红豆杉内生真菌Trichoderma sp.次生代谢产物及其抗菌活性研究

目的从红豆杉内生木霉属真菌MPT-009的次生代谢产物中发现具有抗菌活性的单体化合物。方法采用硅胶、ODS、Sephadex-LH20柱层析和半制备高效液相等方法进行分离,利用高分辨率质谱、NMR波谱数据和电子圆二色谱(ECD)计算等方法确定化合物结构,通过二倍稀释法评价化合物对8种临床耐药性细菌和7种植物病原真菌的抗菌活性。结果从木霉属真菌MPT-009大米发酵产物中共分离得到了一个新的聚酮化合物trichoketide F(1)和6个已知化合物10-deacetylkoningiopisin D(2)、koninginin A(3)、koninginin B(4)、koninginin D(5)、koninginin E(6)、isoharziandione(7)。化合物1对马铃薯黄萎病菌、水稻纹枯病菌、油菜菌核菌、棉花枯萎病菌、草莓黑斑病菌、玉米小斑病菌显示一定的抑制活性,MIC值为12.5~50μg/mL。结论本文对红豆杉内生真菌Trichoderma sp.的次生代谢产物进行了深入研究,分离得到1个新化合物,丰富了木霉属真菌代谢产物,且该化合物对油菜菌核病菌具有较好的抑制活性,MIC值为12.5μg/mL。

昆虫钠离子通道基因突变及其与杀虫剂抗性关系的研究进展

昆虫电压门控钠离子通道(voltage-gated sodium channel)存在于所有可兴奋细胞的细胞膜上,在动作电位的产生和传导上起重要作用,是有机氯和拟除虫菊酯杀虫剂的靶标位点。在农业和医学害虫控制过程中,由于有机氯和拟除虫菊酯杀虫剂的广泛使用,抗药性问题日益突出。其中,由于钠离子通道基因突变,降低了钠离子通道对有机氯和拟除虫菊酯类杀虫剂的亲和性,从而产生击倒抗性(knock-down resistance,kdr),已成为抗性产生的重要机制之一。本文综述了昆虫钠离子通道的跨膜拓扑结构、功能、进化及其基因的克隆;更重要的是总结了已报道的40多种昆虫40个钠离子通道基因非同义突变,以及钠离子通道基因选择性mRNA剪接和编辑,以及它们与杀虫剂抗性的关系;也评述了钠离子通道基因突变引起蛋白质结构的改变,从而对杀虫剂抗性的影响机制。这些研究对于进一步鉴定与杀虫剂抗性相关的突变及抗性机制,开发有机氯和拟除虫菊酯类杀虫剂抗性分子监测方法具有重要意义。

刺槐豆多糖纳米硒的制备及表征

以刺槐豆多糖为软模板,用抗坏血酸还原亚硒酸法制备纳米硒,探讨反应时间、温度、刺槐豆多糖及抗坏血酸浓度对产物粒径和形貌的影响,并采用紫外光谱（UV）、X衍射和扫描电镜（SEM）进行表征.结果表明：当抗坏血酸和亚硒酸摩尔比为5∶1,刺槐豆多糖质量分数为0.2‰,60℃反应4h后可得红色均匀的球状纳米硒颗粒,平均粒径为95～100 nm.

小蓟内生真菌Chaetomium Bostrychodes次级代谢产物及其生物活性研究

目的:对一株小蓟内生旋丝毛壳菌(Chaetomium bostrychodes)次级代谢产物化学结构及生物活性进行研究。方法:利用柱层析、Sephadex-20、HPLC等方法对发酵产物进行分离纯化,经核磁共振波谱、高分辨质谱技术并结合参考文献确定化合物结构,采用二倍稀释法检测化合物的抗菌活性。结果:从上述发酵产物中分离得到9个单体化合物,分别为aurasperone A(1)、fonsecinone A(2)、granulolactone(3)、4-hydroxyphenylacetone(4)、latifolicinin C(5)、p-hydroxybenzoic acid ethylester(6)、p-hydroxybenzoic acid(7)、phallac acid A(8)、1,2,4-benzenetriol(9),以上化合物均为首次从该菌种中分离得到。对这些化合物的抗临床耐药细菌和植物病源真菌活性进行测试,结果显示均无显著抑制作用。

基于Chelex-100和蛋白酶K的蚊虫足样本DNA提取技术

【目的】探索出一种蚊虫附肢(如单只足)微量DNA的提取方法,用于蚊虫分子鉴定和基因型研究。【方法】采用Chelex-100溶液和蛋白酶K结合的方法用于单只蚊虫足的微量DNA的提取。基于该方法,将不同方法保存的不同蚊种的足作为实验材料,从中提取蚊虫基因组DNA;以之为模板,扩增核糖体DNA的D2,D3,ITS2区以及线粒体COI和COII基因,并对PCR扩增产物进行测序。【结果】提取到了高质量的基因组DNA,PCR扩增获得了高质量的DNA扩增片段,进一步测序获得了高质量的序列。【结论】该方法价格便宜,操作简单方便,减少了对蚊虫样本的依赖。单只足用于DNA提取不影响对剩下的部分开展形态学等研究,可以作为蚊虫分子生物学研究中微量DNA样本提取的重要方法,也为其他昆虫微量DNA的提取提供理论依据。