GeneXpert MTB/RIF技术在结核分枝杆菌利福平耐药基因突变特征中的应用

目的 分析GeneXpert结核分枝杆菌及利福平耐药(Mycobacterium tuberculosis/rifampicin resistance, MTB/RIF,简称GeneXpert)检测诊断对结核分枝杆菌检测的准确性、可行性及利福平耐药rpoB基因的突变特征。方法 选择三亚市结核病定点医院2015-2021年诊断的可疑肺结核患者痰样本(4 234份),同时进行痰涂片、固体培养、固体比例法药敏试验和GeneXpert检测。结果 4 234份痰样本痰涂片、固体培养和GeneXpert检测,阳性检出率分别为29.24%(1 238/4 234)、32.17%(1 362/4 234)、35.40%(1 499/4 234),GeneXpert法检测的阳性率较痰涂片高,差异有统计学意义(χ^(2)=36.775,P<0.01);与固体培养法比较,差异无统计学意义(χ^(2)=9.908,P=0.02)。以固体培养结果为金标准,GeneXpert检测方法检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)的灵敏度和特异度分别为91.04%(1 240/1 362)和90.98%(2 613/2 872)。以比例法药敏试验结果为金标准,GeneXpert法对利福平耐药的灵敏度和特异度分别为96.96%(96/99)和98.86%(1 128/1 141),一致率为98.71%;GeneXpert无探针突变组利福平耐药准确度明显低于有探针突变组;初治和复治病例的探针突变频率差异有统计学意义。对rpoB基因突变频率特征分析:探针E(50.00%)>探针A(22.12%)>探针D(14.42%)>探针B(6.73%)>联合探针(5.77%)>探针C(0.96%)。结论 GeneXpert检测能快速有效地诊断耐利福平结核病,有助于临床早期诊断和治疗。本地区耐利福平结核病rpoB基因突变探针主要发生在探针E和探针A,探针C突变最少。

三亚市2014—2017年涂阴培阳肺结核患者耐药分析

目的了解三亚市涂阴培阳肺结核患者分离菌株耐药水平,为有效控制结核病防治策略提供参考依据。方法收集三亚市2014年4月—2017年12月新登记172例涂阴培阳肺结核患者的临床分离株,进行菌型鉴定。采用WHO推荐的比例法,对分离菌株进行6种抗结核药物[利福平(RFP)、异烟肼(INH)、链霉素(Sm)、乙胺丁醇(EMB)、氧氟沙星(Ofx)、卡那霉素(Km)]的药物敏感性试验。数据采用SPSS 19.0软件进行统计分析。结果分离的172株菌株总体耐药率为23.26%(40/172),耐多药率为1.16%(2/172)。6种药物耐药率由高到低的顺位分别为Sm 12.21%(21/172)、RFP 6.98%(12/172)、INH 5.81%(10/172)、Km 5.23%(9/172)、Ofx 2.33%(4/172)、EMB 0.00%(0/172)。6种药物共出现11种不同耐药形式。总体耐药率与海南省涂阳肺结核患者总耐药率20.9%基本一致,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对涂阴培阳肺结核患者的分离株高耐药率应予以重视,并加强监测,以规范治疗和管理。

GeneXpert Mtb/RIF检测技术在结核病诊断中的应用评价

目的评估GeneXpert Mtb/RIF检测技术对肺结核诊断和耐利福平肺结核筛查的效果,为筛选最佳实验室检测方法提供依据。方法收集三亚市定点医院结核病门诊2015年5月—2016年12月243例临床诊断为肺结核的痰标本,分别进行涂片镜检、痰培养和GeneXpert Mtb/RIF检测,分析三种方法的敏感度和特异度。以比例法药敏为标准,分析GeneXpert检测利福平耐药的敏感度和特异度。结果涂片镜检与GeneXpert Mtb/RIF对比,GeneXpert Mtb/RIF检测结核菌的敏感度为93.7%,特异度为28.9%,GeneXpert Mtb/RIF检测与涂片镜检一致率为83.5%。痰培养与GeneXpert Mtb/RIF对比,GeneXpert检测结核菌的敏感度为96.7%,特异度为56.6%,GeneXpert检测与痰培养的一致率为91.8%。利福平耐药大多与rpoB基因突变有关,GeneXpert Mtb/RIF检测利福平耐药与比例法药敏一致率为98.1%,敏感度为88.9%,特异度为98.9%,并且可检测出利福平耐药基因位点。结论 GeneXpert Mtb/RIF检测技术适用于结核分枝杆菌及耐药结核分枝杆菌的快速筛查,在痰涂片和痰培养上补充GeneXpert Mtb/RIF检测可提高病原学检出率,尽早发现耐多药病患。