高糖下腺苷A_(2A)受体对人视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的研究高糖下腺苷A2A受体对人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法体外培养人RPE细胞,应用免疫组化的方法检测腺苷A2A受体在人RPE细胞中的表达;用腺苷A2A受体作用培养的人RPE细胞,将其分为高糖(33mM)+腺苷脱氨酶(ADA,2U/ml)、高糖+ADA+腺苷A2A受体特异性激动剂(CGS21680,50μM)、高糖+ADA+CGS21680+腺苷A2A受体特异性拮抗剂(SCH58261,100μM),药物组合刺激RPE细胞24h后,裂解细胞提取RNA,同时收集细胞培养液,分别应用real-time PCR和ELISA的方法检测高糖下腺苷A2A受体对人RPE细胞VEGF mRNA和蛋白的影响。结果腺苷A2A受体在RPE细胞中有表达,在高糖条件下,50μMCGS21680可以刺激RPE细胞VEGF mRNA水平升高约2.7倍,蛋白水平升高1.5倍,而再加100μMSCH58261反而使RPE细胞VEGF mRNA较前下降约40%,蛋白水平较前下降60%。结论在高糖条件下,腺苷A2A受体可以刺激VEGF的合成,因此腺苷A2A受体可能参与糖尿病性视网膜病变新生血管的形成。

标本采集对化学发光法检测PTH的影响

目的通过研究不同采血管和采血后标本放置时间对血清PTH检测的影响,明确标本采集对化学发光法检测PTH的影响。方法 (1)通过不同质控品的精密度研究,明确该项目的精密度;(2)通过研究不同采血管对PTH检测影响,选择合适的采血管;(3)利用合适的采血管,研究采血后放置不同时间,对PTH检测的影响,明确标本放置时间对PTH的影响。结果化学发光法检测PTH的精密度好;添加促凝剂的采血管可以使PTH快速降解,添加抗凝剂的采血管亦可以导致低值PTH假性增高;用无任何添加剂的采血管采集标本后,放置时间越久,PTH降解越快。结论通过本研究明确添加促凝剂和抗凝剂对PTH的检测均有影响,我们选择不加任何添加剂的采血管采集标本;标本采集后,放置时间越久,PTH降解越多,因此,采集标本后需要立即送检。

夹心法HCV抗体诊断试剂的诊断性能评价

目的评价夹心法检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体试剂的诊断性能。方法首先,利用质控品进行该试剂的重复性研究,验证该试剂的临界值重复性;其次,选择55份阴性血清和51份确诊阳性标本,应用新试剂(夹心法)和通用试剂(间接法)检测,通过两种试剂的方法学对比,评价新试剂的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和符合率;再次,选择21例HCV抗体灰区标本,比较夹心法和间接法对灰区标本的检测灵敏度。结果对于被测浓度在±20%浓度范围以外的样本,本试剂能给出稳定的结果;夹心法试剂和间接法试剂的灵敏度均为100%,特异性分别为100%和90.9%。HCV抗体灰区标本,夹心法的检测灵敏度优于间接法(P<0.05)。结论夹心法HCV抗体诊断试剂诊断特异性优于间接法试剂;对HCV抗体灰区标本,夹心法试剂诊断灵敏度优于间接法试剂。

山西省大同市体检人群中抗核抗体筛查的临床意义

目的探讨大同市体检人群中抗核抗体(ANA)筛查的临床意义。方法2019年1至12月山西大同煤矿集团有限公司总医院体检中心体检者5811名,其中男性3197名,女性2614名。采用间接免疫荧光法(IIF)检测抗核抗体,男性与女性组ANA阳性率的比较采用χ^2检验。结果5811名体检者中,ANA滴度>1∶100的总体阳性率为10.45%,其中女性阳性率为15.15%,高于男性阳性率6.60%,差异具有统计学意义(χ^2=112.365,P<0.01),ANA滴度>1∶320总阳性率为3.44%,其中女性阳性率为5.78%,高于男性阳性率1.53%,差异具有统计学意义(χ^2=76.427,P<0.01);男性阳性率基本随年龄增长呈平缓上升趋势,女性上升趋势较男性显著;ANA阳性者体检中,在不同年龄段,高滴度ANA所占比例女性均高于男性,40~49岁及50~59岁2个年龄段差异具有统计学意义,其他年龄段差异无统计学意义。结论体检人群中ANA具有较高的阳性率,各年龄段均存在ANA阳性者,且其分布规律随性别、年龄不同存在明显差异;对于健康人群尤其女性筛查ANA是非常必要的,对于筛查阳性人群应做好自身免疫病防御知识的宣教及追踪随访工作。

外源性视黄酸对人巩膜成纤维细胞MMP-2及TIMP-2 mRNA水平的影响

目的 研究外源性视黄酸（RA）对人巩膜成纤维细胞（HSF）生长的调控,以及对基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶2组织抑制剂（TIMP-2）mRNA水平的影响.方法 体外培养HSF,取第5～7代细胞,经10^-10、10^-9、10^-8、10^-7、10^-6mol/L浓度的RA作用6 d后,进行细胞计数,观察RA对HSF生长的调控情况;用Real-time PCR检测RA作用后HSF中MMP-2、TIMP-2的mRNA水平.对不同浓度组问比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验.结果 RA作用HSF 6 d后,浓度≥10^-9 mol/L RA组对细胞的生长抑制作用差异均有统计学意义（P〈0.05）,随着RA浓度增高,细胞数量逐渐减少,抑制作用呈剂量效应.RA作用6 d后,RA≥10^-8 mol/L时,HSF中MMP-2 mRNA水平有升高趋势,但各组差异无统计学意义（P〉0.05）;RA≥10^-9 mol/L时,TIMP-2 mRNA水平下降（P〈0.05）.结论 RA能够抑制HSF的生长,并可能通过调控TIMP-2的mRNA水平,使巩膜主动重塑.