转染IL-12基因的人脐带间充质干细胞对卵巢癌细胞的体外增殖和对裸鼠体内移植瘤的抑制作用

目的探讨人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)负载白细胞介素12(IL-12)重组腺病毒载体抗卵巢癌SKOV3作用的研究。方法腺病毒介导IL-12基因转染体外培养的UC-MSCs(AdIL-12-MSCs),Western blotting和RT-PCR检测AdIL-12-MSCs中IL-12基因蛋白及mRNA表达,ELISA法检测AdIL-12-MSCs上清液中IL-12的表达。光镜下观察外源性IL-12对SKOV3细胞形态的影响,MTT法检测AdIL-12-MSCs分泌的IL-12对SKOV3细胞增殖活性的影响,流式细胞仪检测AdIL-12-MSCs上清液对SKOV3细胞凋亡的影响。建立裸鼠卵巢癌SKOV3皮下移植瘤模型,观察移植AdIL-12-MSCs后对移植瘤的影响。结果腺病毒介导IL-12基因成功转染UC-MSCs形成AdIL-12-MSCs,转染后细胞IL-12基因在蛋白及mRNA水平均有明显表达。AdIL-12-MSCs分泌的外源性IL-12显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖并诱导其凋亡,并抑制卵巢癌SKOV3移植瘤在裸鼠体内的生长(P<0.05)。结论转染IL-12基因的UC-MSCs能够在蛋白及mRNA水平表达IL-12基因,显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖并诱导其凋亡,抑制卵巢癌SKOV3移植瘤在裸鼠体内的生长。

那可丁对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨那可丁对人卵巢癌SKOV3细胞体外增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法体外培养卵巢癌SKOV3细胞,应用四甲基偶氮唑蓝法检测那可丁对细胞的增殖抑制情况;倒置显微镜观察那可丁对细胞形态的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞周期及细胞中成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)蛋白的表达情况。结果在一定剂量范围内,那可丁能显著抑制SKOV3细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性(P<0.05)。那可丁作用SKOV3细胞后,细胞出现皱缩、破裂、脱落等凋亡形态学变化。与对照组相比,那可丁可增加SKOV3细胞的凋亡率以及G_2/M期细胞的比例(P<0.05),并降低FGF-2蛋白的表达水平(P<0.05)。结论那可丁可明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与SKOV3细胞G_2/M期阻滞及FGF-2蛋白表达下调有关。

白细胞介素-12基因修饰人脐带间充质干细胞抗裸鼠移植瘤的作用

目的观察以人脐带间充质干细胞（UC—MSCs）为基因治疗载体表达白细胞介素-12（IL-12）抗裸鼠移植瘤的作用。方法腺病毒介导IL-12基因转染UC—MSCs（AdIL-12-MSCs），Westernblot和逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）检测IL-12基因蛋白及mRNA表达，流式细胞仪检测其对卵巢癌SKOV3细胞周期影响；建立裸鼠移植瘤模型，按组别行尾静脉移植，计算抑瘤率、凋亡率，免疫组织化学检测移植瘤血管内皮生长因子（VEGF）和毛细血管密度（MVD）表达。结果AdIL-12-MSCs在蛋白及mRNA水平表达IL-12基因，抑制SKOV3细胞增殖；移植瘤UC—MSCs组、Ad—MSCs组、AdIL．12组、AdIL-12-MSCs组、环磷酰胺组、联合组抑瘤率为10．06％、8．25％、50．91％、58．23％、70．43％、81．10％，凋亡率为（9．37±0．09）％、（8．96±0．15）％、（15．62±1．22）％、（18．27±1．49）％、（22．07±0．23）％、（25．28±2．05）％；AdIL-12-MSCs能够降低移植瘤VEGF及MVD表达。结论AdlL-12-MSCs能够在蛋白及mRNA水平表达IL-12基因，抑制SKOV3细胞增殖，抑制SKOV3移植瘤生长和血管生成，与化疗药物联用抑瘤作用增强。