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抗乙型脑炎病毒单克隆抗体轻链可变区基因的分离和鉴别 被引量:2
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作者 黄发灿 黄华梁 +5 位作者 熊曦明 桂进 熊伟 林晴 宋海燕 陈伯权 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期23-29,共7页
为了构建抗乙型脑炎病毒的人—鼠嵌合抗体,以分泌抗乙型脑炎病毒单克隆体的51-8杂交瘤细胞株为材料,以J_κ和V_κ为探针,从λEMBL-3为载体构建的基因文库中分离有功能性的轻链可变区基因。经3次复筛得到19个阳性噬菌斑。将阳性噬菌斑的... 为了构建抗乙型脑炎病毒的人—鼠嵌合抗体,以分泌抗乙型脑炎病毒单克隆体的51-8杂交瘤细胞株为材料,以J_κ和V_κ为探针,从λEMBL-3为载体构建的基因文库中分离有功能性的轻链可变区基因。经3次复筛得到19个阳性噬菌斑。将阳性噬菌斑的DNA重组体和小鼠肝DNA分别用BamH I酶切后进行分析,在分析的8个重组体中,其中5个含有2.8kb片段,而肝DNA含有8.9kb、5.6kb、3.6kb及3.1kb4个片段,没有2.8kb片段。由于肝DNA的4个片段是未经重排的种系基因,因此可以推断重组体中的2.8kb片段是经过重排的轻链可变区基因。为了进一步鉴定,又从中选出3个含有2.8kb片段的重组噬菌斑,以V_κ和J_κ作探针分别进行点杂交,结果都为阳性,进一步说明了2.8kb片段是经过重排的轻链可变区基因。将这一2.8kb片段克隆到pUC19中,得一重组子,命名为pVLD24。利用pCR扩增技术从pVLD24中扩增出预期的334 bp轻链V基因。综合证实了所鉴别得到的功能性轻链可变区基因是完整的,并且用不同的限制性内切酶绘制了这一功能性基因的酶切图谱。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 单克隆抗体 轻链
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枸杞转基因植株的再生 被引量:12
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作者 王慧中 黄发灿 +2 位作者 李安生 邵启全 牛德水 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期220-223,共4页
本文报道一个快速简便的枸杞转化再生系统。宁夏枸杞的幼茎外植体,能被含非致瘤性Ti质粒载体的根癌农杆菌感染。在该载体双向启动子的一端连有一个npt-Ⅱ基因(新霉素磷酸转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化植物细胞。把选择诱导... 本文报道一个快速简便的枸杞转化再生系统。宁夏枸杞的幼茎外植体,能被含非致瘤性Ti质粒载体的根癌农杆菌感染。在该载体双向启动子的一端连有一个npt-Ⅱ基因(新霉素磷酸转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化植物细胞。把选择诱导培养基上形成的愈伤组织转到选择分化培养基后能很快分化出芽点,继而长成完整的小植株。对再生植株的NPT-Ⅱ酶活性检测及DNA分子杂交表明:外源基因已整合到枸杞细胞的核基因组上,并能在植株水平表达出相应的性状。 展开更多
关键词 枸杞 转化 转基因植株
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抗乙型脑炎病毒人-鼠嵌合抗体基因的表达
3
作者 黄华梁 林晴 +6 位作者 桂进 黄发灿 周德旺 徐乃正 陈伯权 熊曦明 吴美英 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1993年第5期25-28,共4页
关键词 抗体 乙型脑炎病毒 基因表达
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风电工程建设中的管理模式及风险因素分析 被引量:3
4
作者 黄发灿 《环球市场》 2016年第26期277-277,共1页
本文分析了风电工程建设中常见的几种管理模式,分析了当前风电工程建设存在的风险因素,同时也提出了应对及防范风险的措施,以供参考。
关键词 风电工程 管理 风险 防范
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海上风电机组安装技术研究
5
作者 黄发灿 《中文科技期刊数据库(引文版)工程技术》 2016年第11期0025-0025,共1页
随着社会经济的不断发展,人们对能源的需求不断增大,促使人们对清洁能源的利用加大了研究,海上风电的利用自身的经济价值和社会价值得到了越来越多的认可。本文对海上风电机组的安装装备与技术进行了分析。
关键词 海上风电 风电机组 安装
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猪凝血因子ⅩⅢ的分离与纯化
6
作者 赵晶 郑登忠 +3 位作者 詹学雄 黄宏宝 章丽丽 黄发灿 《国际生物制品学杂志》 CAS 2018年第2期68-71,共4页
目的 探索以猪血为原料制备凝血因子ⅩⅢ的新方法。方法 采用硫酸铵分级沉淀法从猪血中粗提凝血因子ⅩⅢ,进一步用二乙氨乙基-Sepharose阴离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶层析进行纯化。结果 获得比活为204.4 IU/mg的高纯度凝血... 目的 探索以猪血为原料制备凝血因子ⅩⅢ的新方法。方法 采用硫酸铵分级沉淀法从猪血中粗提凝血因子ⅩⅢ,进一步用二乙氨乙基-Sepharose阴离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶层析进行纯化。结果 获得比活为204.4 IU/mg的高纯度凝血因子ⅩⅢ制剂,其收率为53.5%,纯化倍数21.7倍。结论 从猪血中提取的粗制品再经过离子交换层析和凝胶层析进行分离纯化可得到高纯度凝血因子ⅩⅢ。 展开更多
关键词 因子ⅩⅢ 硫酸铵 分步沉淀 色谱法 离子交换 色谱法 凝胶
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Genetic Transformation of Lycium barbarum L. via A. tumefaciens 被引量:1
7
作者 杜立群 王慧中 +2 位作者 黄发灿 李安生 邵启全 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1994年第3期286-293,共8页
A system for transformation and regeneration of Lycium barbarum L. , an important Chinese medical plant, has been established. Young stem segments from Lycium barbarum L. were infected with Agrobacterium tumefaciens C... A system for transformation and regeneration of Lycium barbarum L. , an important Chinese medical plant, has been established. Young stem segments from Lycium barbarum L. were infected with Agrobacterium tumefaciens C58cl(pGV3850: :ineo1130), and the transformed calli selected from the callus induction medium containing 50 fig/ml kanamycin could regenerate buds on differentiation medium containing 25 μg/ml kanamycin. 30% of the regenerated buds were normal in morphology. The normal buds could develop into whole plantlets after they were transferred to the rooting medium to induce roots. Nopa-line detection, NPT-Ⅱ enzyme activity assay and Southern blotting hybridization indicated that the foreign genes had been integrated into the genome of Lycium barbarum L. and expressed in the plant. In the processes of experiments, it was found that (i) after the pre-processes, the explants which formed callus quickly were easy to transform ; (Ⅱ) the rate of normal regenerated plants from transgenic calli was 展开更多
关键词 LYCIUM barbarum L. AGROBACTERIUM TUMEFACIENS Ti-plasmid TRANSFORMATION REGENERATION system.
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高纯度凝血酶的分离纯化
8
作者 黄宏宝 郑登忠 +3 位作者 陈秀兰 赵晶 章丽丽 黄发灿 《国际生物制品学杂志》 CAS 2017年第1期27-30,共4页
目的 利用猪血浆制备高纯度凝血酶.方法 使用DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析分离猪血浆获得凝血酶原后,用CaCl2激活凝血酶原生成凝血酶.获得的凝血酶粗制品经2次SP-Sepharose FF阳离子交换层析获得高纯度凝血酶.结果 2次层析后的凝血... 目的 利用猪血浆制备高纯度凝血酶.方法 使用DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析分离猪血浆获得凝血酶原后,用CaCl2激活凝血酶原生成凝血酶.获得的凝血酶粗制品经2次SP-Sepharose FF阳离子交换层析获得高纯度凝血酶.结果 2次层析后的凝血酶的比活为2 546 IU/mg,是凝血酶粗制品的8倍,得率为54%.快速蛋白液相层析检测表明,2次层析后的凝血酶纯度达89%.结论 猪血浆通过1次DEAE-Sepharose FF和2次SP-Sepharose FF离子交换层析可得到高纯度凝血酶. 展开更多
关键词 凝血酶 色谱法 离子交换 工艺学 制药
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