人垂体生殖激素(FSH和LH)纯品的研制

本研究用乙醇法从人脑垂体丙酮干粉中提取粗品。用CM-52纤维素离子交换层析法分离促卵泡激素(FSH)和促黄体激素(LH),再用SP-Sephadex-C_(50)离子交换葡聚糖凝胶层析法纯化FSH,用DEAE-52纤维察离子交换层析法纯化LH,用HPLC蛋白A亲和层析法纯化抗LH和抗FSH免疫球蛋白,最后用HPLC抗LH的IgG和抗FSH的IgG精制LH和FSH。精制的FSH放免活性为5406Iu/mg(国际标准品4292),交叉反应(W/W)与LH为1.2％(国际标准品<3.1％)与TSH为0.46％(国际标准品>0.7％)。精制的LH放免活性为7928Iu/mg(国际标准品6640),交叉反应(W/W)与FSH<0.5％(国际标准品<2％)与TSH<0.1％(国际标准品<1％)。本研究制备的人脑垂体FSH和LH纯品达到了国际上同类产品水平,填补了国内空白。

人体胎盘神经生长因子的纯化和鉴定

采用人胎盘为原料，利用离心、超滤和SephadexG-100、DEAE－SephadexA－50、SephadexG－150层析等技术，在中性条件下，分离出7S神经生长因子（7SNGF）；再在酸性条件下，利用柱状等电聚焦电泳法分离出活性亚单位-β-NGF，利用鸡胚背根神经节培养法直接测定神经生长因子的生物活性，其比活性为8000u／mg；用十二烷基磺酸钠不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）测得β-NGF分子量为13KD；高效液相PEK－125柱层析法得单一洗脱峰证明为单一成分。

应用活化mPEG5000修饰HCG及其活性研究

活化甲基聚乙二醇5000（mPEG5000）与高比活人绒毛膜促性腺素（HCG）纯品交联，利用放射受体测定法检测了修饰剂mPEG5000用量与HCG活性保留率的关系，并发现经mPEG5000修饰后HCG的活性稳定性增强，表现为对pH变化和胃蛋白酶破坏的耐受力增大，使之更适于临床使用。

对碘酚对鲁米诺化学发光增强的试验研究

本文报道了由过氧化物酶催化鲁米诺与过氧化氢发光反应的增强发光研究．合成了增强剂对碘酚，并用对碘酚对鲁米诺与过氧化氢发光反应的光增强作用进行了试验，已经证实增强发光反应可将过氧化物酶的最低检测浓度降低到１０－１２～１０－１３ｍｏｌ／Ｌ水平．

人参皂甙对垂体—性腺系统分子内分泌功能调节作用

本实验观察了人参总甙腹腔注射后对垂体—性腺系统分子内分泌功能调节作用。人参总甙对雌雄青年、中老年两组大鼠垂体r—β—LH—mRNA含量有明显提高作用,加快β—LH基因表达中的转录过程。同时测定大鼠血浆LH、雌二醇和睾酮含量,发现这些激素的含量变化与垂体r—β—LH—mRNA含量变化不一致。人参皂甙对青年组雌雄大鼠血浆诸激素含量影响很小,但使中老年雌雄组大鼠血浆中LH含量明显下降,雌鼠血浆中雌二醇含量明显增高。说明,人参总甙的调节作用是多层次的。

生物样本中单胺类递质及其前体氨基酸和主要代谢产物的快速分析法——高效液相色谱-电化学检测法

近年兴起的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)测定生物样本中单胺类递质,除了具有灵敏、快速、简便等优点外。同时还可以一次性分析单胺类递质及其前体氨基酸和主要代谢产物。我们结合本室条件,用HPLC-ECD法,同时测定生物样本中单胺类递质:去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)。

人胎盘催乳素

人胎盘催乳素（ｈＰＬ）是由人胎盘合体细胞滋养层分泌的一种蛋白质。由１９１个氨基酸组成，分子量为２２ｋＤ，基因位于第１７号染色体上。主要具有催乳和促生长作用。临床上通过测定孕妇血中ｈＰＬ进行产前监护，测定血中ｈＰＬ的含量还有助于滋养层细胞疾病的鉴别诊断和疗效观察。作者通过实验分离了ｈＰＬ的两种亚型，经检测两者免疫学活性有差别，这一结论为今后更准确地利用该激素提供了依据。

蛋清中核黄素结合蛋白的提纯和鉴定

应用层析方法从蛋清中提纯得到核黄素结合蛋白（RBP）。用紫外分光光度法、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS—PAGE）及荧光分光光度法测定其核黄素结合力为275μg／mg，分子量为3420～3450Da。可用于制备抗—RBP抗体。

对羟基联苯的增强化学发光作用

目的：观察对羟基联苯对鲁米诺与过氧化物酶发光反应的增强效应。方法：将对羟基联苯及过氧化物酶溶液分别等量递增进行发光检测。结果：证实对羟基联苯的增强作用稳定可靠。

人绒毛膜促性腺素放射受体法的建立及其片段受体结合能力的研究

在获得高比活人绒毛膜促性腺素纯品的基础上，建立了检测人绒毛膜促性腺素的放射受体测定法。利用CNBr和TPCK—胰蛋白酶分别切割人绒毛膜促性腺素，用高压液相层析分离各种片段并检测其受体结合能力，发现特殊的绒毛膜促性腺素片段仍保留部分与受体结合的能力。这为研制封闭受体避孕药奠定了基础。

反相离子对色谱——电化学检测法分析血中儿茶酚胺

本方法采用反相离子对色谱法及电化学检测器检测血中儿茶酚胺,方法简单,灵敏度高,进样(标准品)量为20pg时,样品峰高为噪声信号的5倍以上,并且所需分析时间短,8分钟之内可完成全部分离。

用层析和改良的酸酚法提取和纯化质粒

本文用过Sepharose 4B除去质粒粗提物中RNA,然后用改良的酸酚法除去开环型质粒。用0.8％琼脂糖凝胶电泳、紫外荧光薄层扫描和pst Ⅰ限制性内切酶消化质粒法鉴定。此方法可制备出足够的高纯度质粒。

一种简易的制备感受态大肠杆菌细胞的新技术

本文报道了一种制备和贮存感受态大肠杆菌细胞的新技术。该方法具有简单、省时、稳定、重复性好及转化率高等优点。所制备的感受态细胞,可用于转化和转染;对于空质粒和重组质粒,具有同样的转化效果。

DHCC放射受体检测试剂盒的实验研究

建立了一种改良的血清1,25双羟胆钙化醇(1.25-Dihydroxycholecalciferol,DHCC)超微量放射全体检测(RRA)试剂盒。完成了灵敏度、精密度、准确性、稳定性及特异性等技术指标。该试剂盒的创新点为:①应用正常元代茶沟倭病鸡,成功地制备了高活性受休蛋白;②通过3种措施简化与稳定了测试程序,提高了测试灵敏度(最小可测值由7pg/ml降低至1.7pg/ml),减少了血清用量(由2ml减至1ml),缩短了测试时间(由12小时缩短到4小时);③高比活~3H—DHCC制备,使基本试剂达到国产化。

人胎盘催乳素的纯化与鉴定

以正常产妇的新鲜胎盘为原料，经过盐析、等电点沉淀、离心等粗提，再经ＤＥＡＥ─纤维素阴离子交换层析，Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－１００凝胶过滤，并首次利用圆盘制备电泳纯化。最后获得人胎盘催乳素纯品，其活性采用１２５Ｉ－ｈＰＬ放免检测药盒测定。

人尿中表皮生长因子的提取、纯化

本实验以孕妇尿经苯甲酸沉淀为原料,经过丙酮干粉制备、Sephadex G-50凝胶层析、CM-cellulose-52阳离子交换层析、阴离子交换HPLC和反相HPLC等步骤,制得了高纯度的人表皮生长因子(hEGF)纯品。为了检测hEGF的生物活力,根据其促进成纤维细胞生长这一特点,对提纯中每个步骤的提取物都进行了体外培养2BS细胞生长曲线和死亡率曲线的测定、最后提纯出了两种高活性、高纯度的hEGF同系物。

一张适用于总结物质代谢途径的代谢联络图

介绍了一张适用于总结物质代谢途径之间相互联系的代谢联络图。通过此图可让学生对营养物质代谢、能量代谢及其彼此之间的联系有一个整体的认识,还可显现出各条代谢途径间的枢纽性物质,以总结归纳这些物质的来源和去路,并在分子水平上阐明与代谢有关的某些疾病的原因。

^(21)Ala定点突变胰高血糖素及结构与功能变化

胰高血糖素是由 2 9个氨基酸组成的多肽激素 ,具有促糖元分解的生理功能 ,其拮抗剂有治疗糖尿病病人的潜在应用价值 .在获得重组胰高血糖素基因工程菌基础上 ,利用定点突变技术改造其第 2 1位氨基酸天冬氨酸为丙氨酸 ,并经DNA测序证明胰高血糖素基因发生了点突变 .用IPTG诱导表达后 ,经亲和层析和反相高效液相层析 ,纯化到突变型重组2 1Ala 胰高血糖素 .质谱测定分子量与理论值相符 .利用园二色谱比较重组胰高血糖素和突变的2 1Ala 胰高血糖素在TFE中的二级结构 ,发现胰高血糖素以α螺旋为主要二级结构 ,2 1Ala 胰高血糖素仍有α螺旋结构特征 ,并且含量有所增大 .利用兔升血糖试验 ,发现2 1Ala 胰高血糖素生物活性比重组胰高血糖素减少 51 % (P <0 .0 1 ) .显示天然胰高血糖素第 2 1位氨基酸天冬氨酸与形成α螺旋结构关系不大 ,但在发挥胰高血糖素的生物功能中有重要作用 ,与其可作为钙离子结合位点 ,参与胰高血糖素和受体结合的潜在功能密切相关 .

荧光偏振法测定红细胞膜粘度在药学方面的应用

本文介绍荧光偏振法应用于“血瘀”的动物模型,观察用人参后血液红细胞膜粘度的变化,借以研究人参对于“血瘀”用药的药效作用.

化学修饰法解除羊生长激素(OGH)抗原性的研究

生长激素具有刺激骨及软骨的生长,影响蛋白质、糖类、脂类的代谢,调节各种形式的RNA的生物合成等一些重要的生理功能。因而各种来源的生长激素的研究一直是一个非常活跃的领域。自从1972年Bewley等人查明了羊生长激素(OGH)的一级结构以来,人们为探讨其结构与功能的关系,用小分子修饰羊生长激素,取得了一定的结果。然而羊生长激素用于临床却受到异体蛋白抗原性的限制。为了解决这一问题。