市售生、制何首乌中主要活性成分的含量分析

目的:建立同时测定市售生、制何首乌中6种主要活性成分(二苯乙烯苷、大黄素8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)含量的方法。方法:采用Agilent Poroshell 120 EC-C18柱;以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速1.0 m L/min;检测波长254 nm。结果:不同产地样品中6种成分含量具有较大差异,其中二苯乙烯苷含量差异最大;而二苯乙烯苷含量较高的样品,其蒽醌类衍生物的含量相对也较高,反之亦然;生、制何首乌中各活性成分平均含量对比发现生首乌各成分含量均高于制首乌。结论:该定量方法快速、简单,可为规范和控制何首乌商品质量提供科学方法和依据。

栀子及其复方栀子豉汤长期用药潜在安全风险研究及建议

目的 :通过栀子苷、栀子水提物和栀子豉汤给大鼠反复用药6个月的安全性研究,为含栀子药物的临床合理用药和风险控制提供依据。方法 :SD大鼠随机分为对照组和三个给药组(栀子苷组、栀子水提物组和栀子豉汤组),三个给药组的剂量均以栀子苷计相同(50 mg/kg)。各组每日灌胃给药1次,连续6个月。于给药后1、3、6个月和给药6个月后停药1个月分别处死一批动物,采集血、尿、脏器等进行血液学、血液生化学、尿常规、凝血、脏器病理等分析。结果 :三个给药组雌、雄动物在1个月和3个月结束时,除了肝、肾颜色稍深染以外,未见其他明显异常反应,检查的各脏器组织均未见与药物相关的病理损伤。给药6个月后,肉眼可见肝脏和肾脏颜色深染;显微镜下可见肝细胞和肾小管细胞中有呈棕色的药物颗粒沉积于胞质,颗粒明显处可见组织细胞损伤。肝脏可见肝细胞轻度变性、胆管增生和炎性细胞浸润。肾脏可见肾小管细胞肿胀、细胞脱落等。栀子苷组与栀子水提物组的肝肾病理改变相近,栀子豉汤组相对较轻。肝肾功能生化分析只有个别指标的改变有统计学显著性意义,但总体上仍在正常值范围内波动。停药1个月后,脏器内的药物沉积情况明显减轻,肝肾组织形态学与对照组无明显差异。结论 :栀子及其复方长期用药(≥6个月)可造成药物在肝脏和肾脏蓄积,并造成潜在的肝肾毒性,与栀子苷有关。建议《中国药典》栀子的【含量测定】项下对栀子苷制定最高限量;【用法与用量】项下增加"不宜长期用药"。另外,建议将栀子从《既是食品又是药品的物品名单》中移除,以避免作为食品长期服用而造成的风险。

适宜中药筛选的高尿酸血症动物模型初探

目的:将四种常用于中药筛选的高尿酸血症(HUA)动物模型进行比较研究,观察各模型特点,为筛选降尿酸中药及复方奠定模型基础。方法:54只雄性SD大鼠随机分为9组,分别为正常组、模型次黄嘌呤(HX)+氧嗪酸钾(OAPS)组、模型酵母膏(YE)+OAPS组、模型低剂量腺嘌呤(AD)+乙胺丁醇(EMB)组、模型高剂量AD+EMB组及相对应的阳性药别嘌呤醇(Allo)组,连续造模14 d。第3,7,14天分别检测大鼠血尿酸(SUA),尿尿酸(UUA),血肌酐(SCr),尿素氮(BUN),肾损伤分子-1(KIM-1)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的水平,在7,14 d收集尿液考察尿量变化,并利用偏光显微镜观察尿残渣中的晶体,造模结束后摘取肾脏称质量并进行病理学检查。结果:模型HX+OAPS组,高剂量AD+EMB组尿量明显减少(P<0.05),除模型YE+OAPS组外,各模型组肾脏指数均明显升高(P<0.05,P<0.01)。模型HX+OAPS组,YE+OAPS组SUA升高较晚(P<0.05),其中,模型HX+OAPS组KIM-1和NGAL从7 d开始明显升高(P<0.05,P<0.01),BUN在14 d明显升高(P<0.05),而模型YE+OAPS组上述指标差异无统计学意义。模型低剂量AD+EMB组,高剂量AD+EMB组3 d时SUA显著升高(P<0.05,P<0.01),其中低剂量AD+EMB组SUA升高具有持续性,BUN,KIM-1,NGAL升高较晚(P<0.05,P<0.01),而高剂量AD+EMB组SUA升高呈一过性,SCr,BUN,KIM-1,NGAL均升高较早且显著高于低剂量AD+EMB组(P<0.01)。除模型YE+OAPS组外,其他模型组肾脏组织中均可见明显的组织形态学异常,其中模型高剂量AD+EMB组的损伤程度最高。结论:4种常用于中药筛选的HUA模型各有特点,其中模型HX+OAPS组,YE+OAPS组的SUA升高较晚,HX+OAPS组伴有轻微肾损伤,YE+OAPS组未发现肾损伤;模型低剂量AD+EMB组造模后SUA迅速升高且持续时间相对较长,同时伴有轻微肾损伤;模型高剂量AD+EMB组SUA升高较早且呈一过性,肾损伤程度颇为严重。考察不同模型的特点及适用情况,同时结合灵敏客观的指标对模型进行评价,有助于为今后筛选治疗HUA中药提供合适的模型。

基于UPLC-Q-TOF-MS分析何首乌提取物体内外成分

阐明何首乌Polygonum multiflorum体内药源性成分。该研究首次以靶器官肝脏中的药源性成分为研究对象,基于UPLC-Q-TOF-MS技术和Targeted-MS-MS模式,采用安捷伦Mass Hunter,Metabolite ID数据处理软件对保留时间、精确相对分子质量、一级、二级质谱信息进行分析并结合标准品和参考文献比对,从中鉴定出5个原型成分、6个代谢产物。此外,该研究还对何首乌给药后大鼠血浆和提取物中的药源性成分进行了分析,从血浆中推出鉴定8个原型成分、19个代谢产物,从何首乌提取物中鉴定出30个化合物。其中大黄素氧化乙酰化、羟化甲基化、葡萄糖醛酸化氧化、羧基化葡萄糖醛酸化和决明柯酮葡萄糖醛酸化代谢产物为首次报道。通过何首乌体内外成分之间的比对分析,初步明确了肝脏中的药源性成分和提取物-血液-肝脏之间成分的传递和转化规律,同时也进一步深化了对何首乌体内药源性成分的认识。

马兜铃水提物在大鼠体内代谢产物的定性分析

目的基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MSE),定性分析马兜铃水提物(AFE)和马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)大鼠体内马兜铃酸类物质(AAs)代谢产物的差异。方法该实验选取SD大鼠,分别连续灌胃给予AFE(110 g·kg^(-1)·d^(-1))和AAⅠ(5 mg·kg^(-1)·d^(-1))5 d,收集血清、尿液和粪便。采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相甲醇(含0.01%甲酸+5 mmol·L^(-1)乙酸铵,A)-水(含0.01%甲酸+5 mmol·L^(-1)乙酸铵,B)梯度洗脱(0~1.0 min,10%B;1.0~7.0 min,10%~75%B;7.0~7.2 min,75%~95%B;7.2~10.2 min,95%B;10.2~10.3 min,95%~10%B;10.3~12.0 min,10%B),流速0.3 mL·min^(-1)。电喷雾离子源(ESI)正离子模式采集,扫描范围m/z 100~1200。结合UNIFI 1.9.4.053系统,采用Pathway-MSE定性分析鉴定生物样品(血清、尿、粪便)中AAs原型和相关代谢产物的种类,平行比较AFE组和AAⅠ组亚急性毒性实验中大鼠体内代谢产物的异同。结果与AAⅠ组比较,AFE组血清、尿液与粪便生物样品中分别鉴定出6、10和13个共有代谢产物,以及14、20和30个特有代谢产物。主要AAs成分均遵循去甲基化、硝酸还原和结合等代谢过程。与AAⅠ组的平行比较分析显示,AFE组血清中AAⅠ原型成分和生物样品中多数AAⅠ代谢产物[AAⅠa、马兜铃内酰胺Ⅰ(ALⅠ)a、7-OHALⅠ及其结合型衍生物等]表达量均明显升高(P<0.05,P<0.01),AFE组粪便中ALⅠ的代谢产物表达量显著低于AAⅠ组(P<0.01),AFE组尿液和粪便中还鉴定出多种AAⅠ组未发现的ALⅠ外排代谢产物。结论AFE中AAs成分均显示出与AAⅠ成分相近的体内代谢规律,但马兜铃中多种AAs成分共存可能会影响AAⅠ的代谢,通过增加AAⅠ与ALⅠ代谢外排,从而达到减小不良反应作用。