2017—2020年我国中南地区猪流感病毒感染情况的血清学调查研究

为了调查猪流感病毒(swine Influenza virus, SIV)在我国中南地区猪场的流行情况,试验采用血凝抑制(HI)试验对2017年7月份—2020年9月份采集的5 514份猪血清样品进行抗体阳性率的测定,并通过GraphPad Prism 8软件对抗体阳性结果进行了不同季节、猪群、地区的统计分析。结果表明:血清抗体总阳性率为56.31%,其中欧亚类禽H1N1亚型猪流感病毒(EA1 H1N1 SIV)的抗体阳性率最高,为31.19%,H3N2、EA2 H1N1、pdm09 H1N1、CS H1N1、H9N2和H4N8 SIV的抗体阳性率分别为19.15%、11.72%、13.78%、7.22%、1.31%和0.16%,未检测到H5N1、H6N6、H7N9亚型抗体,在猪群中不同亚型和不同分支的SIV混合感染情况较为普遍。EA1 H1N1 SIV在春冬季节较为流行,pdm09 H1N1 SIV在春夏季节较为流行,EA2 H1N1和H3N2 SIV无明显的季节性变化。公猪的EA1 H1N1 SIV抗体阳性率显著高于仔猪及保育猪和母猪(P<0.05),母猪的pdm09 H1N1 SIV抗体阳性率显著高于仔猪及保育猪和公猪(P<0.05),仔猪及保育猪的H3N2 SIV抗体阳性率极显著高于母猪(P<0.01)。福建省的EA1 H1N1 SIV抗体阳性率最高,河南省的pdm09 H1N1 SIV抗体阳性率最高。说明SIV普遍存在于中南地区各猪场中。

H1与H3亚型猪流感病毒IgG抗体双重荧光微球免疫学检测方法的建立

有效防治猪流感需要借助于准确而快速的检测方法,为了建立一种高效、快速的多重检测方法,本研究应用H1和H3亚型猪流感病毒(SIV)的血凝素(HA)蛋白抗原偶联不同编码的荧光微球,应用间接法检测模式,建立了H1、H3亚型猪流感病毒IgG抗体荧光微球免疫学检测方法,并将该方法与血凝抑制试验(HI)、病毒中和试验(VN)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行比较分析。结果表明,该方法的抗体检测灵敏度比ELISA方法高100～1 000倍;与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病病毒及日本乙型脑炎病毒的阳性血清均无交叉反应,且两种亚型血清之间也不存在交叉反应。重复性试验表明,批内和批间精密度测试结果分别为10.2%和12.8%。与HI、VN和ELISA方法比较,总符合率分别为97.82%、98.27%和97.83%。综上,本研究建立的检测方法具有双重检测特性,特异性好、灵敏性高、重复性强,可用于H1、H3亚型SIV的鉴别诊断。