佛手挥发油对B16黑色素瘤细胞体外增殖的抑制作用

利用水蒸气蒸馏法提取佛手挥发油,MTT法测定细胞活力;倒置显微镜,Hoechst 33342/PI荧光染色及扫描电镜观察细胞凋亡与坏死的形态变化;彗星电泳法检测细胞DNA损伤程度。结果表明:佛手挥发油能够显著抑制B16黑色素瘤细胞增殖(P<0.05),呈剂量依赖效应;佛手挥发油处理B16黑色素瘤细胞6 h后,倒置显微镜下观察到低、中剂量组(62.5、125、250μg/mL)细胞体积缩小,形态变得不规则,细胞碎片增多,部分细胞成团生长,而高剂量组(500μg/mL)细胞膜崩解,胞浆外溢,细胞碎片增多;荧光显微镜下可见低、中剂量组细胞核固缩,核染色质凝集,边缘化等典型细胞凋亡特征,而高剂量组细胞核为PI染成红色,核染色质分布均匀,呈细胞坏死特征;扫描电镜观察到试验组细胞形态不规则,细胞表面不平整,微绒毛减少等细胞形态变化;彗星电泳试验结果显示:低、中剂量组细胞彗星头逐渐减小,彗尾较长且近似呈圆形,而高剂量组细胞彗星头较大,尾部相对较短。

野艾蒿挥发油诱导HeLa细胞凋亡与坏死

目的:研究野艾蒿挥发油对HeLa细胞凋亡与坏死的影响。方法:MTT法检测细胞活力,显微镜观察细胞形态与结构的变化,DNA Ladder、流式细胞仪检测细胞凋亡,彗星电泳检测DNA损伤,Western blot检测Caspase-3和多聚ADP核糖聚合酶(PARP)表达。结果:MTT法检测结果显示野艾蒿挥发油对HeLa细胞的增殖有明显的抑制作用,呈剂量依赖性。野艾蒿挥发油处理HeLa细胞24 h后,100、200μg/mL实验组细胞体积缩小,核固缩,染色质凝集、片段化,表现为典型的凋亡特征;400μg/mL实验组细胞膜破裂、内含物外泄,表明细胞已坏死。此外,DNA Ladder结果显示,各实验组均有梯状条带;流式细胞仪检测结果也显示,各实验组均有凋亡峰。野艾蒿挥发油处理HeLa细胞6 h后,100μg/mL实验组彗星电泳中出现彗尾。Western-blotting结果显示,野艾蒿挥发油能够诱导HeLa细胞中Caspase-3蛋白表达量降低,同时PARP发生剪切、失活。结论:野艾蒿挥发油具有抑制HeLa细胞增殖的作用。低浓度野艾蒿挥发油诱导细胞凋亡,高浓度野艾蒿挥发油引起细胞坏死,其凋亡机制是依赖Caspase-3介导的PARP凋亡信号转导途径。

佛手叶挥发油的成分分析及生物活性研究

分析了佛手叶挥发油的成分,检测了其生物活性.采用水蒸气蒸馏法提取佛手叶挥发油,气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)检测了佛手叶挥发油的成分,比浊法检测了其抑菌活性,噻唑蓝法检测了其细胞活力.佛手叶挥发油含有40种成分,以d-柠檬烯、γ-松油烯、对伞花烃、α-蒎烯、β-蒎烯为主要成分,其中d-柠檬烯和γ-松油烯的含量分别占50.53%和24.05%.佛手叶挥发油对草绿色链球菌、肺炎克雷伯菌、摩氏摩根菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌和溶血性链球菌等均有抑制作用,其半抑制浓度(IC50)分别为1.1,2.1,6.8,7.2,13.7和19.3 mg/mL;佛手叶挥发油对Hep3B,HUVEC,Huh7,SP2/0,A549和PANC-28等癌细胞具有抑制作用.

佛手挥发油对B16细胞增殖及其酪氨酸酶活性的影响

为检测佛手挥发油对B16黑色素瘤细胞增殖及其酪氨酸酶活性的影响,采用台盼蓝排斥法测定了细胞存活率、瑞-姬氏混染法观察了细胞形态变化、吖啶橙/溴化乙锭染色法检测了细胞的凋亡与坏死,用酶学方法测定了细胞中酪氨酸酶活性.结果表明:佛手挥发油对B16黑色素瘤细胞增殖具有显著的抑制作用,呈剂量依赖性;62.50,125.00和250.00μg.mL-1佛手挥发油处理细胞6 h后,细胞核染色质凝聚于核膜内侧,呈固缩状或圆珠状,表现为典型的细胞凋亡特征;500.00μg.mL-1佛手挥发油处理细胞后,细胞膜破裂,出现细胞碎片,说明细胞已经坏死.酪氨酸酶活性检测结果显示:佛手挥发油对B16黑色素瘤细胞酪氨酸酶活性具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性.

野艾蒿挥发油对HeLa癌细胞形态与结构的影响

采用MTT法检测细胞活力,用倒置显微镜、荧光显微镜和扫描电子显微镜观察细胞形态与结构的变化,用激光共聚焦显微镜观察细胞微管的分布,从而研究了野艾蒿挥发油对HeLa人宫颈癌细胞形态与结构的影响。结果表明:(1)野艾蒿挥发油对HeLa癌细胞的增殖有明显的抑制作用,呈剂量和时间依赖性。(2)野艾蒿挥发油处理HeLa癌细胞24h后,100、200μg/mL实验组细胞体积缩小,核染色质凝集、微绒毛消失、细胞表面有泡状突起,微管解聚,呈现典型的凋亡特征;400μg/mL实验组细胞膜破裂、胞浆内含物外泄,呈明显的坏死特征。(3)野艾蒿挥发油具有抑制HeLa癌细胞增殖的作用,低、中浓度的野艾蒿挥发油诱导细胞凋亡,而高浓度的野艾蒿挥发油引起细胞坏死。

大豆磷脂对D-半乳糖致衰大鼠学习记忆及抗氧化能力的影响

为探讨大豆磷脂对D-半乳糖致衰大鼠学习记忆及抗氧化能力的影响,将50只SD雄性大鼠按体重随机分为正常对照组、模型对照组、大豆磷脂低剂量组、大豆磷脂中剂量组及大豆磷脂高剂量组,每组10只。每天定时灌胃大豆磷脂或等量蒸馏水1次,模型对照组、大豆磷脂组皮下注射D-半乳糖50 mg/(kg.d),正常对照组注射等量生理盐水。第30天测学习记忆,第45天处死大鼠,取组织测定抗氧化生理指标。致衰大鼠学习记忆能力显著下降(P<0.05),各组织中丙二醛(MDA)含量显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性明显减弱(P<0.05);大豆磷脂组的大鼠学习记忆能力明显提高(P<0.05),各组织中MDA含量显著减少,SOD、CAT活性显著增强(P<0.05)。大豆磷脂具有增强记忆的功能,在延缓细胞衰老方面有积极影响,可以缓解或部分缓解由D-半乳糖对大鼠的致衰作用。

佛手叶挥发油对HeLa细胞形态与结构的影响

探讨了佛手叶挥发油对HeLa细胞形态与结构的影响.采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,倒置显微镜、荧光显微镜和电子显微镜观察细胞形态与结构的变化,免疫荧光结合激光共聚焦显微镜观察微管的分布.结果表明:佛手叶挥发油能够抑制HeLa癌细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;不同浓度的佛手叶挥发油处理HeLa癌细胞24 h后,低剂量(200μg/mL)佛手叶挥发油使HeLa细胞皱缩,染色质凝集,出现凋亡小体,微管解聚,表现为典型的凋亡特征;中、高剂量(400和800μg/mL)佛手叶挥发油使HeLa细胞膜裂解,内容物外泄,细胞碎片增多,表明细胞已坏死.

佛手水煎剂对RAW264.7癌细胞增殖的影响

为了观察佛手水煎剂对RAW 264.7癌细胞增殖的影响,用生药量0.625,1.250,2.500和5.000mg/mL的佛手水煎剂处理RAW 264.7癌细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞活力、台盼蓝排斥法测定细胞存活率、吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光染色法检测细胞凋亡与坏死.结果表明:与对照组比较,0.625,1.250和2.500 mg/mL佛手水煎剂处理后,RAW 264.7癌细胞固缩,细胞核染色质凝聚、片断化,有凋亡小体出现,表现出典型的细胞凋亡特征;5.000 mg/mL佛手水煎剂处理后,RAW 264.7癌细胞肿胀,细胞膜破裂,呈现坏死症状,RAW 264.7癌细胞的增殖明显受到抑制(P<0.01),半数抑制浓度(IC50)为2.073mg/mL.说明佛手水煎剂能诱导癌细胞凋亡,抑制癌细胞增殖.

佛手叶挥发油诱导HeLa细胞凋亡与坏死

研究了佛手叶挥发油对He La细胞凋亡与坏死的影响.用单细胞凝胶电泳、DNA梯度电泳检测DNA损伤,流式细胞术检测细胞周期和DNA含量的变化,Western Blot检测凋亡相关蛋白PARP的表达.结果显示:200μg/m L佛手叶挥发油处理He La细胞,彗星头缩小,荧光强度减弱且染色不均匀,出现彗尾,G2/M期细胞数量增加,PARP蛋白几乎全部被切割;400μg/m L佛手叶挥发油处理He La细胞,DNA梯度条带明显,表明大多数细胞处于晚期凋亡阶段;800μg/m L佛手叶挥发油处理He La细胞,无大分子条带,DNA完全断裂.表明200μg/m L和400μg/m L佛手叶挥发油可诱导He La细胞凋亡,800μg/m L佛手叶挥发油诱导He La细胞坏死.

佛手挥发油对MDA-MB-435人乳腺癌细胞体外增殖的影响

目的探讨佛手挥发油对MDA-MB-435人乳腺癌细胞增殖的影响。方法采用MTT法测定细胞活力;倒置显微镜、荧光显微镜和扫描电镜观察细胞的凋亡与坏死的形态学变化;彗星电泳检测细胞DNA的损伤程度;流式细胞术分析细胞周期的变化。结果佛手挥发油对MDA-MB-435癌细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性。不同浓度的佛手挥发油处理MDA-MB-435细胞6h后,低、中浓度实验组(31.25,62.5和125μg.mL-1)细胞体积缩小、核固缩,染色质凝集或片段化,呈现典型的凋亡特征;而高浓度实验组(250μg.mL-1)细胞膜裂解,但核形态完整,呈明显的坏死特征。此外,彗星电泳结果显示,低、中浓度实验组彗星头小而彗尾窄长,表明细胞发生了凋亡;高浓度实验组彗星头大而彗尾长且宽,表明细胞已坏死。进一步的流式细胞结果显示,佛手挥发油能将MDA-MB-435癌细胞周期阻滞在S期和G2/M期。结论佛手挥发油具有抑制MDA-MB-435癌细胞增殖的作用,低、中浓度的佛手挥发油诱导细胞凋亡且将细胞周期阻滞在S期和G2/M期,而高浓度的佛手挥发油引起细胞坏死。

饮食限制对小鼠学习记忆及抗氧化能力影响

目的探讨不同饮食限制(dietary restriction,DR)水平对小鼠学习记忆、抗氧化能力影响。方法120只ICR小鼠随机分为自由饮食(对照)组,20%,40%,60%DR组,连续25 d,进行力竭游泳及耐缺氧实验;39 d后,进行Y迷宫、水迷宫、脏器系数、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量的测定。结果Y迷宫结果表明,40%DR组记忆成绩(14.40±2.68)次,与自由饮食组比较差异有统计学意义(P<0.05);水迷宫结果表明,40%DR组潜伏期(20.36±9.12)s,访问次数(1.5±0.5)次,游动距离(0.49±0.32)m。;60%DR组脑系数为(1.51±0.19)%,明显高于自由饮食组(1.12±0.09)%(P<0.01);各饮食限制组小鼠脾脏、甲状腺系数及肾脏丙二醛(MDA)含量均有所下降;小鼠耐力及耐缺氧能力与限制水平成正比,雌鼠耐缺氧能力强于雄鼠。结论适当饮食限制可以提高机体对新环境适应能力,提高体内抗氧化系统活性。