用山羊血代替绵羊血进行补体结合试验的探讨

用山羊血代替绵羊血进行补体结合试验的探讨黄企光唐深刘瑾杨润友（广西医科大学微生物学与免疫学教研室南宁５３００２１）补体结合试验是测定抗原、抗体滴度的经典方法。广泛应用于免疫学、病毒学、细菌学、肿瘤学等方面，是医学、兽医学工作者应该掌握的实验方法。经典...

南宁市儿童齿斑变形链球菌分离初报

从南宁市59例儿童牙菌斑中,分离培养出变形链球菌13株,阳性率为22％。并对变形链球菌的致病性、菌体形态、生化反应特性进行了描述。

新城疫病毒对小细胞肺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)7793株在体内对肿瘤生长的抑制作用及机制。方法:体外培养人小细胞肺癌NCI-H446细胞,通过皮下接种NCI-H446细胞建立人小细胞肺癌裸鼠移植瘤模型。NDV组裸鼠瘤内注射新城疫病毒,阳性对照组注射顺铂(cisplatin,DDP),阴性对照组注射PBS。观察移植瘤生长情况和裸鼠体质量变化,绘制肿瘤生长曲线。6周后处死裸鼠剥取肿瘤组织,HE染色观察细胞学变化,免疫组织化学法检测移植瘤细胞Bax和Bcl-2蛋白表达情况。结果:NDV注射对肿瘤生长有显著抑制作用,抑瘤率达34.1%;NDV对荷瘤鼠无不良反应;光学显微镜下观察发现,NDV治疗组肿瘤组织有许多散在分布的凋亡/坏死区域。NDV能明显上调Bax蛋白的表达量(P<0.01),对Bcl-2蛋白表达则无影响。结论:新城疫病毒7793株在体内能够有效抑制移植瘤生长,其抗肿瘤机制可能与上调Bax蛋白的表达有关。

6株NDV鄱阳株对肝癌细胞杀伤作用的初步研究

目的:研究从江西鄱阳湖野鸭分离的6株NDV对肝癌细胞的杀伤效应,进一步筛选NDV溶瘤毒株。方法:用MTT法研究6株NDV鄱阳株对两株传代肝癌细胞株Novikoff和HepG-2及一株正常肝细胞株HL-7702的杀伤效应。结果:6株NDV鄱阳株对肝癌细胞株Novikoff和HepG-2有显著杀伤效应,而对人正常肝细胞HL-7702无明显影响;病毒对细胞的杀伤活性与病毒作用剂量和病毒作用时间成正比;病毒在肝癌细胞中有明显复制增殖现象;Novikoff肝癌细胞对NDV敏感性强于HepG-2肝癌细胞。结论:6株NDV鄱阳株对Novikoff及HepG-2肝癌细胞产生显著的杀伤作用,而对正常肝细胞HL-7702未见明显影响。

解脲脲原体感染与不育关系的研究

目的 :探讨男、女不育与解脲脲原体 ( Ureaplasma U realyticum,UU )感染的关系 ,进一步研究 UU感染致男性不育的机制。方法 :应用分离培养法对 3 3 6对夫妇 ( 772例 )不育患者 (不育组 )及 12 4例正常生育者 (对照组 )进行生殖道解脲脲原体 ( UU)检测 ,并对不育组男性精液进行常规分析。结果 :不育组和对照组 UU检出率分别为 5 8.8%、 12 .1% ,不育组 U U检出率明显高于对照组 ( P <0 .0 1) ,不育组中受 UU感染的男性精子质量低于未受感染组 ( P <0 .0 5 )。结论 :生殖道解脲脲原体感染可能是导致男、女不育的原因 ,其机制之一可能是

复方金钱草清热颗粒对柯萨奇病毒体外抑制作用的研究

目的:研究复方金钱草颗粒冲剂对柯萨奇B组病毒致人喉癌细胞(Hep-2)细胞病变是否有抑制作用。方法:①Hep-2细胞感染病毒的同时给药;②Hep-2感染病毒2 h后再给药;③药物与病毒作用2 h后再感染Hep-2细胞。结果:复方金钱草清热颗粒对柯萨奇病毒B3、B5致Hep-2细胞病变有抑制作用,同时对CBV5的抑制作用明显优于CBV3。结论:金钱草对柯萨奇病毒有体外抑制作用。

解脲脲原体感染与前列腺液白细胞关系的研究

目的 :探讨解脲脲原体 (U U )感染与前列腺炎的关系。方法 :应用分离培养法对 5 16例男性前列腺液进行解脲脲原体培养 ,同时进行前列腺液 (EPS)常规分析 ,并依据 EPS WBC计数结果将病人分两组 :WBC过量组及 WBC正常组。结果 :WBC过量组、 WBC正常组 UU检出率分别为 36 . 6 % ,12 .2 % ,WBC过量组 UU检出率明显高于 WBC正常组 (P <0 .0 1)。结论 :解脲脲原体感染与 EPS的 WBC升高相关 ,可能是导致非细菌性前列腺炎的病因之一。

桂北五步蛇纤溶酶金属蛋白酶原基因的初步研究

从桂北五步蛇毒腺中抽提蛇毒总 RNA,采用一步法 (RT- PCR和 PCR在同一试管内进行 )扩增纤溶酶金属蛋白酶原基因 ,并进行电泳检测 ,可见 3条特异的 DNA条带 ,分别约为 1.5 Kb、 1.3Kb和 80 0 bp,利用平端连接的方法将其中的 80 0 bp PCR产物克隆至 p GEM- T Easy载体 ,挑选白色菌落 ,用酶切和 PCR法对其进行鉴定。

桂北五步蛇金属蛋白酶原基因1137bp片段的克隆和序列分析

目的 :克隆桂北五步蛇金属蛋白酶原基因 ,并对其进行序列分析。方法 :采用一步法抽提广西桂北山区五步蛇蛇毒总RNA,经 RT- PCR扩增纤溶酶金属蛋白酶原基因 ,将扩增产物克隆至 p GEM- T Easy载体 ,挑选白色菌落 ,用酶切和 PCR法对其进行鉴定。直接利用纯化 PCR产物或提取阳性菌落进行测序并推导其编码的氨基酸序列。结果 :RT- PCR和 PCR扩增得到一约 1137bp产物 ,并将其克隆及测序。结论 :和已报道的皖南五步蛇纤溶酶金属蛋白酶氨基酸序列相比较 ,二者之间有

桂北五步蛇纤溶酶金属蛋白酶基因的克隆和序列分析

目的 :克隆桂北五步蛇纤溶酶金属蛋白酶基因 ,并对其进行序列分析。方法 :从桂北五步蛇毒腺中抽提总 RNA,采用一步法 (RT- PCR和 PCR在同一管内进行 )扩增出纤溶酶金属蛋白酶基因 ,利用平端连接的方法将 PCR扩增产物克隆至p GEM- T Easy载体 ,挑选白色菌落 ,用酶切和 PCR法对其进行鉴定 ,直接利用纯化 PCR产物进行测序或提取阳性菌落进行测序。结果 :RT- PCR和 PCR扩增得到一 6 0 0 bp产物 ,并被克隆及测序。结论 :该实验产物和已报道的皖南五步蛇纤溶酶金属蛋白酶氨基酸序列相比较 ,有 90 .6 %的同源性 ,这为进一步研究该产物的表达 ,以及表达产物的活性提供条件。

蛇毒对肿瘤细胞的体外抑制实验

目的探讨蝮蛇毒及蝮蛇与眼镜蛇混合毒对肿瘤细胞的抗癌活性。方法应用蝮蛇毒及蝮蛇与眼镜蛇混合毒对人源肿瘤细胞进行体外细胞毒试验。结果蝮蛇毒及蝮蛇与眼镜蛇混合毒对传代细胞株（Ｎｏｖｉｋｏｆ及Ｈｅｐ－２）的抑制作用随蛇毒剂量的增加而增强，剂量为５μｇ／ｍｌ时，蝮蛇毒对传代细胞Ｎｏｖｉｋｏｆ及Ｈｅｐ－２的抑制率分别为５０．３％和４７．５％，蝮蛇与眼镜蛇混合毒对Ｎｏｖｉｋｏｆ及Ｈｅｐ－２的抑制率分别为４８．８％和４４．７％，剂量为１０μｇ／ｍｌ时，蝮蛇毒对原代肝癌细胞和直肠癌细胞的抑制率分别为９０．２％和９２．４％，蝮蛇与眼镜蛇混合毒对原代的肝癌细胞的抑制作用分别为８８．６％和９１．３％。结论蝮蛇毒及蝮蛇与眼镜蛇混合毒对肿瘤细胞有明显的抑制和杀伤作用。

桂北五步蛇金属蛋白酶原基因800bp片段的克隆和序列分析

目的 :扩增桂北五步蛇金属蛋白酶原基因 ,并对其进行序列分析。方法 :从广西桂北山区五步蛇毒腺中抽提蛇毒总RNA,采用一步法 (RT- PCR和 PCR在同一试管内进行 )扩增金属蛋白酶原基因 ,对其进行电泳检测 ,得到 3条特异的 DNA条带 ,大小分别为 1.5 kb、 1.3kb和 80 0 bp,利用平端连接方法将 80 0 bp克隆至 p GEM- T载体 ,挑选白色菌落 ,用酶切和 PCR法对其进行鉴定。提取阳性菌落进行测序并推导编码的氨基酸序列。结果 :信号肽和前肽和已报道的皖南五步蛇金属蛋白酶很相似 ,同源性为 97.9% ,但仅含有部分金属蛋白酶成熟肽的氨基酸序列。结论 :推测此 80 0 bp片段为广西五步蛇金属蛋白酶原基因的一部分。

原发性肝癌患者血清sFas的检测及其意义

目的 :检测原发性肝癌患者血清可溶性 Fas(s Fas)的水平 ,并探讨其临床意义。方法 :采用生物素 -亲和素酶联免疫吸附试验 (Biotin- avidin enzyme- linked imm unosorbent assay,BA - EL ISA)检测来自广西的 2 7例原发性肝癌患者和 2 8例正常人血清的 s Fas。结果 :原发性肝癌组血清 s Fas水平为 (3.6 73± 1 .2 98)μg/ L ,高于正常对照组的 (2 .1 4 7± 0 .5 2 3)μg/ L (P <0 .0 5 )。肝癌患者 AFP阳性组、AFP阴性组与正常对照组血清 s Fas分别为 (3.6 5 7± 1 .0 99)μg/ L、(3.6 90± 1 .5 31 )μg/ L和 (2 .1 4 7±0 .5 2 3)μg/ L ,其中肝癌患者 AFP阳性组、AFP阴性组分别高于正常组 (P <0 .0 1 )。结论 :血清 s Fas水平增高 ,可能可作为原发性肝癌尤其是 AFP阴性的肝癌患者的诊断指标之一。

关于改进微生物学与免疫学实验教学的探索

医学微生物学与免疫学是医学基础课程，该学科实验课约占本门课程总学时的４３％，是学习本学科的重要环节，起到用实验加深理解、证实理论的作用，并为今后临床医疗，医学科学研究打好基础。如何搞好微生物学、免疫学的实验教学，发挥实验室在教学、科研、技术开发中的作...

TLR2和TLR4在牛型结核分枝杆菌诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用

目的:探讨Toll样受体(TLR)2和TLR4在牛型结核分枝杆菌卡介苗(BCG)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤中的作用。方法:用BCG刺激HK-2细胞,通过荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测TLR2、TLR4、转化生长因子β1(TGF-β1)和趋化因子CX3CL1的表达。将TLR2抗体和TLR4拮抗剂CLI-90分别与BCG共刺激HK-2细胞,通过荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测TGF-β1和CX3CL1的表达水平。结果:BCG刺激HK-2细胞可诱导TLR2、TLR4、TGF-β1和CX3CL1表达上调,TLR2抗体和TLR4拮抗剂可部分抑制BCG引起的TGF-β1和CX3CL1表达上调。结论:BCG可通过激活TLR2和TLR4引起TGF-β1和CX3CL1表达上调,提示TLR2和TLR4介导的信号通路在结核分枝杆菌致肾小管上皮细胞损伤中发挥重要作用。

复方感冒冲剂体外抗流感病毒作用

目的探讨复方感冒冲剂体外对流感病毒(H3N2)的抑制作用,为临床合理用药提供科学依据。方法使用狗肾传代细胞(Madin-Darby canine kidney,MDCK)建立体外病毒感染模型。将病毒与药物通过三种不同给药方式,通过细胞病变法观察复方感冒冲剂对流感病毒的抑制及对被感染细胞的保护作用。结果复方感冒冲剂在感染病毒同时加药方式下对流感病毒(H3N2)感染的MDCK细胞有明显的保护作用;在先给药再感染病毒的方式下对MD-CK细胞的保护作用较弱;在先加病毒后加药的方式下,复方感冒冲剂对病毒感染的MDCK细胞无明显保护作用。结论复方感冒冲剂具有体外抗流感病毒作用,其药效发挥可能依赖机体的代谢并与给药方式有关。

心律失常与柯萨奇B组病毒感染关系的研究

本文采用微量中和试验法,检测80例心律失常患者、56例正常人和36例风心病患者血清中柯萨奇B组病毒中和抗体效价,其阳性率分别为47.5%、21.4%和16.7%。心律失常组与后两组比较有明显差异(P均<0.01),而后两组之间相比无明显差异(P>0.05)。并探讨了心律失常组柯萨奇B组病毒感染与年龄、性别无显著关系(P均>0.05)。

高产α—淀粉酶菌株分离培育的初步研究

用常规的细菌培养法从土壤中分离选育出产α—淀粉酶的菌株,再对该菌进行热以及紫外线照射,最后筛选出高产α—淀粉酶的生产用菌株。

柯萨奇B组病毒感染与病毒性心肌炎关系的研究

用微量中和试验法检测１００例病毒性心肌炎患者，５０例正常人和５０例其他心脏病患者血清ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ病毒（ＣＢＶ）中和抗体。ＣＢＶ中和抗体阳性串分别为５３％、２４％和２０％，前组阳性率显著高于后两组，Ｐ＜０．０１。后两组阳性率之间无显著差异，Ｐ＞０．０５，提示该组病毒性心肌炎病人的病因有半数以上与ＣＢＶ感染有关。