HPLC法分析腐乳氨基酸的条件优化

氨基酸的种类及含量对腐乳后发酵过程的研究具有重要的理论和现实意义，所以必须建立一种便捷可靠的分析方法。高效液相色谱分析水平高、检测范围大，与衍生化技术联用后可以增加腐乳样品中氨基酸检测的灵敏度和精确度。对高效液相色谱法测定腐乳中氨基酸的方法进行了色谱条件优化，将其中对色谱峰分离及峰形有重要影响的梯度洗脱条件、柱温、流速进行优化，研究中以邻苯二甲醛和氯甲酸芴甲酯为衍生化试剂，优化后得到的色谱条件为：流动相A：磷酸氢二钠溶液（pH 7．8），流动相B：甲醇-乙腈-水溶液（体积比45∶45∶10），流速为0．6 mL／min，温度为50℃，检测波长为338，262 nm，进样体积为20μL，精确度及重现性中峰面积相对标准偏差 RSD 均小于0．2％，回收率在90．4％～118．7％，最终检测出腐乳后发酵过程中共有16种氨基酸。