HPLC测定重组Exendin-4-FC融合蛋白注射液中抗氧剂及其降解物

目的 建立HPLC对重组Exendin-4-FC融合蛋白注射液中11种抗氧剂及其降解物含量测定方法。方法 采用饱和硫酸铵沉淀蛋白,离心后上清液转移至经甲醇活化后的C_(18)固相萃取小柱中,分别用4 mL甲醇、5 mL乙酸乙酯依次洗脱小柱,洗脱液用甲醇-乙酸乙酯(2∶3)混合溶剂定容后过0.22μm PTFE疏水滤膜,经HPLC分析,外标法定量。色谱条件:Kinetex■ XB-C_(18) 100A(100 mm×4.6 mm,2.6μm)色谱柱,检测波长230 nm,柱温箱30℃,进样量5μL,流速0.4 mL·min^(–1),流动相0.1%甲酸-甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B),运行时间45 min。结果 11种目标物在2.5~35μg·mL^(–1)内线性关系良好(R~2≥0.99)。在25,10,5μg·mL^(–1) 3个浓度水平下,平均加样回收率为88.1%~106.5%,RSD为0.10%~9.05%。6份样品重复性RSD为2.01%~4.77%,12份样品中间精密度RSD为2.58%~9.75%,对3批次重组Exendin-4-FC融合蛋白注射液的0月,25℃加速3月及6月正/倒置样品进行检测,结果显示所有批次样品在不同检测点均未有抗氧剂及其降解物浸出。结论 该方法专属性好、准确度与精密度高、溶液稳定性好、方法耐用性高,能够用于对药品中抗氧剂类物质的含量检测。

气相色谱法测定吸附破伤风疫苗中17种邻苯二甲酸酯类增塑剂

目的:基于气相色谱法,建立了对吸附破伤风疫苗中17种邻苯二甲酸酯类增塑剂含量测定方法。方法:采用乙腈沉淀蛋白,氯化钠盐析分层,上清液转移、定容后经气相色谱分析,外标法定量。色谱参数:采用Agilent HP-5(30 m×0.32 mm×0.25μm)毛细管柱;升温程序:初始温度为50℃,保持1 min,以20℃·min^(-1)的速率升温至230℃,保持3 min,再以5℃·min^(-1)的速率升温至300℃,保持5 min;色谱柱流量:1 mL·min^(-1);检测器温度:280℃;进样口温度:250℃;载气:氮气,线速度:19.148 cm·s^(-1);进样量:1μL,分流模式:不分流,进样方式:自动进样。结果:17种增塑剂在0.5~20μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.99)。在15、10、5μg·mL^(-1)3个浓度水平下,加标回收率在83.6%~111.2%之间,RSD为0.39%~3.9%。采用该方法检测5批次吸附破伤风疫苗,药品中均未有增塑剂检出。结论:该方法专属性好,准确度与精密度高,溶液稳定性好,方法耐用性高,能够用于吸附破伤风疫苗药品中增塑剂的含量测定。

新罗丹明酰胺基硫脲荧光探针在水溶液中对Hg^(2+)的识别

设计并合成了一类罗丹明酰胺基硫脲Hg^(2+)荧光探针,通过~1HNMR谱和^(13)C谱进行结构表征。采用紫外-可见光谱和荧光光谱研究了探针RFS对Hg^(2+)的光谱响应。结果表明,探针罗丹明B酰胺基邻氟苯基硫脲(RFS)在水溶液中(HEPES缓冲溶液pH7.2)对Hg^(2+)表现出高选择性,并具有快速、灵敏的显色和Off-On荧光增强效应。探针与Hg^(2+)作用后,溶液颜色由无色变为红色,在1~10μmol/L范围内,探针的荧光强度与Hg^(2+)浓度呈线性关系。比较了因取代基的电子效应不同对探针灵敏度的影响,通过激光共聚焦成像实现了探针RFS在Hela细胞内对Hg^(2+)的识别检测,表明探针RFS可用于检测细胞内的汞离子。

双吲哚马来酰亚胺硫脲化合物的合成及抗肿瘤活性

基于双吲哚马来酰亚胺化合物和硫脲化合物的结构及多样的生物活性,通过1-氨基-3,4-二(吲哚-3-基)-3-吡咯啉-2,5-二酮与异硫氰酸酯反应,合成了17种新的3,4-二(吲哚-3-基)-2,5-二酮-1-吡咯亚胺硫脲类化合物,化合物的结构通过1H NMR、13C NMR、HRMS等进行了表征。该系列化合物的初步抗肿瘤活性测试表明,它们都对细胞周期分裂蛋白25B(CDC 25B)表现出良好的抑制活性(大部分化合物的抑制率在96%以上),具有潜在的抗肿瘤活性及应用价值。