一种糖类抗原242全自动管式化学发光定量免疫检测试剂的建立

目的建立一种全自动测定血清糖类抗原242(CA242)的管式化学发光定量免疫检测试剂。方法采用均相磁微粒标记技术与高灵敏的吖啶酯化学发光技术,依据双抗体夹心原理,以4株单克隆抗体为原料进行配对单抗筛选,从而建立CA242化学发光磁微粒测定试剂,并在全自动管式化学发光仪上对其灵敏度、精密度、回收率与相关性等进行初步评价。结果筛选的最优单抗配对7C10(包被)-3H1(标记)的反应活性最高,且CA19-9和CA50对CA242检测的干扰很小。该试剂的分析灵敏度为0.69 U/ml,高浓度样本精密度为3.0%,低浓度样本精密度为5.7%,回收率为101.5%。与当前主流的商品化试剂的定量相关性良好(y=1.027x–0.2991,r=0.9911,P<0.05)。结论利用抗CA242单抗为原料建立CA242全自动管式化学发光定量免疫检测试剂,该试剂性能良好,所有检测操作均由仪器自动完成,可满足目前临床医学的高通量检测需求。

复合前列腺特异性抗原的单克隆抗体制备及化学发光法免疫定量检测试剂研究

目的：获得特异性检测复合前列腺特异性抗原（c-PSA）的单克隆抗体配对,建立基于化学发光c-PSA免疫定量试剂。方法：利用市购c-PSA抗原免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,间接法ELISA差异筛选抗c-PSA、游离前列腺特异性抗原（f-PSA）、总前列腺特异型抗原（t-PSA）的抗体,抗体配对后化学发光定量检测血清中c-PSA蛋白。结果：获得抗体配对1A10/7D6-SAE,经c-PSA标准品及临床血清样本初步筛选,该抗体配对适用于基于化学法发光的免疫反应定量检测试剂的开发;血清阳性样本与阴性样本检测结果显示具有统计学意义（P〈0.000 1）;阳性样本定量结果与Siemens公司复合前列腺特异性抗原测定试剂盒（直接化学发光法）的相关系数为0.97;线性范围为0.1~100 ng/ml;检测灵敏度为0.005 ng/ml。结论：成功筛选获得特异性检测c-PSA的抗体配对,并开发c-PSA化学发光免疫定量试剂,其检测能力与国际主流试剂相当。