水飞蓟宾改善INH/RFP致肝损伤模型中原卟啉Ⅸ的作用及其机制

目的初步探讨水飞蓟宾能否通过激动Nrf2/ARE信号通路,激活下游血红素合成中间体血卟啉Ⅸ(PPIX)代谢酶亚铁鳌合酶(FECH)的表达,从而改善异烟肼和(或)利福平(INH/RFP)引起的肝损伤。方法选用SPF级ICR小鼠随机分成5组:对照组(CON组)、模型组(IR组)、水飞蓟宾干预组(SY50组、SY100组、SY200组),干预组及IR组根据体质量给予75 mg/kgINH+150 mg/kgRFP,干预组分别同时给予水飞蓟宾低剂量组50 mg(IR+SY50),中剂量100 mg(IR+SY100)以及高剂量200 mg(IR+SY200),对照组给予空白溶剂,连续给药14 d。第15天给予异氟烷吸入麻醉后摘眼球取血,离心后用于生化指标测定,取肝组织于冻存管-80℃保存,Western blot测定目标蛋白FECH、Nrf2的表达。结果与对照组相比,IR组均能够引起生化指标ALT、AST、TBil、DBil、ALP、TBA的显著变化,与模型组组相比,低剂量的水飞蓟宾干预组ALT、Tbil、TBA降低明显,差异有统计学意义(P<0.05),中剂量的水飞蓟宾能显著降低ALT、AST、Tbil、TBA,高剂量的水飞蓟宾能显著降低除ALP以外的所有指标,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组FECH蛋白表达下调,而水飞蓟宾能显著上调这些蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.01),干预组无明显剂量依赖性。与CON组相比,模型IR组总蛋白Nrf2表达上调,而核蛋白表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.01),与IR组相比,水飞蓟宾干预组中Nrf2总蛋白下调,而Nrf2核蛋白表达均上调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论水飞蓟宾能够激活Nrf2入核,调控下游血卟啉Ⅸ代谢酶FECH的表达,治疗INH/RFP引起的肝损伤。