期刊文献+
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
弓形虫ROP5基因真核表达载体的构建及其免疫保护性的研究 被引量:10
1
作者 赵焕阁 王华 +5 位作者 黄用豪 周松林 郭峻莉 黄凤迎 林映莹 谭光宏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期947-950,共4页
目的构建弓形虫pcDNA-ROP5真核表达载体,观察弓形虫ROP5基因在小鼠体内诱导的免疫反应。方法克隆弓形虫ROP5基因,将其插入真核表达载体pcDNA-3.1中构建重组质粒pcDNA-ROP5,脂质体法转染Hela细胞体外表达蛋白,蛋白质印迹(Western blotti... 目的构建弓形虫pcDNA-ROP5真核表达载体,观察弓形虫ROP5基因在小鼠体内诱导的免疫反应。方法克隆弓形虫ROP5基因,将其插入真核表达载体pcDNA-3.1中构建重组质粒pcDNA-ROP5,脂质体法转染Hela细胞体外表达蛋白,蛋白质印迹(Western blotting)分析鉴定。将45只小鼠随机均分为3组,分别为PBS组、空质粒组、pcDNA3.1-ROP5组,每2w肌注免疫(100μg/只)1次,共3次,于免疫前及每次免疫前1d和末次免疫后2w收集小鼠血清,用间接ELISA法检测血清抗弓形虫的IgG。各组小鼠腹腔注射RH株弓形虫速殖子1 000个/每鼠,观察小鼠受攻击感染后的存活时间。结果真核表达载体构建成功,Western blotting分析结果显示,重组质粒pcDNA3.1-ROP5能在Hela细胞表达,蛋白相对分子质量为61kDa。pcDNA3.1-ROP5末次免疫后血清中IgG水平显著高于其他组,pcDNA-ROP5免疫的小鼠与对照组相比,实验组小鼠产生了明显的体液免疫应答。攻击感染试验中,实验组的小鼠比对照组的存活时间有明显延长。结论构建的真核表达重组质粒pcDNA-ROP5对抗击弓形虫攻击感染能够激发一定的免疫保护性。 展开更多
关键词 弓形虫 ROP5 真核表达质粒 免疫保护
下载PDF
鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体胞外段原核表达载体的构建及表达鉴定 被引量:2
2
作者 郑少江 黄凤迎 +2 位作者 郑少萍 王伟 吴人亮 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期433-435,439,共4页
目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒p... 目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经过琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠埃希菌,用RT-PCR和免疫印迹方法鉴定是否能够正确表达,同时利用Ni-NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠埃希菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40 ku的蛋白质条带。结论成功构建鸡FGFR-1胞外段原核表达载体并获得重组活性蛋白。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体 肿瘤血管生成 原核表达 基因重组
下载PDF
Vaccination with a Recombinant Chicken FGFR-1 Bypasses Immunological Tolerance against Self-FGFR-1 in Mice 被引量:2
3
作者 郑少江 黄凤迎 +3 位作者 郑少萍 王伟 尹辉 吴人亮 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2006年第4期389-391,共3页
The possibility that a recombinant protein vaccine based on xenogeneic homologous FGFR-1 of chicken induces production of autoantibodies against self-FGFR-1 in BALB/c mice was examined by using ELISA, Western blot ana... The possibility that a recombinant protein vaccine based on xenogeneic homologous FGFR-1 of chicken induces production of autoantibodies against self-FGFR-1 in BALB/c mice was examined by using ELISA, Western blot analysis and ELISPOT assay respectively. Autoantibodies against mouse FGFR-1 were identified by Western blot analysis and ELISA. Compared with the two control groups, the number of APBCs, which were detected by ELISPOT assay, was significantly in- creased in the spleens of mice immunized with cFR1 (P〈0.05). IgG1 and IgG2b, which were detected by ELISA, were the major subclasses and were substantially increased in response to chicken FGFR-1 when compared with control group. The recombinant chicken FGFR-1 protein used as a vaccine can induce autoantibodies against self-FGFR-1 in mice and provide a basis for the active immunotherapy of tumor angiogenesis. 展开更多
关键词 fibroblast growth factor receptor-1 tumor angiogenesis protein vaccine active immunotherapy
下载PDF
弓形虫MIC8基因对弓形虫病的免疫保护性研究 被引量:1
4
作者 赵焕阁 谭光宏 +3 位作者 黄凤迎 王华 郭峻莉 黄用豪 《热带医学杂志》 CAS 2011年第11期1252-1254,1275,F0004,共5页
目的观察弓形虫MIC8基因对弓形虫病免疫保护性的效果。方法用PCR方法扩增弓形虫MIC8基因,定向克隆到真核表达质粒pEGFP-N1中,构建重组表达载体pEGFP-MIC8;MIC8-EGFP转染293T细胞,荧光显微镜观察表达情况;然后分别用质粒pEGFP-MIC8、pEGF... 目的观察弓形虫MIC8基因对弓形虫病免疫保护性的效果。方法用PCR方法扩增弓形虫MIC8基因,定向克隆到真核表达质粒pEGFP-N1中,构建重组表达载体pEGFP-MIC8;MIC8-EGFP转染293T细胞,荧光显微镜观察表达情况;然后分别用质粒pEGFP-MIC8、pEGFP-N1空载体及生理盐水肌肉注射免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,末次免疫3周后用弓形虫RH株速殖子感染免疫小鼠。结果 PCR扩增弓形虫MIC基因序列正确,构建的重组表达载体pEGFP-MIC8鉴定正确,荧光显微镜下观察到重组质粒能够在293T细胞中表达。弓形虫攻击感染后,质粒pEGFP-MIC8免疫小鼠与对照组相比,小鼠的存活时间有一定的延长。结论构建的真核表达重组质粒pEGFP-MIC8对抗击弓形虫攻击感染能够激发一定的免疫保护性。 展开更多
关键词 弓形虫 MIC8 免疫保护
原文传递
弓形虫MIC8基因的克隆及真核表达质粒的构建 被引量:1
5
作者 赵焕阁 李煜 +5 位作者 谭光宏 黄凤迎 王华 郭峻莉 周松林 黄用豪 《中国热带医学》 CAS 2011年第7期805-807,共3页
目的构建弓形虫微线体MIC8的真核表达重组质粒。方法设计合成弓形虫MIC8引物,运用PCR方法扩增其基因片段克隆至真核表达质粒pCDNA3.1,从而构建重组表达质粒pCDNA3.1-MIC8。结果 PCR扩增弓形虫MIC8基因序列正确,构建的重组表达质粒pCDNA3... 目的构建弓形虫微线体MIC8的真核表达重组质粒。方法设计合成弓形虫MIC8引物,运用PCR方法扩增其基因片段克隆至真核表达质粒pCDNA3.1,从而构建重组表达质粒pCDNA3.1-MIC8。结果 PCR扩增弓形虫MIC8基因序列正确,构建的重组表达质粒pCDNA3.1-MIC8经PCR、HindⅢ和XbaI双酶切和测序鉴定正确。结论成功获得真核表达重组质粒pCDNA3.1-MIC8,为进一步研究弓形虫疫苗的免疫保护性奠定基础。 展开更多
关键词 弓形虫 MIC8 真核表达质粒
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部