miR-411-3p靶向PAK2介导Wnt信号通路对口腔鳞状细胞癌侵袭和转移的影响及调控机制

目的:探究miR-411-3p靶向p21活化激酶2(PAK2)基因介导Wnt信号通路对口腔鳞状细胞癌侵袭和转移的影响。方法:收集我院52例口腔癌组织及正常口腔黏膜上皮组织。免疫组化检测组织中PAK2阳性表达,qRT-PCR及Western blot检测miR-411-3p及PAK2表达。筛选PAK2高表达细胞系并将其分为:阴性对照组、miR-411-3p agomir组、miR-411-3p antagomir组、PAK2基因沉默组、联合组(miR-411-3p agomir联合PAK2沉默联合处理细胞)。qRT-PCR和Western blot检测各组细胞miR-411-3p、Wnt1、GSK3β、β-catenin、E-cadherin、N-cadherin表达,CCK8检测细胞活力,划痕实验、Transwell检测细胞迁移和侵袭。Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡情况。结果:与正常口腔黏膜上皮组织相比,癌组织中miR-411-3p表达下降,PAK2表达升高。与阴性对照组相比,miR-411-3p过表达或沉默PAK2能够抑制Wnt信号通路相关因子(Wnt1,β-catenin)及N-cadherin表达,促进GSK3β及E-cadherin表达,且联合组效果最为明显(P<0.05),抑制口腔鳞癌细胞活力,减少癌细胞迁移和侵袭,促进其凋亡,且联合组效果更明显(P<0.05)。结论:miR-411-3p可靶向抑制PAK2基因的表达介导Wnt信号通路进而抑制口腔鳞状细胞癌迁移、侵袭,促进癌细胞凋亡,有望成为口腔鳞状细胞癌治疗的重要靶点。

涎腺腺样囊性癌中miR-22-3p 的表达及与VEGF-C和MLVD的关系

目的检测涎腺腺样囊性癌中微小RNA-22-3p(miR-22-3p)的表达,探讨其临床意义及与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和微淋巴管密度(MLVD)的关系。方法选取我院2011年1月~2014年7月收治的61例涎腺腺样囊性癌患者为研究对象,留取肿瘤组织(观察组)和距肿物边缘>2 cm的正常涎腺组织(对照组)。应用实时荧光定量PCR法检测两组中miR-22-3p的表达,免疫组化方法检测观察组中VEGF-C和D2-40的表达,Western Blot法检测观察组中VEGF-C的表达。结果观察组中miR-22-3p的表达明显低于对照组,且观察组中miR-22-3p的表达在不同肿瘤直径、血管淋巴管累犯、有无远处转移、淋巴结转移和不同TNM分期中差异均有统计学意义(均P<0.05),而在不同性别、年龄、神经累犯中差异均无统计学意义(均P>0.05)。生存分析显示,miR-22-3p低表达患者的生存时间短。miR-22-3p与VEGF-C、MLVD呈负相关。结论miR-22-3p在涎腺腺样囊性癌中低表达,可能与病变的进展及淋巴管生成有关。miR-22-3p可能是涎腺腺样囊性癌独立的预后因子。

口腔鳞癌miR-762的表达及其与癌细胞增殖和转移的关系

目的:检测口腔鳞癌微小RNA-762(miR-762)的表达,探讨其与癌细胞增殖和转移的相关性。方法:收集确诊为口腔鳞癌的患者共62例。肿瘤组织作为观察组,距肿物边缘大于2 cm的正常口腔黏膜组织作为对照组。应用实时荧光定量PCR法检测两组中miR-762的表达,并采用免疫组化法和Western blotting法检测观察组中Ki67、MMP-2和MMP-9的表达。结果:观察组miR-762的表达水平明显高于对照组。观察组miR-762的表达在有无脉管累犯、有无淋巴结转移和不同TNM分期间差异均有统计学意义,而在不同性别、年龄和分化程度间差异均无统计学意义。miR-762的表达与生存时间密切相关。相关分析显示,miR-762的表达与肿瘤的最大径、Ki67增殖指数、MMP-2和MMP-9的表达均呈正相关。结论:口腔鳞癌miR-762的表达升高,与病变的形成和进展有关。miR-762对癌细胞增殖有明显的促进作用,对癌细胞转移的调节可能是通过介导MMP-2和MM-9实现的。检测miR-762的表达可预测口腔鳞癌的预后。