传统发酵乳品中产广谱细菌素乳酸菌选育

为选育产广谱细菌素乳酸菌,采用琼脂扩散法对甘肃牧区传统发酵乳品中分离纯化的96株乳酸菌进行了筛选,并确定产细菌素菌株,具有最佳抑菌效果的菌株经重离子束12C6+辐照诱变,再采用培养皿分区法进行6种指示菌广谱抑菌性能比较。结果表明,琼脂扩散法筛选出抑菌效果最佳的产细菌素菌株Lp1,经辐照诱变得到98株突变菌,选育出对大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、沙门氏菌(Salmonella)、志贺氏菌(Shigella)和克罗诺杆菌(Cronobacter)抑菌性能均明显优于出发菌株Lp1的5株突变株L088、L087、L063、L049、L010进行广谱抑菌试验,其中菌株L088和L063为广谱抑菌性能较好菌株,突变株L088对上述6种指示菌的抑菌扇环半径比出发菌株Lp1抑菌扇环半径分别提高47.81%、33.28%、22.97%、45.25%、21.39%、40.21%,突变株L063对上述6种指示菌的抑菌扇环半径比出发菌株Lp1抑菌扇环半径分别提高54.27%、29.18%、25.37%、58.03%、17.85%、42.13%。采用培养皿分区法可同时在1个培养皿中完成检测6种指示菌的抑菌试验,可高效筛选产广谱细菌素乳酸菌。

重离子束辐照选育高产细菌素植物乳杆菌

采用重离子束12C 6+对产细菌素植物乳杆菌Lp1进行辐照选育,分析比较了不同辐照剂量下致死率和突变率,并通过双层琼脂扩散法筛选高产细菌素突变菌株。在辐照剂量300 Gy时,出发菌株植物乳杆菌Lp1的致死率和正突变率分别为86.3%和28.28%。在300 Gy辐照菌悬液中,分离筛选出高产细菌素突变菌株Lp092、Lp085,以大肠埃希氏菌为指示菌抑菌圈直径比出发菌株Lp1分别扩大了20.64%、19.36%,以金黄色葡萄球菌为指示菌抑菌圈直径比出发菌株Lp1分别扩大了17.16%、14.14%,经过连续传代5次实验,2株菌株Lp092、Lp085均具有良好的产细菌素遗传稳定性。

高通量测序分析比较不同保存温度下牦牛酸奶细菌多样性

为了比较甘南牧区不同保存温度下牦牛酸奶细菌群落结构和多样性,采用Illumina NovaSeq高通量测序技术,对4种不同保存温度下甘南牧区牦牛酸奶细菌的16S rRNA V3-V4区基因序列进行测序,并对测序结果进行操作分类单元(OTU)聚类、α多样性和β多样性等分析。结果表明,4种不同保存温度下甘南牧区牦牛酸奶细菌多样性无显著差异(P>0.05),各分类水平细菌群落组成基本相同,仅组成比例存在一定差异。优势细菌门为厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes),其平均相对丰度分别>75.87%、7.20%和3.52%,优势细菌属为乳杆菌属(Lactobacillus)和链球菌属(Streptococcus),其平均相对丰度分别>61.82%和11.88%。

尾菜处理利用技术研究进展与研究思路探讨

有效利用尾菜资源,有利于解决尾菜引起的环境污染问题,促进蔬菜产业可持续发展。尾菜处理利用技术是实现尾菜资源化利用的关键,本文从尾菜饲料化、肥料化、基质化、原料化和能源化5个方面对国内外尾菜处理利用技术研究进展进行了介绍,并根据尾菜的种类、分级及来源,对尾菜处理利用技术的研究开发和选用进行了探讨。

功能性双歧杆菌培养基的筛选与优化

对常用4种双歧杆菌培养基进行筛选,确定出产双歧杆菌高的基础培养基,采用正交试验通过改变碳源、添加低聚果糖及pH的内源调节优化筛选出基础培养基。最佳培养基为在筛选出的基础培养基中加0.5%低聚果糖和1%碳酸钙。最佳培养基较筛选出的基础培养基双歧杆菌活菌数提高约8.1倍,培养时间缩短4h。双歧杆菌利用最佳培养基在37℃下厌氧培养20h,菌数可达8.9×109CFU/ml。

双歧杆菌培养基优化及pH调控培养研究

对常用4种双歧杆菌培养基进行比选,确定出产双歧杆菌高的基础培养基,采用正交试验通过改变碳源、添加低聚果糖及pH值的内源调节优化基础培养基,优化培养基为在比选出的基础培养基中加0.5%低聚果糖和1%碳酸钙。利用优化培养基培养双歧杆菌,当培养液pH值低于5.5时,用6mol/LNaOH调节pH值为6.0～6.5,在厌氧条件下37.5℃培养24h,活菌数达到1.7×1010cfu/mL。

耐酸耐氧双歧杆菌突变株的选育与冷冻浓缩发酵剂的制备

应用紫外线、^60Co辐照育种，选育出1株耐酸、耐氧的长双歧杆菌突变株GKSW1101。该菌株在pH4．5的液体培养基中，37．5℃培养24h，活菌数达到4．2×10^8cfu／mL。采用加碱中和保持培养液pH6．0～6．5进行发酵，在4℃、6000r／min离心15min收集菌体，添加脱脂奶粉、甘油、蔗糖，L-半胱氨酸盐酸盐为冷冻保护剂，-25％冷冻保藏，制备成双歧杆菌冷冻浓缩发酵剂，活菌数达到2．4×10^10cfu／g，-25％贮存3个月后，活菌存活率为50％。

纤维素酶高产菌的筛选和鉴定

从兰州榆中县兴隆山国家自然保护区采集土样,先用羧甲基纤维素钠刚果红培养基筛选出79株Hc值较大的产纤维素酶菌株,再经液体发酵复筛测CMC酶活和滤纸酶活。结果表明,经复筛后菌株No-15A的纤维素酶活力最高,羧甲基纤维素酶活1376.20U/mL,滤纸酶活497.78U/mL,其粗酶液分解滤纸快速明显,且该菌株生长速度最快,每日菌落直径增长量为4～5cm。经形态学初步鉴定菌株No-15A属青霉。

尾菜液体青贮菌剂制备及应用

对植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）SD2、发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）SD4在5L立瓶中分别进行培养，制备尾菜液体青贮菌剂。结果表明，在MRS液体培养基中37℃条件下，调控pH值，菌株SD2和SD4最适收获期分别为24h、20h，菌株SD2与SD4配比为2：1时青贮效果最佳，尾菜液体青贮菌剂总活菌数〉1×109CFU／mL。按0．5％接种量，进行废弃白菜叶、青笋叶青贮发酵应用试验，生产的尾菜青贮饲料品质良好，颜色淡黄色或黄绿色，酸香味浓郁，质地较松散，pH值〈4．0。研制的尾菜青贮菌剂适用于尾菜青贮。

啤特果渣酿造果醋工艺研究

以啤特果渣为主要原料,对啤特果醋的酿造工艺进行了优化。首先通过单因素试验探讨了活性干酵母添加量、酒精发酵时间、醋酸菌添加量、醋酸发酵时间、醋酸发酵温度对啤特果醋发酵的影响,然后通过正交试验确定最佳工艺条件。结果表明:啤特果渣酿造果醋酒精发酵条件为活性干酵母添加量0.2%、发酵时间4 d;醋酸发酵条件为醋酸菌添加量0.05%、发酵时间5 d、发酵温度32℃,得到总酸(以醋酸计)达6.85 g/100 g的啤特果醋混合物。经浸泡、过滤、装瓶、陈酿1~2个月后,得到啤特果醋成品,总酸含量为3.78 g/dL,产品既有醋香,又有啤特果香,酸甜适口。

固定化黑曲霉发酵玉米糖液生产柠檬酸的研究

利用PVA复合凝胶包埋黑曲霉的孢子及菌丝体。固定后的细胞经过一系列预培养 ,用于发酵玉米生产柠檬酸。试验确定的固定化细胞摇瓶发酵生产柠檬酸最适条件为 :玉米糖液浓度 1 0Bx,培养温度 35℃ ,摇瓶转速 2 5 0r/min。经此条件发酵 64h ,柠檬酸产率最高达到 96g/L ,通常稳定在 90g/L左右。同时对柠檬酸连续批次发酵生产进行了初步研究 ,固定化黑曲霉可连续使用 8批次以上 ,其柠檬酸产量稳定在 86～ 92g/L之间 ,这为柠檬酸连续发酵提供了有利的保证 。

液相色谱-质谱法测定辣椒中的苏丹红Ⅰ

建立了液相色谱-质谱法测定辣椒中的苏丹红Ⅰ,用乙腈提取样品中的目标物,采用ACQUITYUPLCTMBEHC18柱,以乙腈∶水=90∶10为流动相,进行液相色谱-质谱检测。其线性范围为0.01μg/mL～10μg/mL;线性回归系数为0.9997;检出限为0.1μg/mL;回收率为87.9%～95.4%。

甘肃牧区传统发酵乳制品中优良乳酸菌的分离筛选

从甘肃牧区传统发酵乳制品中分离筛选适合发酵乳生产的乳酸菌,对分离纯化的乳酸菌进行了发酵性能检测,筛选出产酸快、发酵活力高、凝乳时间短、后酸化能力弱、遗传性状稳定的菌株。筛选的6株菌株单菌发酵牛乳,均在6.5 h内凝乳,发酵乳酸度>70°T,乳酸菌活菌数>1×10~8 CFU/mL,发酵乳组织状态、滋味、气味等感官指标良好,可作为生产发酵乳的优良乳酸菌菌种进行开发利用。

尾菜青贮乳酸菌的分离鉴定及其培养条件研究

从泡菜中分离鉴定适合尾菜（废弃白菜叶、青笋叶）青贮的乳酸菌，获得产酸能力强、青贮效果好的2株菌株SD2和SD4，并对其培养条件进行研究。结果表明，菌株SD2、SD4最适培养温度分别为35℃、37℃：最适培养时间分别为20h、16h；最适初始pH值均为6．5；最适接种量均为6％。菌株SD2和SD4分别在30℃条件下进行尾菜发酵7d后，pH值均〈4．0，乳酸菌活菌数〉1×10^8 CFU／g。对菌株SD2和SD4进行形态学、生化检测及16SrRNA序列分析，鉴定菌株SD2为植物乳杆菌（Lactobacillus plantamm），菌株SD4为发酵乳杆菌（Lactobacillus fermenturn）。

长双歧杆菌活菌制剂下游制备方法优化

对长双歧杆菌活菌制剂制备中的菌体收集、保护剂和冷冻干燥工艺进行研究,优化了菌体收集及冷冻干燥工艺条件,比选出有效的长双歧杆菌保护剂。采用低温离心收集菌体、添加保护剂及真空冷冻干燥获得了适合的长双歧杆菌活菌制剂下游制备方法。

尾菜青贮乳酸菌的分离筛选及其青贮菌剂制备

从市售泡菜中分离筛选适合尾菜青贮的乳酸菌,筛选获得产酸能力强、青贮效果好的2株菌株,通过细菌形态学、API 50CH试剂条检测,鉴定SD2为植物乳杆菌,SD4为发酵乳杆菌。对两株菌株在5 L立瓶中分别进行培养,确定了各自的培养最适收获期和两株菌株配比,制备的尾菜青贮菌剂总活菌数大于1.0×109cfu/mL。

不同浸麦方式对麦芽酶活的影响

对大麦不同的浸麦方式即浸二断六、浸四断四、浸四断八和重浸法进行了研究,并将其对大麦麦芽质量的影响进行了比较。结果证明,采用浸四断八的浸麦工艺制作的成品麦芽具有较高的淀粉酶活力和蛋白酶活力。

高通量测序分析不同采集保存温度下甘南牧区牦牛酸奶真菌多样性

采用Illumina NovaSeq高通量测序技术,对4种不同采集保存温度条件下采集自甘南牧区牦牛酸奶扩增真菌ITS2区序列进行测序,进行OTU聚类、Alpha多样性和Beta多样性等分析,比较不同采集保存温度下样品的真菌群落结构和多样性。结果表明,甘肃甘南牧区牦牛酸奶真菌主要为子囊菌门(Ascomycota),其丰度占总数的82.09%~99.25%;真菌菌属中酵母菌属(Saccharomyces)丰度占总数23.98%~63.49%,克鲁维酵母菌属(Kluyveromyces)丰度占总数16.08%~31.89%,毕赤酵母属(Pichia)丰度占总数3.39%~35.21%,为样品中的优势菌属。4种不同采集保存温度条件下采集甘南牧区牦牛酸奶样品真菌多样性分析比较后无显著差异,各分类水平下,不同组别菌群组成基本相同,各菌群在不同组别中只是占比不同。各分类水平真菌群落组成基本相同,仅组成比例不同。

蜂蜜中氯霉素的UPLC/MS-MS检测方法研究

建立了液质联用测定蜂蜜中氯霉素残留的方法。用乙酸乙酯提取试样中的氯霉素,经HLB小柱净化,流动相为乙腈+水体系,采用梯度洗脱,用PDA检测器分离测定。氯霉素的检测限为0.1μg/kg,回收率为89.9%-98.1%。

双歧杆菌直投式发酵剂贮藏存活性研究

通过存活性试验、加速贮藏试验、长期贮藏试验、牛乳发酵试验对双歧杆菌直投式发酵剂的贮藏条件和有效期进行了确定研究。综合加速贮藏试验、长期贮藏试验、牛乳发酵试验结果,双歧杆菌冷冻浓缩直投式发酵剂在-30～-20℃贮藏,有效期为6个月;双歧杆菌冷冻干燥直投式发酵剂在-20℃贮藏,有效期为24个月。