壬基酚与辛基酚单独及联合暴露对大鼠肠道损伤的影响

两种典型环境内分泌干扰物——壬基酚(Nonylphenol,NP)与辛基酚(Octylphenol,OP),常常同时存在于自然环境中,经口摄入为它们进入人体内的主要途径。因此,NP与OP可能会对消化系统产生影响。目的:研究NP与OP单独及联合暴露对大鼠肠道损伤的影响。方法:将不同浓度的NP与OP单独或联合灌胃大鼠28天后,观察各组大鼠肠道氧化应激、通透性、炎症及肠道细胞凋亡情况。结果发现:NP与OP单独或联合暴露均会导致结肠组织结构破坏,紧密连接Claudin-1和Occludin蛋白表达水平下降,抗氧化酶活性发生改变,细胞因子IL-1β、TNF-α与IFN-γ表达水平上升,凋亡相关蛋白Caspase-3、Casspase-12、Bax和Bcl-2表达水平增加。结论:NP与OP单独或联合暴露均可通过改变肠道通透性、诱导大鼠肠道促炎细胞因子产生、降低抗氧化酶表达并诱导肠道细胞凋亡而对大鼠肠道造成不同程度的损伤。本研究对于全面评估环境内分泌干扰物联合暴露的健康风险,探索有效的预防干预措施,以及修订完善相关的卫生标准限值,具有重要意义。

乙酰化大粒车前子多糖的制备及其活性研究

为进一步探讨植物多糖结构与活性之间的关系，采用乙酸酐为乙酰化试剂，以大粒车前子多糖（PLP）为原料，制得乙酰化修饰大粒车前子多糖（Ac—PLP）。考察乙酸酐剂量、反应温度、反应时间对此乙酰化修饰反应的影响，并通过正交试验确定最适反应条件为乙酸酐体积分数10％、反应温度30℃、反应时间2．5h。进一步在体外树突状细胞模型中研究发现，当取代度在0．06～0．1范围内时，乙酰化修饰大粒车前子多糖促进树突状细胞分泌细胞因子IL-12p70的能力较强，且在取代度0．08左右时达到最大。本研究结果提示对大粒车前子多糖进行乙酰化修饰可作为其改性方向，为大粒车前子多糖功能性产品开发提供了相应的理论依据。

青钱柳多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞表面分子表达的影响

为探讨青钱柳多糖(CPC)对小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs)细胞形态及表面分子的影响,首先采用细胞因子诱导法,以贴壁法获得贴壁单核细胞,添加重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组白细胞介素-4(rmIL-4)进行体外诱导,倒置显微镜及透射电镜观察细胞形态的变化;流式细胞术检测培养第6 dDCs的表面标志CD80,CD86和MHC II类分子的表达的变化。经CPC刺激24 h后,采用流式细胞术检测DCs表面MHC II类分子表达的变化。结果发现:经rmGM-CSF和rmIL-4诱导获得的DCs随着培养时间的延长,细胞形态发生改变,逐渐变成具有树状突起的DCs。经LPS刺激后的DCs能够发生典型的DCs的成熟,而培养第6天的DCs具有典型的DCs表型特征,可用于后续进一步实验。与阴性对照相比,CPC显著促进树突状细胞表面MHC II的表达,在浓度(10～200μg/mL)范围内呈现剂量依赖性。初步表明CPC可以促进树突状细胞的成熟。

茶叶糖蛋白对树突状细胞表面分子表达的影响

为探讨茶叶糖蛋白对小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDCs）表面分子表达的影响，采用细胞因子诱导法，以贴壁法获得贴壁单核细胞，添加重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rmGM—CSF）和重组白细胞介素4（rmIL-4）进行体外诱导培养，倒置显微镜动态观察细胞形态的变化；采用MTT法，观察不同浓度的茶叶糖蛋白（TGP）对小鼠骨髓来源树突状细胞的细胞毒性；采用流式细胞术检测DCs的表面标志CD11c、CD86和MHCⅡ类分子表达的变化。结果表明，经TGP作用24h后，树突状细胞形态更加典型，更加成熟；茶叶糖蛋白在（0．8—200μg／mL）的浓度范围内，可认为TGP对树突状细胞无细胞毒性。与阴性对照相比，茶叶糖蛋白显著促进树突状细胞表面CD11c、CD86、MHCⅡ的表达，在浓度（0．1～25μg／mL）范围内呈现剂量依赖性，初步表明茶叶糖蛋白可以促进树突状细胞的成熟。

电感耦合等离子体质谱法测定香薷中无机元素含量的研究

采用电感耦合等离子体质谱（ICP—MS）法对香薷中的Ca、Mg、Cu、Zn、Fe、Mn、Co、Ni、Se等18种无机元素进行了分析测定。该方法的回收率在84．62％～113．16％，具有良好的准确度和精密度，完全可以满足香薷样品中无机元素测定要求。研究结果表明：香薷中Ca和Mg两种必须的常量元素的含量特别高，微量元素Cu、Zn、Fe、Mn、Co、Ni、Se含量丰富。此结果可为探讨香薷中元素含量与其药效相关性提供科学依据。

青钱柳多糖对人宫颈癌HeLa细胞和人脐带内皮细胞生长的影响

目的:研究青钱柳多糖(polysaccharides isolated from Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskjk,PCP)对人宫颈癌HeLa细胞和人脐带内皮细胞(HUVEC)生长的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)法,观察不同浓度、不同提取方法获得的PCP对HeLa细胞和HUVEC细胞生长的影响。结果:PCP I、II在50、100、200、400μg/ml浓度条件下,均可极显著性抑制HeLa细胞生长(p<0.01)。PCP I、II对HUVEC细胞生长有一定影响,但增殖抑制率不高;在PCP抑癌作用最高的浓度处(200μg/ml),PCP对HUVEC细胞的生长没有影响。结论:PCP极显著性抑制HeLa细胞的生长;在P C P抑癌作用最高的浓度处,P C P对H U V E C细胞的生长没有影响。

车前子多糖对骨髓来源树突状细胞表型和吞噬功能的影响

目的:探讨车前子多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs)表型和功能的影响。方法:从小鼠骨髓中分离单核细胞,加入细胞因子rmGM-CSF、rmIL-4诱导分化成未成熟树突状细胞,收集细胞加入促成熟刺激剂LPS(阳性对照组)或车前子多糖。倒置显微镜观察树突状细胞的形态,流式细胞术检测成熟树突状细胞的表面标志CD11c和MHCII的表达及吞噬FITC-dextran的变化。结果:经4种不同的车前子多糖作用40h后,显著促进CD11c+MHCII+双阳性细胞的比率,在浓度(0～50μg/ml)范围内呈现剂量依赖性,当浓度高于50μg/ml时,双阳性细胞表达率呈现降低趋势。经多糖作用后吞噬FITC-dextran的能力降低,其中PS3的作用效果最明显,表达PE-CD11c×FITC-dextran的细胞比率只有11.53%。结论:车前子多糖促进CD11c+MHCII+双阳性细胞的比率,降低对FITC-dextran的吞噬能力,初步表明车前子多糖可以促进树突状细胞的成熟。

毛蕊花苷和异毛蕊花苷对树突状细胞增殖的影响

目的观察大粒车前子提取物苯乙醇苷类化合物毛蕊花苷(verbascoside)和异毛蕊花苷(isoverbascoside)对小鼠骨髓来源树突状细胞增殖的影响。方法采用噻唑盐(MTT)法,以细胞因子(rmGM-CSF+rmIL-4)作为阳性对照,观察不同浓度的毛蕊花苷和异毛蕊花苷对小鼠骨髓来源树突状细胞增殖的影响。结果毛蕊花苷和异毛蕊花苷均可促进小鼠树突状细胞的增殖,与阳性对照组比较,毛蕊花苷在1.60×10-7～1.60×10-4mol·L-1内,异毛蕊花苷在所有浓度范围内作用效果均非常显著(P<0.05)。毛蕊花苷和异毛蕊花苷在1.60×10-6和1.60×10-5mol·L-1的浓度与细胞因子联用时,可显著刺激小鼠树突状细胞的增殖(P<0.05)。结论毛蕊花苷和异毛蕊花苷不仅可以直接促进小鼠骨髓来源树突状细胞的增殖,而且与细胞因子有明显的协同作用。

大粒车前子多糖对脂多糖刺激RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用

采用脂多糖构建RAW264.7巨噬细胞炎症模型,研究大粒车前子多糖的抗炎作用。培养巨噬细胞RAW264.7,利用脂多糖构建细胞炎症模型,中性红吞噬实验检测细胞吞噬活性;酶联免疫吸附法检测车前子精制多糖(Plantago asiatica L.crude polysaccharide,PLCP)处理前后细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和IL-6的分泌量,Griess反应测定RAW264.7细胞释放NO水平。结果表明,PLCP可显著抑制RAW264.7炎症细胞的吞噬活性,降低炎症细胞因子TNF-α、IL-10和IL-6的分泌量及NO的释放量。

青钱柳多糖对人胃癌MGC_803细胞生长的影响

本文研究青钱柳多糖(polysaccharides isolated from Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskjk,PCP)对人胃癌MGC_803细胞生长的影响。采用噻唑蓝(MTT)法检测PCP对MGC_803细胞生长的影响;Annexin法检测PCP对MGC803细胞诱导凋亡的作用。实验结果表明PCP在50、100、200、400μg/mL浓度条件下,均可极显著性抑制人胃癌MGC_803细胞生长(P<0.01),抑制率可达65.07%,细胞凋亡率可达25.44%。说明青钱柳多糖具有抑制人胃癌MGC803细胞生长的生物活性。

苏氨酸锌对糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用

目的:观察苏氨酸锌对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肝脏的抗氧化性、肝功能等相关指标的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用尾静脉注射链脲佐菌素法复制糖尿病大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为糖尿病对照组,二甲基双胍阳性对照组,苏氨酸锌低、中、高剂量组,另设同龄大鼠为正常对照组。检测并比较各组肝脏匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、肝脏指数以及血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清总蛋白(TP)等指标。结果:高剂量的苏氨酸锌对糖尿病大鼠的MDA、NO、SOD、GSH-Px、肝脏指数等指标有显著性改善作用(P<0.05),并对ALT、AST、AST/ALT、TP有一定的改善作用。结论:苏氨酸锌对糖尿病大鼠肝脏氧化损伤、肝功能有一定的保护作用。

泽泻的研究现状与展望

综述了泽泻的化学成分、药理作用、提取方法、药材与质量评价及应用现状,对泽泻的进一步研究及开发利用进行了展望。

微波预处理提取泽泻中三萜总组分的研究

将微波预处理技术应用在泽泻三萜总组分的提取中,采用单因素试验法,考察了物料颗粒大小、预处理剂浓度及用量、预处理时间、后续提取时间和后续提取溶剂浓度对提取率的影响,并运用正交试验对预处理工艺参数进行了优化。确定提取工艺参数为:泽泻取中颗粒(40目),预处理剂为1.9倍物料量(ml/g)的50%乙醇,辐射时间180s,85%乙醇常规回流提取2次,每次30min,提取率可达到1.784%。

大粒车前子多糖对树突状细胞分泌不同类型细胞因子的影响

初步探讨大粒车前子精制多糖(PL-PS)对树突状细胞分泌不同类型细胞因子的影响。通过体外细胞因子联合诱导培养小鼠骨髓细胞获得树突状细胞(DCs)。经免疫磁珠分选法纯化获取CD11c+树突状细胞,经不同浓度PL-PS刺激24 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液中细胞因子IL-12p70、IL-10及IL-1β含量。结果表明:在质量浓度25～100μg/mL范围内,PL-PS均以剂量依赖的方式上调DCs分泌IL-12p70和IL-1β水平、下调IL-10的分泌水平。可因此得出推论:PL-PS能够通过调控DCs分泌Th1、Th2型细胞因子及趋化因子水平,诱导Th1型细胞免疫应答。

超临界二氧化碳萃取泽泻中三萜类总组分

目的探讨超临界CO2萃取泽泻中三萜类总组分的优化条件。方法采用单因素实验法,考察夹带剂用量、萃取温度、萃取时间和萃取压力4个因素对萃取率的影响。结果超临界CO2萃取的优化萃取条件是:夹带剂用量每克泽泻为1.5 m l,温度45℃,时间30 m in和压力25 MPa。结论该方法简便,选择性高,可为产品开发提供参考。

泰和乌骨鸡活性肽对小鼠骨髓有核细胞的增殖作用

采用MTT法测定活性肽对正常小鼠骨髓有核细胞的增殖作用,利用高效液相色谱-2,4-二硝基氟苯柱前衍生法测定4个活性肽组分的氨基酸组成。结果表明:小鼠骨髓细胞培养时间为24 h,泰和乌骨鸡活性肽质量浓度为0.1、1、10、100μg/mL,组分7、8、9、10可极显著(P<0.01)促进小鼠骨髓有核细胞增殖,增殖率达130%以上。在低质量浓度(0.1μg/mL)条件下,组分7能显著促进小鼠骨髓有核细胞增殖(P<0.01)且重现性较好,组分8可刺激小鼠骨髓有核细胞增殖298%。氨基酸组成分析表明,组分7、8、9、10均含有丰富的酪氨酸、甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸和丙氨酸,可以推测该5种氨基酸组成了刺激小鼠骨髓有核细胞增殖活性成分的物质基础。

茶叶糖蛋白对RAW264.7细胞分泌作用的影响

本文研究利用小鼠巨噬细胞建立体外实验模型,对茶叶糖蛋白(TGP)的免疫活性进行研究。采用倒置显微镜观察细胞形态变化。Griess法和ELISA法检测不同剂量茶叶糖蛋白对RAW264.7细胞一氧化氮(NO)和细胞因子TNF-α、IL-1β分泌量的影响。结果表明:50μg/mL茶叶糖蛋白可显著促进细胞分泌一氧化氮和细胞因子TNF-α、IL-1β(p<0.01),说明茶叶糖蛋白可通过促进细胞分泌一氧化氮和细胞因子,起到活化RAW264.7细胞和调节机体免疫的功效。

我国高校食品科学与工程学科发展及其研究生培养模式构建

食品科学是食品工业的科学基础和技术支撑,近年来我国食品科学与工程专业学科建设和研究生培养蓬勃发展,取得了长足进步。以教育部第四轮学科(食品科学与工程)评估结果为背景,重点对评估结果为“A^-”以上高校的专业建设进行分析,发现上述高校近年来在食品科学与工程学科整体水平上有显著提升,其中人才的国际化水平、国际科技合作与交流较为突出。以此为基础,提出构建基于国际合作的研究生培养模式,以期促进并加快培养具有创新能力和国际竞争力的高层次复合型人才。

壬基酚异构体对小鼠Sertoli TM4细胞内黏着连接、雄激素结合蛋白和抑制素B的影响

研究了壬基酚异构体[4-(1-乙基-1-甲基-己基)酚](4-NP65)对小鼠睾丸Sertoli TM4细胞黏着连接相关分子表达和分泌雄激素结合蛋白(ABP),抑制素B(Inhibin B)的作用。不同浓度4-NP65(0、0.1、1、10、20、40μmol·L-1)作用于TM4细胞24h,MTT法测定细胞存活率,RT-PCR测定TM4细胞波形蛋白(Vimentin),N-钙黏着蛋白(N-cadherin),黏着斑蛋白(Vinculin)mRNA的表达情况;Elisa法测定细胞上清液中ABP和Inhibin B的含量。结果4-NP65在低剂量(0.1、1、10、20μmol·L-1)对细胞存活率无显著影响,在高剂量(40、80、100μmol·L-1)能显著降低TM4细胞存活率(P<0.01);4-NP65剂量依赖性增加Vimentin mRNA表达,降低Vinculin、N-cadherin mRNA的表达;4-NP65呈剂量依赖性降低ABP的分泌量,与对照组比较,在20、40μmol·L-1处理组有显著差异(P<0.05),而Inhibin B的含量在20、40μmol·L-1 4-NP65处理组有显著降低(P<0.05)。4-NP65对小鼠Sertoli TM4细胞具有生殖毒性作用,黏着连接是其作用的可能靶点之一,4-NP65可能通过影响TM4细胞黏着连接相关分子的表达和TM4细胞分泌ABP、Inhibin B引起雄性生殖系统损伤。