细胞焦亡在器官移植缺血/再灌注损伤中的研究进展

缺血/再灌注损伤(ischemia-reperfusion injuries,IRI)是在心肌梗死、卒中、器官移植等过程中发生的病理生理过程。组织器官的血液供应受阻,导致组织缺氧和灌注不足,致使酶活性下降和核染色质聚集,同时蛋白质合成受阻。血流重新恢复后,活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生增加,引起氧化应激,内皮功能障碍、DNA损伤和局部炎症反应。细胞死亡在机体中有多种表现形式,大致分为非程序性细胞死亡和程序性细胞死亡。细胞焦亡属于炎症性程序性死亡的一种,其与凋亡、坏死性凋亡等多种细胞程序性死亡方式有共性的特征。然而,细胞焦亡因其以炎症小体为核心的复杂分子机制网络而收到广泛关注,具体表现为由NLRP3、NLRC4等组装而成的炎症小体介导的gasdermin D(GSDMD)裂解和半胱天冬蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase 1,caspase-1)参与的白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)等细胞因子的过度激活。

IPI549调控小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用研究

目的:研究IPI549特异性抑制PI3Kγ对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用。方法:构建C57BL/6J小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型和RAW264.7巨噬细胞缺氧复氧模型,给予IPI549(PI3Kγ抑制剂)干预,以ALT、HE染色、TUNEL判断肝脏损伤情况,Western blot检测组织和原代细胞p110γ(PI3Kγ)蛋白表达变化和RAW264.7细胞缺氧复氧过程TNF-α、JNK、p-JNK蛋白表达情况,ELISA检测细胞上清TNF-α水平。结果:相比于原代肝细胞,枯否细胞明显高表达p110γ。与Sham组比较,IR组肝组织中p110γ的蛋白水平降低;使用PI3Kγ特异性抑制剂(IPI549)干预小鼠,可加重小鼠肝脏缺血再灌注后肝组织损伤和肝脏组织细胞凋亡,而利用GdCl3预处理封闭枯否细胞,可使得IPI549引起的肝组织细胞损伤和凋亡加重得到缓解。在体外实验中,IPI549干预使RAW264.7细胞缺氧复氧过程JNK磷酸化水平升高、TNF-α蛋白表达增加,细胞上清TNF-α分泌增多。结论:PI3Kγ抑制剂IPI549干预使小鼠肝脏缺血再灌注损伤加重,其机制与IPI549抑制枯否细胞中的PI3Kγ影响JNK信号通路的活化,发挥促炎作用有关。