乳腺癌扩增序列2基因RNA干扰慢病毒载体的构建及对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

目的构建乳腺癌扩增序列2(BCAS2)基因RNA干扰(RNAi)的细胞模型,研究BCAS2对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响。方法将人乳腺癌MDA-MB-231细胞分为5组:空白组、对照组、3个干扰组。空白组细胞不做任何处理,对照组细胞转染对照慢病毒载体,干扰组细胞转染慢病毒载体pGLV3-GFP-shBCAS2(shBCAS2-1,2,3)。用实时荧光定量-PCR法和蛋白质印迹法分别检测转染后MDA-MB-231细胞中BCAS2基因及其蛋白表达水平,MTT法检测shBCAS2对MDA-MB-231细胞增殖能力(光密度值)的影响。结果空白组、对照组和3个干扰组的BCAS2基因表达量分别为1.00±0.07,0.99±0.08,0.21±0.06,0.48±0.13和0.37±0.12;这5组的蛋白相对表达量分别为1.32±0.04,1.33±0.04,0.23±0.06,0.54±0.09和0.77±0.07;干扰组与对照组相比,BCAS2基因与蛋白表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。第3天,干扰shBCAS2-1组和对照组的细胞增殖能力分别为0.70±0.04和0.84±0.02,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 shRNA干扰BCAS2可抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖。