大鼠I/R损伤的保护作用及机制。方法将50只SHR大鼠随机分为5组,每组10只:①SHR组;②假手术组;③ I/R组;④~⑤ GS100mg/kg、200mg/kg组。各组于束缚应激的同时灌胃给药,SHR组给予等量生理盐水。①I/R组:行冠脉结扎缺血40 min,再灌30 min;②GS预适应组院冠脉结扎缺血40min,再灌30min;分别记录实验前,缺血10,20min,再灌10,20,30min心功能变化;③假手术组院手术步骤同上,以BL-420+生物机能实验系统记录上述指标。结果各组术后各时段LVP、± dp/dt max均随时间延长而下降,显著低于SHR对照组和假手术组, I/R组大鼠LVP,±dp/dtmax均显著低于SHR组和假手术组。与对照组比较,束缚应激后GS组心肌NO活性上升最大幅度分别较I/R组提高1.27、1.66倍;GS组心MT的升高幅度均超过SHR对照组的变化,明显高于I/R组(<0.05-0.01)。结论应用人参总皂苷预适应可以激发机体内源性保护机制,有益于防治心肌缺血再灌注损伤。

小叶榕药效学初步考察

目的根据咳特灵的功效建立动物模型,初步探讨咳特灵中小叶榕的药效。方法通过小鼠氨水引咳实验、小鼠气管酚红实验、豚鼠平喘实验、小鼠耳片肿胀实验、大鼠足趾肿胀实验,分别观察咳特灵中小叶榕止咳、祛痰、平喘、抗炎效果。结果 (1)小鼠止咳实验:各给药组的咳嗽潜伏期和咳嗽次数与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),给药低、中、高剂量组均对小鼠咳嗽潜伏期有不同程度的延长,咳嗽次数增加(P<0.05)。(2)小鼠祛痰实验:给药低、中、高剂量组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P <0. 05)。(3)豚鼠引喘实验:给药中、高剂量组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),阳性组与阴性对照组比较均有统计学意义(P<0.05),给药低剂量组与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(4)小鼠、大鼠抗炎实验:各给药组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论咳特灵中所含的小叶榕干浸膏具有止咳、祛痰、抗炎、平喘等药效,咳特灵能治疗各种咳嗽症状,可能是小叶榕具有多种药效共同作用的结果。

Relationship between Vasodilation Effect of Aniso-damine and Endothelial Target for Acetylcholine on Microvessels in Rat

Objective To study the effects of anisodamine on microvessels and its relationship with endothelium target for acetylcholine (ETA). Methods Norepinephrine precontracted mesen-teric vascular beds in rat were used to determine changes of tension of vessels in response to anisodamine after removal of endotlielium, coincubated with L- NAME, nitric oxide synthase (NOS ) inhibitor, in-domethacin,cyclo-oxygenase inhibitor and glibenclamide, ATP-dependent K+ channels (KATP) inhibitor. Results Anisodamine produced a vasodilatian effect on mesenteric vascular beds,which was remarkably inhibited after removal of endothelium (P<0. 01). The vasodilation effect of anisodamine was also significantly inhibited after coincubated with indometliacin (1 μmol/U) ,NG-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME,100 μmol/L) and glibenclamide (1 /μmol/L, P< 0. 01, vs control). Conclusion The vasodilation effect of anisodamine on microvessels was mediated by ETA. This is related to prostacyclin,endothelium derived relaxing factor (EDRF) and KATP besides M, a-receptor on vascular smooth muscle cell(VSMC) and calcium-antagonistic effects.

UPLC与HPLC测定创新药LW33中有关物质的对比研究

目的 建立一种超高效液相色谱(UPLC)法测定创新药LW33中有关物质,并与其高效液相色谱法(HPLC)进行对比研究。方法 UPLC法采用Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)色谱柱,流速0.21 mL·min^(-1);HPLC法采用SHISEIDO CAPCELL PAK C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流速1.0 mL·min^(-1);两种方法均以水溶液(用冰醋酸调pH值至3.0)(A)-甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱,检测波长257 nm,柱温25℃。结果 UPLC法和HPLC法测定的有关物质在一定范围内均呈现良好线性,准确度、精密度和样品测定结果基本无差异;UPLC法运行时间为16 min,HPLC法运行时间为40 min,UPLC法溶剂使用量为HPLC法的1/10。结论 UPLC和HPLC 两种方法的准确度、精密度、线性等验证结果以及样品测定结果基本一致,UPLC法与HPLC法相比,分析快速,节省溶剂,适用于快速检测LW33中的有关物质,提高研发的效率。

手性喹诺酮创新药物BYS05的合成

BYS05是一种新型的手性喹诺酮抗生素,目前正在进行临床前研究。为了进行临床前药理毒理研究,需要合成千克级规模的样品。以L-丝氨酸为起始物料,经10步反应合成BYS05,摩尔总收率13.5%,关键中间体经~1 HNMR、^(13) CNMR、MS等进行了结构表征,为该创新药物的药理毒理研究提供了保证。

非诺贝特抑制心肌细胞肥大的信号转导途径

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)对内皮素1诱导的心肌肥大的作用及其对蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β-活化T细胞核因子(Akt/GSK3β-NFATc4)信号通路的影响。方法培养新生SD大鼠的心肌细胞,构建PPAR-α-EGFPN3质粒并转染心肌细胞,采用[3H]亮氨酸掺入法、蛋白免疫印迹(Westernblot)技术、免疫荧光技术等方法,观察PPAR-α过表达对内皮素1诱导的心肌细胞蛋白质合成的作用以及PPAR-α过表达对内皮素1诱导的Akt/GSK3β磷酸化和NFATc4核移位的影响。结果PPAR-α过表达和PPAR-α激动剂非诺贝特显著抑制了内皮素1诱导的心肌肥大;PPAR-α过表达及PPAR-α过表达联用非诺贝特可以显著抑制内皮素1诱导的Akt/GSK3β磷酸化;PPAR-α过表达防止了内皮素1诱导的NFATc4由胞浆到胞核的移位。结论PPAR-α可能通过影响Akt/GSK3β-NFATc4信号通路来抑制内皮素1诱导的心肌肥大反应。

头孢克洛缓释片在Beagle犬体内的药动学及相对生物利用度

建立了高效液相色谱法测定Beagle犬血浆中的头孢克洛。考察了6条Beagle犬随机、交叉口服头孢克洛缓释片(受试或参比制剂)375 mg后体内的药动学及相对生物利用度。结果,受试与参比制剂的主要药动学参数如下:c_(max)(17.68±1.19)和(18.21±2.67)mg/ml,t_(max)(3.83±1.03)和(3.42±0.80)h,AUC_(0→t)(70.40±13.86)和(73.43±20.47)mg·ml^(-1)·h,AUC_(0→∞)(72.98±14.93)和(76.99±22.51)mg·ml^(-1)·h,t_(1/2)(1.51±0.32)和(1.66±0.38)h。头孢克洛受试制剂的相对生物利用度为(99.59±24.26)%。2种头孢克洛缓释片在Beagle犬体内的AUC_(0→t)、c_(max)、t_(max)均无显著性差异(P>0.5)。

带量采购下制药工业的产业链重构与革新

带量采购是目前对医药行业影响最大的政策之一,正在重塑中国制药工业的行业生态,加速行业洗牌。文章从带量采购的历史沿革、政策动机与推进逻辑、对产业链的影响及其潜在发展机遇等几个方面深入探析,针对带量采购的行业痛点凝练企业应对挑战的策略与措施,为相关企业找准合适的定位和选择恰当的竞争策略提供参考。

磷酸二酯酶9A抑制剂LW33的合成

目的:改进LW33的制备工艺。方法:以2,4,6-三氯-5-嘧啶甲醛和环戊基肼盐酸盐为起始原料,通过3步反应合成了磷酸二酯酶9A(PDE 9A)抑制剂LW33{(S)-6-[1-(4-氯苯基)乙氨基]-1-环戊基-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮}。结果:目标产物结构经1H核磁共振(1H-NMR)、13C核磁共振(13C-NMR)和电喷雾质谱(ESI-HRMS)确证,纯度经高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法检测可达99.9%,路线总收率达43.6%。结论:改进后的制备工艺反应条件温和、操作简单、产物纯度好、收率高,适合用于工业化生产。

气相色谱法测定环戊基肼盐酸盐的含量

目的建立气相色谱法测定环戊基肼盐酸盐的含量。方法采用气相色谱法,色谱柱为InterCap for Amines毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm,0.25μm),FID检测器,进样口温度为200℃,检测器温度为280℃,柱温采用程序升温,初始柱温为60℃,保持4 min,以10℃·min^(-1)的速率升温至140℃,再以6℃·min^(-1)的速率升温至250℃,保持5 min,载气为氮气,流速为1.5 mL·min^(-1),分流比5∶1,进样量为1μL。结果分离度良好,空白溶剂无干扰。环戊基肼盐酸盐进样浓度在5.11~12085.00μg·mL^(-1)具有良好的线性关系(r=0.9999),定量限5.38μg·mL^(-1),检测限为2.66μg·mL^(-1),平均回收率(n=9)为101.0%。结论本方法操作简便、灵敏度高、准确度和重复性好,可用于环戊基肼盐酸盐含量的测定。