人IL-18结合蛋白AcDNA的克隆及在COS-7细胞中的表达

目的 克隆人IL-18结合蛋白A（hIL-18 BPa）的 cDNA,观察其在COS-7中的表达。方法 采用RT-PCR自人白血病细胞株jurkat中获得hIL-18BPa的cDNA,将其克隆至T-vector中,经测序确证后,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3.1（+）中。脂质体介导法将其转染COS-7细胞,72h后收集上清纯化,用BCA法测定hIL-18 BPa的含量,用ELISA法测定其活性。结果获得的IL-18BPa的cDNA序列与gene bank登录的cDNA序列一致。上清液中hIL-18 BPa含量为1.4mg/L,并具有良好的生物学活性。结论 成功克隆hIL-18 BPa基因,并实现了在COS-7细胞中的瞬时表达,为研究其活性奠定了基础。