巴西橡胶树HbMYCs转录因子在叶片发育阶段中的表达分析

为研究MYC转录因子在巴西橡胶树叶片生长发育过程中的调控作用,本课题组成功克隆了3个橡胶树JA信号通路MYC转录因子,分别命名HbMYC2、HbMYC3和HbMYC4,并利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术,检测其在橡胶树叶片4个发育时期的表达情况,发现HbMYC2、HbMYC3和HbMYC4的表达量均在古铜期时为最高,而在过渡期、浅绿期和稳定期表达量有下降趋势,且浅绿期在各组中均最低。另外,HbMYC3在橡胶树叶片发育的4个时期中表达量下降趋势不明显,意味着HbMYC3有可能不参与橡胶树JA信号调控。本研究结果对阐明MYC转录因子在橡胶树叶片中的调控作用具有重要意义。

基于不等长引物等位特异性PCR的SNP检测方法

为开发一种便捷的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)的检测方法,本研究以水稻的6种SNP变异形式(A/T, A/G, A/C, T/G, T/C, G/C)为研究对象,在下游引物为共用引物的情况下,首先设计两条长度相差20个核苷酸但3’末端分别与SNP两个等位差异碱基配对的常规上游引物。另外我们还评估在两条上游引物3’端的第2位或第3位碱基引入了错配碱基后观察对特异性的影响。结果表明,经3%的琼脂糖凝胶电泳后,不等长引物等位特异性PCR能区分不同的纯合子及杂合子,未引入错配碱基的引物只检测出A/T,C/G变异类型的SNP;而引物中引入错配碱基的等位PCR具有更高的检出效率,能检测出6种类型中的5种SNP。因此,本研究开发了一种成本低、操作简单、准确度高的SNP检测方法。