糖尿病肾病小鼠中前纤维蛋白1的表达和免疫细胞浸润分析

目的:探讨前纤维蛋白1(profilin 1,PFN1)在糖尿病肾病小鼠中的表达及其与免疫细胞浸润的相关性。方法:利用糖尿病肾病患者肾组织芯片转录组表达数据分析PFN1的表达水平和免疫细胞浸润情况,并通过小鼠动物实验进行验证。将16只C57BL/6小鼠随机分为正常组和模型组,每组8只。模型组采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病肾病小鼠模型,造模成功后检测小鼠肾组织中CD11b、F4/80、CC趋化因子受体4(CC chemo kine receptor 4,CCR4)、白细胞介素1受体I型(interleukin-1 receptor type I,IL-1R1)、B细胞淋巴瘤2(B-cell lympho ma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达水平。另外,在糖尿病肾病细胞模型中过表达PFN1,检测单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和cas pase-3蛋白的表达情况。结果:糖尿病肾病患者肾组织芯片转录组表达数据集GSE30122中,PFN1基因表达量显著升高(P<0.01),且与巨噬细胞和T细胞有显著相关性。糖尿病肾病小鼠模型组肾脏组织可见明显病理改变,肾脏组织中PFN1表达量显著升高(P<0.01),免疫指标CD11b、F4/80、CCR4、IL-1R1和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、cas pase-3表达升高(P<0.01)。过表达PFN1可促进MCP-1和caspase-3蛋白的表达。结论:糖尿病肾病小鼠肾组织中可见巨噬细胞和Th17免疫细胞浸润且PFN1表达上调,促进糖尿病肾病细胞凋亡。

药物Ⅰ期临床试验受试者管理方法的探讨

目的分析Ⅰ期临床试验中影响受试者管理的主要因素,探讨增强受试者依从性、提高试验质量的方法。方法比较2008-2011年措施前与2012年措施后受试者招募、知情同意、筛查、试验过程控制和试验后管理情况。结果联合使用多种招募方式能增加受试者招募人数,招募时长缩短1倍,为后续的筛查工作提供足够的研究对象。充分的知情、严格的筛查和试验过程培训能增强受试者的依从性;专业的随访有助于受试者评价我们的工作。结论通过在受试者招募、知情同意、筛查、试验过程和试验后的受试者管理等环节采取措施能明显增强受试者的依从性,提高试验质量。

糖尿病患者在生化免疫检验过程中运用化学发光免疫测定技术检验的临床价值分析

目的:探究在临床生化免疫检验过程中对糖尿病(DM)患者运用化学发光免疫测定(CLIA)技术检验的价值。方法:此次研究收集2021年1月-2022年10月到我院就诊的100例DM患者设为实验组,同期以我院行健康体检者的100例对象设为对照组。两组在生化免疫检验中均运用CLIA技术,检验项目为空腹及餐后2h血糖(FPG、2hPG),并在空腹、餐后1h及2h等不同状态下检验C肽及胰岛素等水平。比对两组各类项目检验结果,分析CLIA技术检验的准确性。结果:经检验FPG水平、2hPG水平显示,实验组病例的检验值均<对照组对象(P<0.05)。经检验C肽水平、胰岛素水平显示,实验组病例空腹及餐后2h时检验值均>对照组对象,而餐后1h时检验值均<对照组对象(P<0.05)。实验组100例病例经CLIA检出DM者95例,准确性95.00%。结论:在临床生化免疫检验过程中对DM患者运用CLIA技术后,可有效检出DM病症,且准确性较高,可为疾病的后续诊治提供可靠检验信息,可推广和借鉴。

注射用重组人胸腺肽α1人体耐受性临床研究

目的观察健康人体对注射用重组人胸腺肽α1皮下注射的耐受性与安全性,采用剂量递增方案,确定单次及连续给药的安全剂量范围。方法单次给药48例健康受试者入组试验,其中36例分别皮下注射0.3 mg/m^2、0.6 mg/m^2、0.9 mg/m^2、1.4 mg/m^2、2.0 mg/m^2、2.7 mg/m^2注射用重组人胸腺肽α1,12例注射相应剂量的注射用水作为安慰剂;连续给药12例健康受试者分别皮下注射2.0 mg/m^2、2.7 mg/m^2注射用重组人胸腺肽α1,每周给药2次,连续4周。用药后对受试者进行临床观察和实验室检查,评价试验药物在人体的安全性。结果单次给药48例健康受试者入组并完成试验,所有受试者均未出现不良事件。连续给药12例健康受试者入组并完成试验,其中,有5名受试者出现不良事件,其中3例出现大便潜血阳性,1例出现血红蛋白尿,1例受试者出现大便潜血阳性和血红蛋白尿。停药后于随访期复查恢复正常,均无特殊处理,自行好转。结论单次应用注射用重组人胸腺肽α1 0.3~2.7 mg/m^2是安全的,耐受性良好;连续使用4周,每周2次,剂量在2.7 mg/m^2内是基本安全的。

冠心病患者血浆循环miR-126的表达及其对血管内皮细胞的影响

目的:检测血浆循环miR-126和miR-16在冠心病患者和健康人群血浆中的表达,进一步探讨miR-126对血管内皮细胞的影响。方法:(1)收集52例冠心病心肌梗死型患者和52例健康人群的血样标本,采用Trizol LS提取血浆中总RNA,检测血浆miR-126和miR-16的表达;(2)通过转染在人血管内皮细胞株EA.hy926中抑制miR-126的表达,转染30 h后检测血管内皮生长因子的表达。结果:(1)与健康人群相比,循环miR-126在冠心病患者中的表达显著下降(P<0.05);miR-16在两组间的表达无显著差异(P>0.05);(2)内皮细胞株EA.hy926中miR-126被抑制后,血管内皮生长因子的表达为对照组的2.08倍(P<0.05)。结论:血浆循环miR-126在冠心病患者表达下降,血浆循环miR-16在人群中的表达较稳定;miR-126通过负性调节血管内皮生长因子的表达,对血管内皮细胞产生调节作用。

PON1基因启动子多态性及非遗传因素对PCI术后抗血小板治疗临床效应的影响

目的对氧磷脂酶1(PON1)启动子CpG岛区基因多态性可能会影响氯吡格雷的抗血小板疗效。本研究探讨PON1基因启动子区多态性位点-108C/T,-126 G/C和-162G/A以及高血压、糖尿病等非遗传因素对行经皮冠状动脉介入治疗(PCI术)的冠心病患者氯吡格雷抗血小板临床效应的影响。方法根据纳入和排除标准,入选在广东省人民医院行PCI术患者538名,收集患者的临床资料,采用PCR直接测序的方法检测基因型,使用SAS9.1和HPlus软件分析其与氯吡格雷抗血小板效应的关系。结果 PON1启动子区-108C/T,-126 G/C和-162G/A位点,基因型为野生型或突变性对氯吡格雷抗血小板效应差异均无显著性(P>0.05);患者合并高血压[HR(95%CI)=3.837]、糖尿病(HR=2.715)或使用钙离子拮抗剂(HR=2.686)时,PCI术后出现MACE的风险较高(P<0.05)。结论 PON1基因启动子CpG岛区-108C/T,-126 G/C和-162G/A基因变异对接受氯吡格雷抗血小板治疗的冠心病患者在PCI术后出现主要不良心脏事件(MACE)无明显影响。患者合并高血压、糖尿病或使用钙离子拮抗剂会增加PCI术后出现MACE的风险。

用权重基因共表达网络分析识别心脏重构关键节点基因

目的采用权重基因共表达网络分析方法(WGCNA)挖掘心肌梗死后心脏重构的关键节点基因,并研究其与ACE1和ACE2的关系。方法从NCBI的GEO下载2个心肌梗死后心脏重构的全基因组表达数据GSE7487和GSE738;数据初处理后,用WGCNA构建基因共表达网络,识别与心脏重构相关的模块与关键节点基因,分析关键节点基因与ACE1和ACE2的关联性;并在心肌梗死后心脏重构大鼠模型中验证它们的关系。结果分析发现在GSE7487,17个模块中有6个模块与心脏重构相关,模块基因富集于16条KEGG信号通路。在GSE738,5个模块与心脏重构相关,模块基因富集于15条KEGG信号通路,其中有10条信号通路与第一组数据结果相同,这些信号通路涉及心肌肥厚病理、氧化磷酸化、代谢等。进一步利用模块内连通性和基因重要性找到了一些心脏重构的关键调控基因,如钙依赖磷酸酶调节子(RCAN1)。RCAN1表达与ACE1表达高度相关,但与ACE2不相关。在动物模型中验证结果与上述结果一致。结论权重基因共表达网络分析方法是一个高效的系统生物学方法,应用本方法发现了心脏重构的关键节点基因,其中RCAN1可能影响ACE1-ACE2在肾素血管紧张素系统中的平衡。

丹参酮ⅡA磺酸钠对胰腺癌BX-PC-3细胞系增殖与细胞周期调控因子表达的影响

目的:观察丹参酮ⅡA磺酸钠对胰腺癌细胞系BX-PC-3细胞增殖和细胞周期调控因子cyclin A、cyclin D2蛋白表达的影响。方法:分别用不同剂量的丹参酮ⅡA磺酸钠作用于胰腺癌细胞系BX-PC-3,应用MTT比色法检测培养48 h的细胞存活率,应用流式细胞术测定培养48 h细胞周期的变化,Western blotting检测周期蛋白cyclin A和cyclin D2的表达情况。结果:丹参酮ⅡA磺酸钠能明显抑制BX-PC-3细胞增殖,且具有明显的剂量依赖性;流式细胞术显示一定浓度药物作用细胞,可将细胞周期阻滞于G0/G1期;Western blotting检测发现药物能显著下调周期蛋白cyclin A和cyclin D2的表达水平。结论:丹参酮ⅡA磺酸钠能显著抑制人胰腺癌BX-PC-3细胞增殖,下调周期相关因子cyclin A和cyclin D2蛋白表达水平,这可能是丹参酮ⅡA磺酸钠抑制胰腺癌细胞生长增殖的作用机制。

阿奇霉素分散片人体药动学和相对生物利用度研究

目的对阿奇霉素血药浓度测定方法进行改进,研究阿奇霉素分散片的相对生物利用度。方法20名男性健康受试者随机交叉双周期给药,分别口服单剂量阿奇霉素试验制剂及参比制剂500 mg后于不同的时间点采血,100μL血样经乙腈沉淀蛋白后,HPLC-MS/MS检测。DAS2.0软件计算两者的药物动力学参数,并评价试验制剂的生物等效性。结果阿奇霉素在1~1 000 ng.mL-1范围内线性好,日内或日间差均小于1 0%,准确度在97%~110%。稳定性良好。萃取回收率至少大于91%。受试药与对照药的药动学参数t1/2,Tmax,Cmax,AUC0~t,AUC0~∞,分别为：（40.3±6.5）h,（2.1±0.7）h,（541.7±179.4）ng.mL-1,（4 772.4±913.9）ng.h.mL-1,（5 346.9±1 300.0）ng.h.mL-1和（35.6±5.1）h,（1.8±0.5）h,（584.9±147.3）ng.mL-1,（5 059.5±1347.4）ng.h.mL-1,（5 480.5±1 484.3）ng.h.mL-1。结果显示：单剂量给药后,阿奇霉素受试制剂的相对生物利用度为（99.4%±28.3%）。结论本方法简单快速,灵敏可靠,成功应用于阿奇霉素生物等效性研究,阿奇霉素试验制剂相对参比制剂生物等效。

多孔聚3-羟基丁酸-4-羟基丁酸/偏磷酸钙复合膜的制备及降解性能

背景：种子细胞能否成功黏附于支架材料表面,与支架材料的降解性能密切相关。目的：制备多孔聚3-羟基丁酸-4-羟基丁酸/偏磷酸钙复合膜,并观察其体外降解性能。方法：将聚3-羟基丁酸-4-羟基丁酸和偏磷酸钙按50∶50混合均匀,完全溶解于氯仿后,搅拌均匀,倾倒在培养皿上,干燥后即成多孔膜。将其置于循环装置中,流速为0.30m/s,管路内灌满37℃生理盐水50mL。结果与结论：流场作用多孔复合膜2,4,8,16,24h后,其失重率分别为4.5%,5.6%,6.9%,9.6%和10.6%;扫描电镜显示,降解24h后,表面偏磷酸钙微粒已降解完全或脱落,而内凹偏磷酸钙微粒仍嵌入在聚3-羟基丁酸-4-羟基丁酸复合膜内,复合膜表面直径2μm的微孔基本不见,直径30~50μm的大孔基本未变,但孔隙边缘变得圆滑;水静力称重法计算出降解实验前后复合膜吸水率、显气孔率和密度分别为降解前的40.6%,46.3%,1.14g/cm3和降解后的51.6%,54.1%1.05g/cm3。说明实验制备的多孔聚3-羟基丁酸-4-羟基丁酸/偏磷酸钙复合膜降解早期以偏磷酸钙降解为主,降解过程中孔内微丝易降解或断裂。

HPLC-MS/MS法检测辛伐他汀血浆浓度及生物等效性研究

目的改进辛伐他汀血药浓度测定方法，研究辛伐他汀的相对生物利用度。方法20名男性健康受试者随机交叉双周期给药，分别口服单剂量辛伐他汀试验制剂及参比制剂40mg后于不同的时间点采血，200μL血样经1mL乙醚1次萃取后，HPLC—MS／MS检测。DAS2．0软件计算两者的药物动力学参数及相对生物利用度，并评价试验制剂的生物等效性。结果辛伐他汀在0．1-20ng·mL^-1线性好，日内或日间差均〈6％．准确度在101％～109％，稳定性良好，萃取回收率≥82％。受试药与对照药的药动学参数t1/2，tmax，Cmax，AUC0-t，AUC0-∞，分别为：（5．3±5．1）h，（2．2±0．7）h，（4．6±3．0）ng·mL^-1，（24．3±15．7）ng·h·mL^-1，（27．5±21．6）ng·h·mL^-1和（4．5±6．7）h，（1．9±0．7）h，（5．0±3．0）ng·mL^-1，（21．4±13．4）ng·h·mL^-1，（23．9±21．2）ng·h·mL^-1。结果显示：单剂量给药后，辛伐他汀受试制剂的相对生物利用度为（113．1％±17．4％）。结论本方法简单，快速，灵敏，成功应用于辛伐他汀生物等效性研究，辛伐他汀试验制剂相对参比制剂生物等效。

葡萄球菌耐药性和红霉素诱导克林霉素耐药状况

目的了解本地葡萄球菌耐药率以及红霉素诱导克林霉素耐药的发生率。方法采用试管法血浆凝固酶试验检测凝固酶阴性葡萄球菌(CONS)和金黄色葡萄球菌(Sa),头孢西叮纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS),Kirby-Bauer法检测88株葡萄球菌对11种抗菌药物的耐药性,D-test双纸片法检测红霉素诱导克林霉素耐药。结果88株葡萄球菌中,CONS和Sa的构成比是83.0%(73/88)比17.0% (15/88),MRS的检出率是71.6%(63/88)。在CONS中,MRCONS的检出率是71.2%(52/73)。Sa中MRSA的检出率是73.3%(11/15),二者差异无统计学意义。对环丙沙星、红霉素、克林霉素、复方新诺明和庆大霉素的耐药率,Sa明显高于CONS、MRS明显高于MSS,二者差异有统计学意义(P<0.05)。11种抗生素中,青霉素和红霉素对所有菌株的耐药率均>50%,万古霉素、利福平、呋南妥因和氯霉素对所有菌株耐药率均<50%,未检出万古霉素耐药菌株。在22株红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌中,D-test阳性的葡萄球菌共10株,阳性率为45.5%(10/22)。结论88株临床分离的葡萄球菌中主要以凝固酶阴性的葡萄球菌为主,MRS的检出率已超过70%,Sa和MRS的耐药率较CONS和MSS高,除万古霉素和呋南妥因外,本地区临床分离的葡萄球菌对常用抗生素的耐药性均较高。红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌中,红霉素诱导克林霉素耐药的菌株已接近一半(45.5%),对于药敏实验中表现为红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌,必须加作D-test确定克林霉素的敏感性。

安宁包缺氧体系用于构建乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的研究

目的采用安宁包缺氧体系构建SD乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,评估其实验条件,为开展心肌缺血/再灌注损伤的分子机制研究奠定基础。方法采用安宁包缺氧体系分别处理SD乳鼠原代心肌细胞指定时间(3 h、4 h、6 h、12 h),再进行复氧24 h,并采用AnnexinV/PI双染-流式细胞术检测细胞凋亡率与坏死率。结果与正常组相比,安宁包缺氧体系处理6 h、12 h分别诱导心肌细胞坏死率上升29.82%和44.19%,差异具有统计学意义(P<0.01);与正常组相比,安宁包缺氧体系处理4 h后复氧24 h诱导心肌细胞凋亡率上升35.8%,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论采用安宁包缺氧体系处理SD乳鼠原代心肌细胞4 h后复氧24 h为较合适的缺氧/复氧损伤模型实验条件。

RNA干扰Rbl-2基因调控DNA甲基化转移酶介导心脏干细胞凋亡

目的:视网膜母细胞瘤样蛋白2(Rbl-2)在调控DNA甲基化转移酶(DNMT)中发挥重要作用,而DNMT影响干细胞的分化。本文旨在探讨调控Rbl-2基因的表达对心脏干细胞凋亡的影响。方法:分离培养人心脏干细胞,转染Rbl-2 siRNA。采用real time RT-PCR检测Rbl-2和DNMT-3B mRNA表达水平,Westernblotting检测DNMT-3B蛋白表达和caspase-3活化片段,并以Annexin V-FITC/PI双染色-流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:在人心脏干细胞中,转染siRNA后Rbl-2 mRNA表达水平与阴性对照组相比显著降低(P<0.01),同时DNMT-3B mRNA和蛋白表达水平与阴性对照组相比均显著升高(P<0.01),差异显著。与阴性对照组相比,转染Rbl-2 siRNA的人心脏干细胞caspase-3激活,表现为caspase-3活性片段与caspase-3前体的比值显著增高(P<0.01),annexin V阳性细胞凋亡率上升(P<0.05)。结论:Rbl-2基因在心脏干细胞的生存中具有正性调控作用,抑制其表达能促进心脏干细胞的凋亡,其调控机制与表观遗传学的修饰密切相关。

HL-1心肌细胞中桥粒蛋白基因表达下调对Nav1.5功能的影响

目的采用基因沉默技术抑制HL-1细胞的桥粒蛋白(DSP)基因表达以明确DSP与Nav1.5的结构和功能关系。方法用基因沉默技术抑制DSP基因的表达,然后采用Western blotting检测HL-1细胞DSP和Nav1.5蛋白的表达,用双免疫荧光方法检测DSP与Nav1.5蛋白的表达与定位情况,并用全细胞膜片钳技术检测细胞钠通道的电生理特征。结果与空白组和对照组相比,siRNA-DSP组的DSP和Nav1.5蛋白表达量降低。免疫荧光检测发现空白组和对照组DSP与Nav1.5蛋白存在共定位情况,而siRNA-DSP组DSP和Cx43蛋白共定位则遭到破坏,并且膜片钳检测发现siRNA-DSP组峰值电流从(156.3±6.2)pA/pF减少至(41.8±3.1)pA/pF(P<0.05),电压依赖的失活曲线V0.5从-42 mV左移至-61 mV(P<0.05)和从失活恢复时间延长。结论 DSP表达抑制不仅使DSP与Nav1.5的共定位特征遭到破坏,而且还改变了Nav1.5电生理特征。

抑制小鼠HL-1心肌细胞桥粒斑蛋白基因表达对缝隙连接蛋白43结构和功能的影响

目的:采用基因沉默技术抑制小鼠HL-1心肌细胞桥粒斑蛋白(DSP)基因表达以明确DSP与缝隙连接蛋白43(Cx43)的结构和功能关系。方法:用基因沉默技术抑制DSP基因的表达,Western blotting和流式细胞术检测HL-1细胞DSP和Cx43蛋白的表达,用双免疫荧光方法检测DSP与Cx43蛋白的表达与定位情况,并用划痕标记染料示踪技术检测细胞缝隙连接通讯状况。结果:与空白组和对照组相比,siRNA-DSP组的DSP和Cx43蛋白表达量降低(P<0.05)。免疫荧光检测发现空白组和对照组DSP与Cx43蛋白存在共定位情况,而siRNA-DSP组DSP和Cx43蛋白共定位遭到破坏,Cx43蛋白出现再分布,在细胞内检测到Cx43蛋白,并且划痕标记染料示踪技术检测发现siRNA-DSP组Lucifer yellow通过HL-1细胞缝隙连接的传输功能降低。结论:DSP表达抑制不仅使Cx43出现再分布,而且影响缝隙连接传导功能。

三七总皂苷抗细胞凋亡作用与MIF/AMPK的关系研究

目的我们前期的研究表明三七总皂苷(panaxnotoginseng saponin,PNS)能够抗SGOD(serum,glucoseand oxygen deprivation)诱导的H9c2细胞凋亡,本论文我们进一步探讨PNS抗缺血诱导的心肌细胞凋亡的可能作用机制。方法将心肌H9c2细胞株分为正常对照组(control),模型组(model)和PNS组。DCFH-DA和JC-1荧光探针分别检测细胞内活性氧的水平和线粒体膜电位,Annexin V/PI染色检测细胞凋亡率,Western blot检测MIF,AMPK和磷酸化AMPK(p-AMPK)以及cleaved caspase-3蛋白的表达水平。结果与model组比较PNS能够稳定线粒体膜电位,降低胞内ROS水平;PNS抗细胞凋亡的作用能够被MIF拮抗剂ISO-1显著逆转(P=0.000);Western blot结果显示SGOD处理后能够明显的升高胞内活化的caspase-3蛋白(cleaved caspase-3)的表达水平,同时升高MIF和p-AMPK蛋白的表达水平,而PNS能够显著的降低cleaved caspase-3的蛋白水平,并进一步促进MIF和p-AMPK蛋白的表达。结论 PNS能够抗线粒体途径介导的心肌细胞凋亡,其抗凋亡的机制与激活MIF/AMPK有关。本研究将为进一步探讨PNS保护心脏的分子机制及将PNS更好地应用于临床治疗提供有意义的实验依据。

斑点追踪成像技术评价糖尿病大鼠左心功能的研究

目的评价斑点追踪成像技术(speckle tracking imaging,STI)的速度、位移和形变(应变及应变率)在检测2型糖尿病大鼠左心功能的灵敏性和应用价值。方法雄性SD大鼠按照30 mg/kg给予链脲佐菌素尾静脉注射后喂以高脂饲料,期间检测空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)及2 g/kg葡萄糖溶液灌胃2 h后的血糖(plasma glucose 2 h,PG2 h),以确定大鼠2型糖尿病模型建立成功;建模6周后用STI检测左心室6个不同节段收缩期、舒张期径向和周向速度、位移、形变(应变和应变率),并比较其变化情况。结果建模3周后,8只测得FPG>7.0 mmol/L和(或)PG2 h>11.1 mmol/L的大鼠被纳入模型组。建模6周后,STI分析显示模型组左心室收缩期和舒张期部分节段的径向、周向速度和位移较对照组显著降低,差异具统计学意义(P<0.05)。但左心室6个不同节段的收缩期和舒张期径向、周向整体速度,收缩期和舒张期径向、周向整体位移与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);形变分析显示模型组舒张期各节段径向、周向应变及其6节段的整体径向和周向应变,收缩期、舒张期径向整体应变率较对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 STI能够在早期检测到2型糖尿病大鼠左心室心肌部分节段收缩及舒张功能受损,采用形变参数评估心功能比速度和位移更为灵敏。

聚合酶链反应芯片筛选5-氟尿嘧啶对乳鼠心肌细胞心脏毒性差异表达基因的作用

目的应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)芯片技术观察5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对乳鼠心肌细胞心脏毒性相关基因表达的调控作用。方法利用差速贴壁法分离培养乳鼠心肌细胞,分为对照组和5-FU刺激组。提取并纯化细胞RNA,紫外分光光度计检测RNA提取物浓度、变性琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及完整性。选择包含84个已知心脏毒性相关基因的PCR芯片,采用比较阈值(ΔΔCt)法分析两组基因的表达差异。以表达差异(即上调或下调)大于2倍的基因为有意义的差异基因。结果共有48条基因出现差异表达,其中5条基因表达上调,43条基因表达下调。结论利用PCR芯片技术筛选相关基因,为深入阐明5-FU心脏毒性的作用机制提供了新思路。