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应用PCR检测乙肝患者血清、唾液、尿液中HBV DNA及其意义 被引量:5
1
作者 倪崖 黄云坚 施丽君 《中国卫生检验杂志》 CAS 1997年第3期149-151,共3页
关键词 乙型肝炎 乙型肝炎病毒 DNA 血清 唾液 尿 PCR
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应用PCR技术检测结核分枝杆菌的临床分析
2
作者 单勤 汪富三 黄云坚 《生物技术》 CAS CSCD 1995年第4期23-26,共4页
采用聚合酶链反应(PolymeraseChianReation,即PCR)技术检测结核分枝杆菌Mycobacteriumtuberculosis,一年多来共检测了100例结核(肺、肾结核)患者的痰和尿液标本,结呆PC... 采用聚合酶链反应(PolymeraseChianReation,即PCR)技术检测结核分枝杆菌Mycobacteriumtuberculosis,一年多来共检测了100例结核(肺、肾结核)患者的痰和尿液标本,结呆PCR检出阳性率为81%,对照用集菌涂片抗酸染色法,阳性率为58%,用常规培养法阳性率为20%。而对50例非结核患者的疫和尿液标本的检测,PCR法仍有6%的阳性率,而用涂片或常规培养法均未检出阳性。据此,本文作者认为采用PCR技术检测结核分枝杆菌确定具有快速、敏感、特异性高的优点,但其检测报告作为临床确诊指标还存在一定的局限性,而作为辅助诊断却有很大的参考价值。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌 聚合酶链反应 临床分析
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HIV-1 GP120主要抗原性片段的制备及其在HIV诊断中的应用 被引量:6
3
作者 郝彦玲 张梦华 +6 位作者 黄云坚 袁国亮 陈佩 朱旭辉 傅晶晶 刘勇 邵一鸣 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期64-67,共4页
目的研制HIV中国流行株RL42GP120主要抗原性片段,以便进一步开发HIV抗体检测试剂。方法克隆RL42毒株GP120蛋白C-端250个氨基酸的编码序列,克隆入大肠杆菌表达载体pBV220进行表达。通过包涵体处理和离子交换层析纯化目的蛋白。将纯化后... 目的研制HIV中国流行株RL42GP120主要抗原性片段,以便进一步开发HIV抗体检测试剂。方法克隆RL42毒株GP120蛋白C-端250个氨基酸的编码序列,克隆入大肠杆菌表达载体pBV220进行表达。通过包涵体处理和离子交换层析纯化目的蛋白。将纯化后的蛋白用狭缝电转技术转印硝酸纤维素膜,利用HIV参考品血清检测其灵敏度和特异性。结果目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的10%左右。纯化后其纯度高于95%,HIV参考品血清检测显示出良好的灵敏度和特异性,检测8份阳性临床标本无一漏检,而7份阴性临床标本无交叉反应。结论已研制出具有良好灵敏度和特异性的HIV-1GP120主要抗原性片段。为开发HIV抗体检测试剂创造了条件。 展开更多
关键词 HIV-1 GP120 主要抗原性片段 诊断
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HIV流行毒株的DNA macroarray基因分型技术的研究 被引量:4
4
作者 倪崖 谭卓 +4 位作者 房国 金妙 李坤 蒋娴 黄云坚 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第1期12-14,共3页
目的:建立一种特异、相对简便的H IV流行毒株基因分型新技术。方法:从H IV-1抗体阳性标本中提取H IV前病毒DNA,使用H IV-1型共用引物进行PCR扩增。同时设计一条型特异性的探针,然后通过制作DNA m acroarray芯片,鉴别样本的H IV亚型。结... 目的:建立一种特异、相对简便的H IV流行毒株基因分型新技术。方法:从H IV-1抗体阳性标本中提取H IV前病毒DNA,使用H IV-1型共用引物进行PCR扩增。同时设计一条型特异性的探针,然后通过制作DNA m acroarray芯片,鉴别样本的H IV亚型。结果:DNA m acroarray分析可以检测我国H IV主要流行株基因型的特异性序列:B、C、CRF01-AE和CRF07-BC。结论:DNA m acroarray方法对H IV亚型进行分析是可行的,可以在H IV流行病学调查中应用。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 DNA MACROARRAY 基因分型
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HIV-1VN Jurkat细胞株HIV-1病毒分泌动力学及培养优化的研究 被引量:1
5
作者 倪崖 谭卓 +4 位作者 黄云坚 房国 李坤 沈小琴 周富英 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第4期385-386,470,共3页
目的:研究HIV-1VN Jurkat细胞株HIV-1病毒分泌动力学及新生小牛血清对细胞生长及病毒产量质量的影响。方法:通过对HIV-1VN Jurkat细胞分泌病毒的滴度、细胞活力指数、活细胞密度、病毒比分泌速率和细胞比生长速率进行观察来评价其动... 目的:研究HIV-1VN Jurkat细胞株HIV-1病毒分泌动力学及新生小牛血清对细胞生长及病毒产量质量的影响。方法:通过对HIV-1VN Jurkat细胞分泌病毒的滴度、细胞活力指数、活细胞密度、病毒比分泌速率和细胞比生长速率进行观察来评价其动力学;通过对抗原纯度的变化来说明不同浓度的新生小牛血清对分泌的病毒质量的影响。结果:HIV-1VN Jurkat细胞分泌病毒的滴度与细胞活力指数、活细胞密度呈现正相关性;病毒滴度、病毒比分泌速率与细胞比生长速率不相关,随着小牛血清浓度的增加,抗原纯度有下降趋势。结论:细胞生长对数期几乎同步出现病毒分泌对数期,小牛血清浓度为9%~12%的培养基是最佳的培养条件。 展开更多
关键词 HIV-1VN JURKAT细胞株 小牛血清 病毒分泌动力学 抗原纯度
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HIV亚型特性及其意义 被引量:8
6
作者 倪崖 黄云坚 谭卓 《国外医学(流行病学.传染病学分册)》 2004年第5期269-272,共4页
根据基因序列和氨基酸序列的特征,艾滋病病毒(HIV)可分为诸多的亚型。HIV亚型的研究有助于人们更深入了解HIV的起源、流行规律和地理分布,对HIV的临床诊断、药物治疗、疫苗研制及控制对策等方面具有重要的指导作用。
关键词 HIV亚型 艾滋病病毒 临床诊断 疫苗研制 药物治疗 基因序列 流行规律 特性 地理分布 氨基酸序列
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金耳代料菌棒式栽培中的几个技术问题 被引量:3
7
作者 黄云坚 《丽水学院学报》 1993年第5期51-53,共3页
本文介绍了金耳代料菌棒式栽培技术,并将金耳栽培管理过程划分为三个管理阶段。各阶段的管理措施作了详尽地阐述,这不仅是对金耳驯化栽培技术的补充,而且大大提高了生物学效率。金耳出耳率则达到金耳人工驯化栽培以来最高记录。
关键词 金耳
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饲料动物——果蝇及其幼虫的培养
8
作者 黄云坚 张德美 《丽水学院学报》 1991年第S2期64-67,共4页
本文主要介绍了果蝇及其幼虫的饲养方法,并对作为中国林蛙的饲料所具备一些特点作了说明。同时,通过果蝇的饲养和在经济动物养殖中的试验,提出了作为饲料动物必备的几个条件,为寻找和发掘新的饲料动物提供了理论依据。
关键词 饲料动物 果蝇
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洞头岛海滨动物调查报告
9
作者 黄云坚 张春牛 《丽水学院学报》 1991年第S1期46-49,共4页
本文载有洞头岛海滨动物40多种,其中以贝类动物为主,并列有动物的俗称与学名的对照表以及同物异名表。对洞头岛的海滨动物资源情况有了初步了解,对开发和利用海滨生物资源有一定的参考价值,丰富了我校动物教学标本。
关键词 潮间带 海滨动物
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心病心治,“恐慌症”不再令人恐慌
10
作者 黄云坚 《健康生活》 1996年第11期22-23,共2页
恶形恶状 欣欣在熙来攘往的人群中逛街时,突然心跳急促,呼吸困难,头痛眩晕,四肢无力地跌坐在一店家门口,经过数分钟后才渐渐缓和下来。她不知道这是怎么一回事,只知道自己顿时成为街上的新焦点。 结束了一天忙碌的工作,出租车司机大伟... 恶形恶状 欣欣在熙来攘往的人群中逛街时,突然心跳急促,呼吸困难,头痛眩晕,四肢无力地跌坐在一店家门口,经过数分钟后才渐渐缓和下来。她不知道这是怎么一回事,只知道自己顿时成为街上的新焦点。 结束了一天忙碌的工作,出租车司机大伟正驾车在返家选中,突然感到胸口一阵紧缩,几乎要窒息般地透不过气。 展开更多
关键词 恐慌症 解决方法 精神科疾病 心病 二尖瓣脱垂 呼吸困难 四肢无力 心理疾病 突然感到 心搏过速
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聚合酶链反应检测HBV DNA的应用价值研究 被引量:1
11
作者 倪崖 黄云坚 《浙江省医学科学院学报》 1997年第2期4-6,共3页
161例乙型肝炎患者的血清、唾液、尿液标本分别进行了聚合酶链反应扩增检测,对照分析血清学指标,结果显示,乙肝患者血清、唾液和尿液中HBVDNA的PCR阳性率与HBsAg滴度具有正相关性,反向被动血凝(RPHA)HBs... 161例乙型肝炎患者的血清、唾液、尿液标本分别进行了聚合酶链反应扩增检测,对照分析血清学指标,结果显示,乙肝患者血清、唾液和尿液中HBVDNA的PCR阳性率与HBsAg滴度具有正相关性,反向被动血凝(RPHA)HBsAg滴度在1.8,PCR技术就可检到血清中HBVDNA存在,在1:32以上,HBVDNAB也可在唾液和尿液中检出。尤其是HBeAg阳性者,血清。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 HBV DNA 乙型肝炎 血清 唾液
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黑木耳LSOI菌株的驯化与栽培
12
作者 吴锡鹏 黄云坚 《中国食用菌》 1994年第5期13-14,共2页
黑木耳LSOI菌株的驯化与栽培(浙江省丽水地区食用菌开发研究所)(丽水师专化学系323000)吴锡鹏,黄云坚笔者从野生黑木耳中分离、驯化出一株优良的黑木耳新品种,经菇农在生产中应用,表明该菌株是适合我区气候特征的优良... 黑木耳LSOI菌株的驯化与栽培(浙江省丽水地区食用菌开发研究所)(丽水师专化学系323000)吴锡鹏,黄云坚笔者从野生黑木耳中分离、驯化出一株优良的黑木耳新品种,经菇农在生产中应用,表明该菌株是适合我区气候特征的优良菌株。(一)黑木耳LSOI菌株的获... 展开更多
关键词 黑木耳 LSOI 菌株 驯化 栽培
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白细胞介素—2免疫学检测的实验研究
13
作者 倪崖 黄云坚 《浙江省医学科学院学报》 1996年第4期18-20,共3页
本文通过实验研究了建立ELISA双抗体夹心法检测人血清中的白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)。在IL-2的检测中,此方法与传统的生物学检测方法相比,具有快速简便,适合基层推广应用等优点,对血清样品... 本文通过实验研究了建立ELISA双抗体夹心法检测人血清中的白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)。在IL-2的检测中,此方法与传统的生物学检测方法相比,具有快速简便,适合基层推广应用等优点,对血清样品IL-2的实验测定,结果表明,正常人组比肝炎患者组具有统计学显著差异(P〈0.01),提示通过检测IL-2含量,可了解患者的细胞免疫功能。指导临床。 展开更多
关键词 白细胞介素-2 ELISA
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HIV抗体免疫印迹法检测中不确定结果的分析研究、 被引量:10
14
作者 谭卓 夏晓华 +5 位作者 倪崖 李忠辉 周富英 孟哲峰 李坤 黄云坚 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2011年第6期367-370,共4页
目的收集HIV抗体免疫印迹法检测中出现的不确定结果,统计分析各种带型的临床意义,为检验人员提供判定结果的方法和建议。方法采集187份不确定实验结果和随访复检结果,以随访最终结果为金标准,统计分析各种带型出现的频度和阳性预测... 目的收集HIV抗体免疫印迹法检测中出现的不确定结果,统计分析各种带型的临床意义,为检验人员提供判定结果的方法和建议。方法采集187份不确定实验结果和随访复检结果,以随访最终结果为金标准,统计分析各种带型出现的频度和阳性预测值,分析非特异性条带出现的频度和复检结果。结果条带gp160、p24的阳性预测值分别为32.1%和18.84%;两者同时出现时阳性预测值为100.00%,其他特异性条带的出现几乎不能提高阳性预测值,出现非特异性条带的样本最终均可确认为阴性。结论检验人员可以根据带型特征对不确定结果进行判定。 展开更多
关键词 HIV抗体 免疫印迹法 不确定结果
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免疫印迹法检测血液和尿液中HIV-1抗体的实验研究 被引量:2
15
作者 谭卓 黄云坚 +4 位作者 夏晓华 倪崖 沈小琴 房国 李坤 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2008年第5期307-309,共3页
目的用免疫印迹法检测HIV携带者的血液和尿液样本,研究尿检试剂替代血检试剂用于HIV确证的可行性。方法采集河南、浙江研究对象87名的血液和尿液,分别用血检试剂和尿检试剂平行检测,按各自检定标准判定结果,统计各特异性条带出现频... 目的用免疫印迹法检测HIV携带者的血液和尿液样本,研究尿检试剂替代血检试剂用于HIV确证的可行性。方法采集河南、浙江研究对象87名的血液和尿液,分别用血检试剂和尿检试剂平行检测,按各自检定标准判定结果,统计各特异性条带出现频率。结果87名被检者中,血检阳性41人,尿检阳性39人,符合率为97.7%。阳性血液样本中出现频率最高的条带是gp160、p24、gp120,最低的是p55、p31、p17;阳性尿液样本中出现频率最高的条带是gp160、gp120、gp41,最低的是p17、p55、p24。结论HIV携带者尿液中的抗体与血液不同,灵敏度也有一定差异,通过改进尿检试剂的制备工艺,同时制定适宜的判定标准,可以使尿检试剂替代血检试剂应用于HIV-1抗体的检测确证。 展开更多
关键词 HW-1 免疫印迹 尿液 血液
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垂直流免疫印迹法检测尿液HIV-1抗体的技术研究 被引量:2
16
作者 谭卓 黄云坚 +4 位作者 倪崖 房国 胡丰翠 李坤 李忠辉 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2008年第2期86-88,105,共4页
目的利用垂直流技术的快速性与免疫印迹法(WB)检测的精确性,建立垂直流免疫印迹检测技术(VWB),探讨其在检测尿液HIV-1抗体的临床意义。方法通过SDS-PAGE电泳和电转,将HIV-1抗原包被于硝酸纤维素膜(NC膜)上,然后将膜黏合于自... 目的利用垂直流技术的快速性与免疫印迹法(WB)检测的精确性,建立垂直流免疫印迹检测技术(VWB),探讨其在检测尿液HIV-1抗体的临床意义。方法通过SDS-PAGE电泳和电转,将HIV-1抗原包被于硝酸纤维素膜(NC膜)上,然后将膜黏合于自制反应槽的底部,并与真空抽滤系统结合构成垂直流免疫印迹法检测装置。利用该装置对临床样本(12例HIV-1抗体阳性尿液样本,10例HIV-1抗体阴性尿液样本)进行检测,并与传统WB法的检测结果相比较。结果VWB法检测尿液样本阳性符合率为100%,阴性符合率为100%,主要抗原蛋白带符合率高于WB法检测尿液样本。结论VWB法检测尿液样本的结果与WB法检测血清样本的结果基本一致,是HIV-1感染确认检测方法的又一补充技术。 展开更多
关键词 HIV-1 免疫印迹法 切向流
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