重庆烟区烟草靶斑病病原菌鉴定及菌丝融合群分析

为明确重庆各烟区烟草靶斑病的病原菌种类与病害发生情况,对重庆市黔江区水市乡、涪陵区武陵山乡、武隆区接龙乡、万州区孙家镇、酉阳土家族苗族自治县和彭水苗族土家族自治县烟草靶斑病病害发生进行了调查,并通过组织分离法对典型发病叶片的病原菌进行分离、纯化,观察纯化菌株在PDA培养基上的形态特征,采用菌丝块接种法测定纯化菌株的致病性,通过玻片对峙法观察其与标准菌株的菌丝融合情况,并使用通用引物ITS1/ITS4对13个纯化菌株的rDNA-ITS序列进行扩增,使用MEGA 11软件对扩增序列进行分析比对,构建系统发育树。结果表明,纯化菌株的形态特征与立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)一致,且对烟苗叶片具有致病力;菌丝融合群测定发现,纯化菌株与立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)AG-3融合群的菌丝完全融合;rDNA-ITS序列Blast比对及系统发育树分析显示,其与立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)AG-3融合群以97%的支持率聚于同一分支上。因此,确定重庆烟区烟草靶斑病的病原菌为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)AG-3融合群。