脑室外神经细胞瘤的临床影像及病理学特征分析

目的分析脑室外神经细胞瘤(extraventricular neurocytoma,EVN)的临床影像与病理特征。方法回顾性分析7例经术后病理证实为EVN病例的临床表现、影像学及组织病理学特征。结果7例患者的临床表现以颅高压症状及神经功能障碍为主,MRI呈长T1、等长T2,FLAIR呈高信号,DWI多为等高信号,呈轻中度不均匀强化,伴囊变、钙化等。免疫组化示所有病例突触素均阳性,3例胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性,4例少突胶质细胞转录因子2(oligodendrocyte transcription factor 2,Olig 2)阳性,2例神经元核特异蛋白(neuro-specific nuclei protein,Neu-N)阳性,4例Ki-67为1%~3%,3例Ki-67≥10%,最高达20%,5例异柠檬酸脱氢酶-1(isocitrate dehydrogenase enzyme isoform 1,IDH-1)阴性。4例病理诊断为EVN(WHOⅡ级),3例为非典型EVN(WHOⅡ~Ⅲ级)。肿瘤全切除6例,部分切除1例,无手术死亡病例,5例行术后辅助放疗。术后随访12~48个月,仅1例患者术后2年因肿瘤复发,再次行活检及放化疗外,余患者预后良好。结论EVN临床表现及影像学有一定特征,但易误诊,确诊需病理检查。手术全切除肿瘤是理想治疗方式,术后辅助放疗对部分患者是必要治疗措施。

TPD52在胶质瘤中的表达水平及临床意义

目的探究TPD52在胶质瘤及正常脑组织中的表达及其临床意义。方法收集46例胶质瘤患者病例标本及瘤旁正常脑组织,应用荧光定量PCR、Western blot、免疫组织化学染色方法检测TPD52 mRNA、蛋白的表达量,并分析临床指标与TPD52表达量之间的关系。结果荧光定量PCR及Western blot结果具有一致性,均提示TPD52的表达量随胶质瘤病理分级升高,Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤TPD52表达量明显高于正常脑组织、Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色显示TPD52蛋白定位在胶质瘤细胞质中,67.4%病理标本高表达TPD52(或)。结论TPD52 mRNA与蛋白在胶质瘤细胞中高表达,其蛋白表达量与胶质瘤病理分级呈正相关性,与生存期呈负相关性,其可能是胶质瘤临床治疗的一个潜在基因靶点。

干扰RNA沉默tpd52基因对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的探究沉默tpd52基因表达后对胶质瘤U87细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法将携带着shRNA-tpd52(抑制tpd52的核苷酸序列)、shRNA-NC(阴性对照的核苷酸序列)的慢病毒体外转染胶质瘤细胞系U87。在转染48 h后荧光显微镜下观察表达GFP细胞数量,采用荧光定量PCR、Western blot分别检测TPD52 mRNA及蛋白表达量,MTT检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期分布,Annexin V和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果 U87细胞转染率>90%,与shRNA-NC组及空白对照组相比较,shRNA-tpd52组细胞TPD52 mRNA及蛋白表达量明显减少(P<0.01),而且细胞增殖能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期被阻滞在G0/G1期、细胞凋亡比例明显增加(P<0.05)。结论沉默胶质瘤细胞中tpd52基因表达后,可以有效抑制细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡。

阿维菌素对胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡的影响及其机制探讨

目的观察阿维菌素(AVMs)对胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法传代培养U251细胞,将细胞分为药物实验组和阴性对照组,药物实验组给予不同浓度的AVMs处理,阴性对照组不加AVMs。取药物实验组细胞,分别给予2、4、6、8、10、12μmol/L的AVMs,采用MTT法测算给药24、48、72 h后U251细胞的增殖抑制率。取药物实验组细胞,分别给予4、8μmol/L的AVMs培养72 h后,测算各组细胞凋亡率,检测各组细胞线粒体膜电位及细胞中的Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白。结果 2、4、6、8、10、12μmol/L的AVMs作用于U251细胞后,细胞增殖抑制率逐渐升高,AVMs作用24、48、72 h后U251细胞增殖抑制率也逐渐升高;AVMs对U251细胞的增殖抑制作用呈时间、剂量依赖性(P均<0.01)。AVMs作用72 h时对U251细胞增殖的IC_(50)为5.220μmol/L。阴性对照组与药物实验组4、8μmol/L亚组的细胞凋亡率分别为5.2%±0.16%、31.5%±0.43%、52.4%±0.72%,细胞线粒体膜电位分别为92.4±2.52、85.2±1.32、45.3±0.75,三组细胞凋亡率和线粒体膜电位相比,P均<0.01。阴性对照组和药物实验组4μmol/L亚组、8μmol/L亚组细胞中Caspase-3、Bax蛋白相对表达量依次升高,Bcl-2蛋白相对表达量依次降低(P均<0.01)。结论 AVMs可抑制U251细胞增殖并促进其凋亡,作用机制可能与降低细胞线粒体膜电位、调节凋亡相关蛋白表达有关。

前鳞状缝锁孔经侧裂入路治疗高血压性基底节脑出血效果观察

目的:观察前鳞状缝锁孔入路治疗高血压性基底节脑出血的效果分析。方法:选取2018年1月~2020年9月收治的高血压性基底节脑出血患者总计66例,随机数字表法分组,每组各33例患者,其中33例接受传统开颅经颞中回皮层入路为对照组,另33例则接受前鳞状缝锁孔经侧裂入路为研究组。比较两组术前、术中及术后1个月格拉斯哥昏迷量表(GCS)、6个月生活质量评分(GOS)等临床资料。结果:两组患者术后1个月复查GCS评分均较术前明显提升,研究组进步更明显,差异有显著统计学意义(P<0.05);研究组患者出血量、手术时间、住院时间明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。尽管研究血肿清除程度及术后6个月BI指数平均值优于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。术后6个月时GOS评分及并发症发生率,研究组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:前鳞状缝锁孔入路治疗高血压脑出血手术时间短、创伤小、疗效确切,可缩短住院时间,促进神经康复,可以在临床治疗上使患者获益,值得推广。

术前血清中性粒细胞-淋巴细胞比值对动脉瘤性蛛网膜下隙出血术后行气管切开的预测价值

目的探讨术前血清中性粒细胞-淋巴细胞比值(NLR)对动脉瘤性蛛网膜下隙出血(aSAH)患者术后行气管切开的预测价值。方法收集2013年1月—2021年1月385例就诊笔者单位行脑动脉瘤手术的患者的临床特征、实验室指标、影像学指标等资料。根据术后是否行气管切开将患者分为气切组与未气切组。单因素和多因素logistic回归分析NLR与aSAH患者术后气管切开的相关性。受试者工作曲线(ROC)和Delong检验研究NLR的预测性能。结果气切组NLR水平高于未气切组[16.04(11.39~19.97)vs 6.95(4.11~11.19),P<0.001]。单因素和多因素logistic回归分析发现,NLR(OR=1.09;95%CI:1.02~1.16;P=0.013)是术后气管切开的独立预测因素。ROC曲线发现,NLR预测气切组患者的曲线下面积为0.824(95%CI:0.782~0.861),最佳界值为11.03,敏感性为83.33%,特异性为74.79%,约登指数为0.581。Delong检验发现,与其他3个独立预测因素比较,NLR预测的准确性较世界神经外科联盟(WFNS)分级量表分级差(Z=3.182,P=0.002),但优于年龄(Z=2.905,P=0.004)和动脉瘤位置(Z=4.016,P<0.001)。结论术前血清NLR对预测aSAH患者术后行气管切开具有一定的指导价值。

侧裂分离技巧在基底节脑出血锁孔入路中的临床应用

目的探讨锁孔下分离远端侧裂(SF)的手术技巧及其临床应用。方法回顾分析行锁孔入路血肿清除术的29例高血压性脑出血患者的临床资料。分析术中使用侧裂分离方法、静脉保护及手术效果。结果本组患者术后24 h内复查CT示,21例患者(72.4%)血肿近全清除(90%),8例患者(27.6%)血肿大部分清除(70%~90%)。术后6个月时,16例患者(55.1%)神经功能恢复良好(GOS评分4~5分),12例患者(41.3%)残疾需他人照料,1例患者(3.4%)为植物状态。所有手术患者未出现术后再出血,术中均能在锁孔内识别侧裂静脉,25例患者可在术野中显露并识别大脑中动脉M4段。结论合理选择患者,应用侧裂分离的手术技巧,可在锁孔手术中安全有效地分离侧裂静脉完成手术,取得良好的手术效果;可在临床上推广应用。

术前纤维蛋白原联合中性粒细胞/淋巴细胞比值评分量表预测非典型脑膜瘤预后情况

目的通过外周血液指标建立并验证预测非典型脑膜瘤患者预后的评分量表。方法回顾性地纳入2010年1月~2017年6月广东三九脑科医院收治的行手术治疗的131例非典型脑膜瘤患者。术后随访通过复查磁共振观察患者有无复发,根据术后3年随访有无复发将其分为复发组与未复发组,其中复发组39例,未复发组92例。收集患者的临床、实验室指标、影像表现等相关性资料并分析其与肿瘤复发的关系。结果术前纤维蛋白原联合中性粒细胞/淋巴细胞比值(FIB-NLR)评分量表预测患者术后3年无进展生存期(PFS)的性能良好(曲线下面积为0.836)。多因素风险分析模型显示,FIB-NLR评分量表(1分:HR=4.90,95%CI=1.58~15.17,P=0.006;2分:HR=18.01,95%CI=5.75~56.42,P<0.001)与患者术后3年PFS独立相关。结论术前外周血FIB-NLR评分量表可以较准确地预测非典型脑膜瘤患者的预后情况,为辅助指导临床诊疗提供了新手段。

miR-184对小鼠神经干细胞增殖的影响及其机制

目的观察miR-184对小鼠神经干细胞（NSCs）增殖的影响及其机制。方法构建包装pHBLV-U6-GFP-miR-184基因过表达和pHBLV—U6-GFP-sh-miR-184基因干扰慢病毒载体和各自对照无义序列慢病毒载体，分离培养孕14d的CD1胎鼠大脑侧脑室下区的NSCs并鉴定。实验细胞分为过表达对照组、miR-184过表达组、干扰对照组和miR-184干扰组，各组细胞在感染对应的慢病毒后，用嘌呤霉素进行抗性筛选。筛选后，继续培养细胞至3代，实时定量PCR进行miR-184过表达验证。通过targetScan、iRTarBase、miRanda等软件预测 miR—184的靶基因并进行内源性验证，采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）细胞渗入实验观察各实验组的增殖情况，通过Western blotting实验和实时定量PCR观察各组Notch信号通路相关蛋白Hes1和Hes5及其mRNA的表达情况。结果免疫荧光染色显示，90％的分离培养细胞呈巢蛋A（nestin）和Y性别决定转录因子2（Sox2）双阳性，miR-184过表达组的miR—184表达量是过表达对照组的（67．63±7．53）倍，差异具有统计学意义（P〈0．05）。Brdu细胞渗入实验结果显示与各自对照组比，miR-184过表达组的细胞增值率是过表达对照组的（1．47±0．05）倍，而miR—184干扰组的细胞增值率是干扰对照组的（0．84±0．03）倍．差异均具有统计学意义（P〈0．05）。iRTarBase和miRanda软件预测，Numblike蛋白（Numbl蛋白）作为miR-184的潜在靶基因，miR—184可以下调Numbl蛋白的表达，miR-184过表达组和miR-184干扰组的Numbl相对表达量分别是各自对照组的（0．73±0．07）倍、（1．30±0．05）倍，差异均具有统计学意义（P〈0．05），但miR—184并不能改变Numbl mRNA的表达水平。miR-184可抑制Numb1蛋白的表达．使Notch信号通路的下游相关蛋白Hes1和Hes5及其mRNA表达升高，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-184通过在蛋白翻译水平抑制Numb1蛋白的表达，从而激活Notch信号通路，促进NSCs的增殖。

高良姜素通过抑制Wnt／β-链蛋白信号通路诱导胶质瘤细胞凋亡

目的探讨高良姜素对胶质瘤细胞体外增殖和凋亡的影响。方法（1）将胶质瘤细胞U251和U87分为空白对照组、DMSO组及高良姜素100、200、300、400μmol／L组，使用甲基噻唑基四唑（MTT）比色法观察对胶质瘤细胞增殖情况；（2）通过Hoechest染色观察在不同浓度（0、100和200μmol／L）高良姜素作用下胶质瘤细胞U251和U87凋亡情况；（3）使用流式细胞仪检测胶质瘤细胞U251和U87在不同浓度（100和200μmol／L）高良姜素作用下凋亡情况；（4）应用Westernblotting技术检测凋亡相关蛋白B．链蛋白、B淋巴细胞瘤．2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关蛋白基因（Bax）、活化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（活化caspase-3、活化caspase-9）、多聚腺苷二磷酸核糖基聚合酶（PARP）蛋白等在胶质瘤细胞U87和U251的表达。结果（1）在100、200、300、400μmol／L浓度的高良姜素作用下，体外培养的胶质瘤细胞U251和U87的增殖被明显抑制，并呈现一种量效关系。100、200、300、400μmol／L高良姜素作用于胶质瘤细胞U251和U8724h时，其半数抑制浓度分别为281、321、276、229μmol／L及289．4、261．1、247．4、225．3μmol／L。（2）胶质瘤细胞U251和U87随着高良姜素浓度增加（0、100和200μmol／L1，凋亡率也相应增加，差异具有统计学意义（P〈0．05）。（3）流式细胞仪检测细胞凋亡发现了同样的结果。（4）0、100、200μmol／L浓度高良姜素作用下，胶质瘤细胞U87和U251的Wnt／β-链蛋白表达依次减少，Bcl-2依次减少，Bax依次增加，活化caspase-3、活化caspase-9表达依次增多,活化PARP表达依次增加，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论高良姜素能抑制胶质瘤细胞U251和U87增殖，并通过Wnt／β-链蛋白信号通路及线粒体途径诱导其凋亡。

GDF11对小鼠神经干细胞增殖及TGF-β／Smads、Wnt／β-连环蛋白信号通路的影响

目的探讨生长分化因子11（GDF11）对小鼠神经干细胞增殖及转化生长因子-β（TGF—β）／Smads、Wnt／β-连环蛋白信号通路关键蛋白表达的影响。方法分离培养及诱导分化孕14dCD1胎鼠大脑侧脑室下区的神经干细胞，采用免疫荧光染色鉴定神经干细胞特异性蛋白巢蛋白、SOX2，以及在诱导分化后鉴定神经元标志物神经核抗原（NeuN）和星型胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）。取第3代神经干细胞分为实验组和对照组，实验组添加GDF11（终浓度40ng／mL）．对照组添加等体积完全培养液。采用EdU法检测2组细胞增殖情况，采用Westem blotting于培养1h、6h时检测2组细胞Smad2／3、磷酸化（p）-Smad2／3、Smad4、β-连环蛋白表达。结果免疫荧光染色显示90％以上细胞呈巢蛋白和SOX2阳性，诱导分化后部分细胞呈NeuN或GFAP阳性。细胞增殖实验显示：与对照组EdU阳性细胞比例（0．24±0．03）相比，实验组EdU阳性细胞比例（0．34±0．05）明显提高，差异有统计学意义（P〈0．05）。Western blotting结果显示：实验组P—Smad2／3、Smad4和β-连环蛋白表达在培养1h、6h时均明显高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论GDF11可在体外促进小鼠神经干细胞增殖，其机制可能与TGF-β／Smad、Wnt／β-连环蛋白信号通路激活有关。

超长皮下隧道脑室外引流术的临床应用价值研究

目的探讨超长皮下隧道脑室外引流术在脑积水患者中的临床应用价值。方法回顾性分析广东三九脑科医院神经外一科自2016年3月至2020年3月采用超长皮下隧道脑室外引流术治疗的33例不适宜行脑室腹腔分流术的,或者预计脑室外引流时间大于7 d的,或者脑室外引流时间已达7 d并预计再引流7 d仍不能拔管的,或是脑室腹腔分流术后感染的脑积水患者的疗效。结果33例患者中,引流管最长留置24个及,最短13 d,平均69.3 d;引流时间大于14 d者有32例(97%);术后无一例继发颅内感染。结论超长皮下隧道脑室外引流术留置引流管的时间长,避免了多次引流及继发颅内感染风险,是一种安全有效的脑积水治疗新技术。

红色井冈闪奇光

一身披朝阳上井冈，犹见当年战鼓响。突破敌军千重困，红色经典万古扬。井冈儿女承宏志，人人争强建家乡。百业腾飞添异彩，续写幸福新篇章。

枕下后正中入路治疗枕骨大孔区肿瘤的临床疗效分析

目的探讨枕下后正中入路治疗枕骨大孔区肿瘤的临床疗效。方法回顾性分析广东三九脑科医院神经外一科自2012年1月至2019年1月收治的16例采用后正中入路显微外科结合超声吸引切除的枕骨大孔区肿瘤患者的临床资料,其中神经鞘瘤5例,脑膜瘤7例,血管母细胞瘤4例,观察16例患者的术后疗效。结果16例患者中肿瘤全切除14例,次全切除2例。术后出现后组颅神经损伤加重者2例,无手术死亡。随访3个月~7年,除1例术后仍有肢体乏力、行走不稳外,其余患者症状消失。1例次全切除患者术后3年复发。结论枕骨大孔区肿瘤显微手术技巧要求高,脑干、后组颅神经和血管保护十分重要,枕下后正中入路可以广泛地应用于枕骨大孔区肿瘤的手术治疗。

脑室中枢神经细胞瘤显微手术入路方式的选择及疗效分析

目的探讨脑室中枢神经细胞瘤显微手术入路的选择及其临床疗效。方法选取广州三九脑科医院神经外一科自2011年12月至2019年10月采用显微手术治疗的33例脑室中枢神级细胞瘤患者,对患者的手术入路选择、手术要点、不同手术入路的手术相关情况及术后评分等临床资料进行回顾性分析。结果 20例患者采取额中回-侧脑室前角入路,10例患者采取三角区造瘘-脑室手术入路,3例患者采取行前纵裂-胼胝体入路。肿瘤完全切除26例,次全切除7例。术后再行脑室-腹腔分流2例,行放射治疗和化学治疗7例。随访6个月~8年,未发现复发病例。3种手术入路患者的手术时间和出血量相比,差异有统计学意义(P<0.05);纵裂-胼胝体入路的手术时间、出血量均高于额中回入路、三角区入路,差异有统计学意义(P<0.05)。术后3个月,3种手术入路患者卡氏评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论根据脑室中枢神经细胞瘤的病灶特点,选择合适的手术入路有助于手术全切脑室中枢神经细胞瘤,术后配合放射治疗和化学治疗可改善患者的预后。

经顶枕皮层入路显微外科手术治疗侧脑室三角区脑膜瘤的效果分析

目的探讨经顶枕皮层入路显微手术切除侧脑室三角区脑膜瘤的手术方法、效果及并发症防治。方法回顾性分析广东三九脑科医院自2017年3月至2020年9月行经顶枕皮层入路手术切除的26例侧脑室三角区脑膜瘤的临床资料,观察患者手术切除程度、病理结果、术后并发症、Karnofsky评分及复发情况。结果26例患者的脑膜瘤均完全切除,无死亡患者(1例患者因入院时脑疝,术后放弃治疗)。术后病理检查均证实为脑膜瘤,WHOⅠ级19例、WHOⅡ级7例(非典型脑膜瘤6例,脊索样脑膜瘤1例)。术后10例患者出现新发视野缺损,无1患者出现皮质盲,6例患者出现孤立颞角(1例行造瘘,3例行脑室腹腔分流,2例为静止性孤立颞角未行处理),1例患者出现硬膜外血肿,2例患者出现一过性肌力下降。所有肿瘤均达到完全切除,病理报告提示为WHOⅡ级的患者均常规行放射治疗,术后随访0.5~3年复发2例,均为WHOⅡ级患者。结论合适的手术入路、充分地术前及术中准备,丰富的显微手术经验及技巧在侧脑室三角区脑膜瘤手术中可有效减少并发症的发生。