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题名大鼠视网膜微血管周细胞的选择性培养
被引量:2
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作者
刘光辉
孟春
徐朝阳
刘安
黄以鹏
黄陈稳
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机构
福建中医药大学附属人民医院眼科
福州大学生物科学与工程学院生物工程系
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出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期18-22,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(81102619)
福建省自然科学基金项目(2011J01197)
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文摘
背景视网膜微血管周细胞(RMPs)在糖尿病视网膜病变(DR)等视网膜新生血管性疾病中的作用日益受到重视,并被视为潜在的治疗靶点。然而因组织材料来源受限及细胞分离纯化不易,RMPs体外研究工作的开展受到了限制。目的建立简便的大鼠RMPs分离、培养和纯化方法。方法摘取清洁级健康雄性SD大鼠的眼球,置于体积分数75%乙醇中浸泡1min,用眼科显微手术器械分离获取视网膜并将其剪成碎片,依次用2.5g/L胰蛋白酶和2g/LⅠ型胶原酶各消化15min,消化后分别过直径100μm和55μm滤网,收集视网膜消化后的微血管片段,用含有体积分数20%胎牛血清的低糖型DMEM接种于6孔板,至培养14~16d细胞达到80%~90%融合时进行消化传代,培养和传代期间通过换液法及差异消化法去除杂质细胞。用倒置相差显微镜观察细胞的形态和生长状态,用免疫荧光法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α—SMA)、血小板源性生长因子受体-β(PDGFR—β)、von Willebrand因子(vWF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,以鉴定RMPs。结果RMPs在接种后24—48h自微血管片段中迁移出,7d后形成中等大的细胞集落,14~16d后达到80%-90%融合状态。RMPs传代后生长速度加快,至12—14d达到融合。形态学鉴定显示,培养的细胞呈宽大、扁平、不规则形并伴多个突起的典型周细胞形态特征,且传代至第9代形态特征无明显变化。免疫荧光法检测显示,所培养的细胞均不表达内皮细胞特异性标志物vWF,约96%的细胞对周细胞标志物α—SMA或PDGFR—β抗体呈阳性反应,极少量细胞对胶质细胞特异性标志物GFAP抗体呈阳性表达。结论本实验成功建立了一种简单、经济的大鼠RMPs分离、纯化、培养方法,可以获得理想的高纯度RMPs。
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关键词
视网膜
微血管
周细胞
分离
纯化
培养
鉴定
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Keywords
Retina
Microvessel
Pericyte
Isolation
Purification
Cultivation
Identification
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分类号
R774.1
[医药卫生—眼科]
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题名基于PID的变频恒压供水系统的设计
被引量:5
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作者
黄以鹏
郁琰
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机构
江阴职业技术学院
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出处
《机械制造与自动化》
2011年第5期127-129,共3页
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文摘
为实现恒压供水,系统采用可编程序控制器(PLC)为主控器,变频器为执行机构,完成基于PID的变频恒压供水系统的硬件和软件的设计。实现管网压力的准确采集,自动调节某台水泵的转速和多台水泵的投入及退出,使管网主干管出口端的压力保持在一定的范围内。供水控制系统投入运行后,各项指标达到了设计要求。
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关键词
恒压供水
可编程序控制器控制
变频器
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Keywords
constant pressure water supply
PLC control
inverters
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分类号
TH12
[机械工程—机械设计及理论]
TM921.51
[电气工程—电力电子与电力传动]
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题名IHC二抗放大检测系统质控片的制备及评价
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作者
林齐心
王小亚
黄以鹏
郑美云
孟春
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机构
福州大学迈新生物肿瘤诊断研究所
福州迈新生物技术开发有限公司
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出处
《诊断病理学杂志》
CSCD
北大核心
2013年第8期498-501,共4页
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文摘
目的本研究分别采用不同表面修饰方法处理的玻璃载玻片为基质,以一抗为对象制备二抗放大检测系统质控片。方法将小鼠IgG作为探针固定在玻片上,采用二抗放大检测系统对不同质控片的吸附结合效果进行评价。结果戊二醛预处理的载玻片和硅烷化预处理的载玻片对蛋白吸附较好,反应活性高。结论通过不同二抗放大检测系统的比较表明,MaxVisionTM和EliVisionTMSuper放大检测系统的检测灵敏度高,检测范围宽。EliVisionTMSuper放大检测系统的显示灰度值与检测对象浓度的对数值线性化程度最高。
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关键词
二抗放大检测系统
免疫组化
质量控制
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Keywords
IHC quality control slides of secondary antibodies
Surface modification
Secondary antibody amplificationsystem
Reactivity
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分类号
R334
[医药卫生—人体生理学]
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题名劳务工闯世界无本万利──来自裴圩乡的调查报告
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作者
张前岭
张荣超
王克琦
黄以鹏
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出处
《江苏统计》
1994年第4期15-,19,共2页
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文摘
劳务工闯世界无本万利──来自裴圩乡的调查报告张前岭,张荣超,王克琦,黄以鹏最近.我们对泅阳县裴圩乡组织富余劳动力输出务工情况进行了专题调查.情况如下:一、基本乡情─—人多地少,加上农业机械化程度不断提高.可耕地面积逐年减少,该乡的富余劳动力已超过70...
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关键词
劳务输出
计划生育
输出者
劳务市场
育龄妇女
劳动力分布
外出务工
劳务输出人员
合同书
党政领导干部
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分类号
C829.2
[社会学—统计学]
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