柚cDNA中NBS-LRR类R基因同源序列的分离

提取柚花柱的总RNA,通过逆转录合成其cDNA,根据已知植物抗病基因(R基因)的NBS保守区设计简并引物,对cDNA进行扩增,获得大小约为500bp的PCR产物,对连接产物进行酶切归类,筛选得到不同类别的克隆12个,并进行了测序。通过序列同源比较分析发现,其中有10个片段属于NBS-LRR类抗病基因的同源序列(RGA),与已知植物R基因相应区段的氨基酸序列的同源性为11.5%～47.1%。

桑叶提取液对体外氧自由基的清除作用以及对果蝇寿命的影响

本文作者应用化学发光法研究了桑叶提取液对体外氧自由基发生系统：黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子，Ｆｅｎｔｏｎ体系产生的羟自由基和用过硫酸铵－Ｎ，Ｎ＇，Ｎ＇－四甲基乙二胺体系产生的氧自由基的清除作用。同时研究了高浓度桑叶提取液对果蝇寿命的影响。结果表明，桑叶提取液对上述系统产生的氧自由基中的羟自由基具有相当强的清除作用。在剂量比中医大辞典规定的大３倍以上时并不降低雌雄果蝇的平均寿命，且对雌雄呆蝇的最高寿命均有一定程度的提高。

银杏第1染色体DNA文库的构建

观察了50个银杏根尖的染色体,发现在约半数根尖中,最大的1对染色体(第1染色体)随体有差异,其中1条随体较大而明显,另1条则很小.采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离了随体较为明显的那条第1染色体.将分离到的单条染色体去蛋白,Sau3A酶切,并在染色体DNA片段两端加上Sau3A人工接头,进行2轮PCR扩增,得到了大小为300-3000bp的扩增片段.用第2轮PCR产物构建质粒文库,得到了约含有75000个重组子的该染色体DNA文库.随机挑取66个重组子进行分析,发现插入片段大小主要分布在500-2000bp,平均为800bp.该文库为银杏第1染色体特异探针的筛选、遗传图谱的构建、重要基因的克隆以及性染色体的鉴别等研究提供了基础.

荔枝R基因同源序列的克隆与分析

根据已知植物抗病基因 (R基因 )编码的蛋白质 NBS保守区设计特异简并引物 ,对荔枝的基因组DNA进行体外扩增 ,获得了一条大小约 5 0 0 bp的扩增谱带 ;回收该特异扩增带并进行克隆 ,筛选若干阳性克隆进行测序 ,共获得 5个片段的序列 .同源性比较发现 ,该 5个片段均属于 NBS-LRR类抗病基因同源序列(RGA) ,与已知 R基因相应区段的氨基酸序列一致性为 1 3 .5 %～ 45 .9%.这些 RGA既可进一步用于筛选荔枝的抗病候选基因 ,同时也可以作为分子标记 ,用于荔枝遗传图谱的构建 .该研究表明 R基因同源克隆技术可望成为荔枝抗病基因克隆和基因组研究的重要手段 .

果树R基因同源序列克隆的初步研究

用 2对根据已知植物抗病基因 (R基因 )编码的蛋白质的NBS保守区而设计的特异简并引物 ,对荔枝、龙眼、芦柑、柚子及银杏的基因组DNA进行体外扩增。其中一对引物 (P1/P2 )在荔枝、龙眼、芦柑和柚子中获得的扩增产物均表现为一条大小约 50 0bp的明亮谱带 ,而银杏扩增产物的亮带则在约 750bp处 ,且弥散在 40 0～ 10 0 0bp之间。另一对引物在荔枝、龙眼、芦柑和柚子中没有特异扩增带 ,而在银杏中获得了一条 40 0～ 60 0bp的较亮的宽带。将荔枝、龙眼、芦柑和柚子的 50 0bp特异扩增带以及银杏的 40 0～ 60 0bp条带回收克隆 ,并分别筛选几类阳性克隆进行测序。共获得 15个片段的序列。经比较发现 ,来自荔枝、龙眼、芦柑和柚子的 12个片段均属于NBS -LRR类抗病基因同源序列 (RGA) ,与已知R基因相应区段的氨基酸序列的一致性为 15 5%～47 1% ;而 3个来自银杏的片段均不是RGA ,其中 1个与反转录酶有较高的同源性 ,另 2个在GeneBank中没有找到同源序列。该结果显示 ,应用同源扩增技术克隆果树RGA是可行的 ,但银杏作为古老的裸子植物 。

5种不同形式氮源对紫球藻生长影响的研究

在含有相等氮量的不同形式氮源的培养基中培养紫球藻 ( Porphyridium purpareum) ,观察 5种不同形式氮源对紫球藻生长的影响 .结果表明 ,硝酸盐促进紫球藻的生长 ,铵盐则不利于其生长 。

琯溪蜜柚和度尾蜜柚自交和互交亲和性观察

用荧光显微技术对王官溪蜜柚 (Citrusgrandis cv.Guanximiyou)和度尾蜜柚 (Citrusgrandiscv.Duweimiyou)自交和互交亲和性进行了观察 .发现两品种自交和互交花粉在柱头上都萌发正常 .自交花粉管进入柱头组织后 ,大部分在伸长过程出现破裂 ,伴随有内容物渗出 ,在花柱道内缘有胼胝质出现 ,但仍有部分花粉管能正常生长进入子房 ,并从胚柄处进入胚珠 ,在珠心组织里 ,观察到胼胝质的积累 ,其中大多数王官溪蜜柚和少数度尾蜜柚胚珠的胚囊位置出现强烈的荧光亮点 .而互交的胚珠中没有观察到这些现象 .由此可见 ,两品种的自交组合在花粉管进入柱头组织 ,直至进入子房、胚珠的整个伸长过程中 。

籼稻品种H359基因组可转化人工染色体(TAC)文库的构建

构建能够通过农杆菌介导转化植物的人工染色体文库可以加快突变基因的精细定位和克隆的速度。为了克隆水稻突变基因的需要 ,我们利用pYLTAC7载体构建了籼稻品种H35 9基因组的TAC文库。该文库包含 4 10 88个克隆 ,保存在 10 7块 384孔板中。插入片段大小在 5 0 - 10 0kb之间 ,平均插入大小为77kb ,推测该库覆盖水稻基因组接近 7 4倍。

荷叶对体外氧自由基的清除作用及其对果蝇寿命的影响

应用化学发光法研究了药食兼用的中药荷叶提取液对体外氧自由基发生系统：黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴高子及Ｆｅｎｔｏｎ体系产生的羟自由基和用过硫酸铵－Ｎ，Ｎ，Ｎ＇，Ｎ＇，－四甲基乙二胺体系产生的氧自由基的清除作用，同时研究了荷叶提取液对果蝇寿命的影响。结果表明，荷叶提取液对上述系统产生的氧自由基具有很强的清除能力，并能显著延长雌雄果蝇的寿命。

琯溪蜜柚和度尾蜜柚自交和互交胚珠发育状况的比较

用石蜡切片技术对溪蜜柚 (Citrus grandis cv.Guanxim iyou)和度尾蜜柚 (C.grandis cv.Duweimiyou)自交和互交胚珠发育进行了比较观察。溪蜜柚的自交授粉后胚珠发育有 2种不同情形 (I型和 II型 ) , 型在授粉后5 d的珠心组织细胞有变形现象 ,接着胚囊萎缩 ,但外珠被能生长发育到 5 0 d左右 ; 型受精后胚乳发育异常 ,种子不能发育。度尾蜜柚自交胚囊中胚乳没有出现 ,在授粉后 35 d左右珠心组织和囊腔同时萎缩。互交胚珠发育正常 ,成熟果实有籽。表明两品种是自交不亲和的 ,导致了果实无籽。但两者的识别反应和阻抑部位不同 ,溪蜜柚 I型可能出现在受精前 , 型出现在受精后 ,而度尾蜜柚自交花粉管可能没有进入胚囊 ,是一种受精前的障碍。瘪籽的大小与不亲和障碍发生的时期有关。实验为进一步研究两品种的自交不亲和性遗传机理提供了实验证据 ,将有助于解决由于果实无籽导致的汁胞粒化、裂果、裂瓣等品质问题。

金线莲染色体核型分析

报道了珍贵药材金线莲 ( Aneoctochilusroxburghii)的核型并进行分析 .结果表明 :K( 2 n) =4 0=38m+ 2 sm.根据 Stebbins的染色体核型的不对称类型 ,金线莲染色体属于“2 A”

长果种黄麻单染色体未克隆DNA文库的构建

单染色体分离、扩增和克隆技术对植物的遗传研究（尤其对那些遗传研究基础薄弱的植物而言）具有重要的应用价值。本研究用玻璃针显微分离法成功分离出长果种黄麻（Corchorus olitoriusL．）品种闽引一号的单染色体80条。用LAM-PCR或DOP-PCR对单染色体DNA进行两轮扩增，所包含的DNA片段长度分别为250-2000bp和100-600bp。共建立了50个单染色体未克隆文库。Southern杂交表明，获得的扩增片段确实来自黄麻基因组。对单染色体DNA文库应用的有关问题进行了讨论。

水仙(Narcissus tazetta L.)单染色体的显微分离

用果胶酶和纤维素酶酶解的水仙根尖制备染色体标本,从大量中期分裂相中选择分散良好的染色体进行拍照和组型分析,建立核型图.根据核型识别目标染色体,应用显微操作系统成功进行单染色体分离.

植物染色体微分离微克隆技术研究进展与展望

染色体微分离与微克隆技术是细胞遗传学与分子遗传学相结合的一项桥梁技术 ,近年来在植物中的应用日渐活跃 .本文综述了该技术在植物中的研究进展 。

荔枝生物技术研究进展(综述)

从荔枝的组织培养、花药培养和原生质体培养方面综述荔枝生物技术的研究概况，并提出该领域存在问题及发展方向。

花椰菜单染色体的显微分离和LA-PCR扩增

以花椰菜品种‘闽花60天’根尖为材料,采用微细玻璃针法随机分离了40多条花椰菜的单染色体,并用LA-PCR(linker-adaptorPCR)对分离的单染色体进行了体外扩增,研究了单染色体的Sau3A酶切时间对LA-PCR扩增片段大小的影响。结果表明,通过对单染色体的不完全酶切可以显著提高LA-PCR扩增片段的大小;Dot-blotting验证的结果表明,单染色体的扩增产物确实来自其基因组,但Dot-blotting不能有效地鉴别花椰菜的9条染色体。

城市轨道交通工程综合节水技术研究

根据地铁工程的特点,结合多年的设计及运营经验,针对地铁车站冲厕用水和冷却水补水以及车辆段冲车用水占绝大部分用水量的用水条件和特点进行系统分析,重点讨论地铁综合节水技术和措施的关键点,指出离子交换法、膜法、E-PACK等综合节水措施具有广泛的推广应用前景。

长大公路隧道消防设计探讨

根据多年来对长大公路隧道消防设计的实践经验 ,对长大公路隧道 ( 10 0 0m以上 )消防设计常规做法的不足之处进行了多方面的论述 ,并提出了有效的改进对策。