人C-反应蛋白的分离纯化及初步应用

目的:从临床血清样本分离纯化获得人C-反应蛋白(CRP)。方法:运用盐析法、DEAE离子交换层析和亲和层析等方法从临床血清样本中分离纯化出CRP,用于免疫山羊制备多克隆抗体,初步建立免疫透射比浊法测定CRP并进行评价。结果:SDS-PAGE结果显示纯化产物出现相对分子质量约为23000的主带,Western Blotting结果显示纯化产物能与CRP单克隆抗体发生特异性结合,证实纯化产物为CRP,与商品CRP有很好的可比性性。以自提CRP制备出效价高、特异性强的多克隆抗体,运用该抗体建立的CRP免疫透射比浊法具有比较好的性能。结论:成功分离纯化出人CRP,可用于进行生产研究。

脱碳系统半贫液离心泵的腐蚀与防护

脱碳系统中的半贫液离心泵投用一年多后 ,由于受腐蚀严重 ,不能正常工作 .本文从离心泵本身的结构及操作条件等因素出发 ,分析了产生湍流腐蚀、空泡腐蚀、缝隙腐蚀的原因 ,针对产生腐蚀的原因 ,改善输送介质的条件 ,改造离心泵的结构 ,经实际运行二年多 。

无痛分娩产妇行产房集束化护理的作用及对产后尿潴留的影响

探讨产科集中式护理对无痛分娩的影响。方法 选择2020年10月至2022年10月在我院实施无痛分娩的孕妇80例,随机分为对照组和观察组各40例。对照组采用常规分娩护理,观察组采用集中式分娩护理。比较两组产程时间、首次排尿时间、住院时间、睡眠质量、心理状态、排尿相关指标、尿潴留发生率及满意度。结果 观察组各项指标均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 无痛分娩采用集中式护理,可以帮助孕妇保持良好心理状态,促进排尿,防止尿潴留,缩短产程及住院时间,提高满意度,值得推广应用。

长链人胰岛素样生长因子-1在毕赤酵母中表达条件的优化

目的优化长链人胰岛素样生长因子-1(Long chain Arg3 human insulin-like growth factor-1,LR3IGF-1)在毕赤酵母中的表达条件。方法考察甲醇诱导浓度(0.25%、0.50%、0.75%、1.00%、1.25%和1.50%)、诱导温度(25、28、30℃)、pH值(4.75、5.00、5.25、5.50、5.75和6.00)及添加剂(0.1%的精氨酸、甘氨酸、组氨酸、吐温-20和吐温-80)对LR3IGF-1在毕赤酵母中表达的影响,优化LR3IGF-1的表达条件。以最佳表达条件在发酵罐中诱导表达LR3IGF-1,检测其表达量,并与初始发酵条件的表达量进行比较。结果甲醇浓度为0.75%及诱导温度为25℃时,LR3IGF-1的表达量最高,分别为76.5和98 mg/L;pH值为5.25,诱导24 h,LR3IGF-1的表达量较高,且降解程度低;添加吐温-20可使LR3IGF-1的表达量提高至271 mg/L。以优化的条件进行发酵,LR3IGF-1的表达量可达497 mg/L,较优化前(52 mg/L)提高了近9倍,且诱导时间从48 h缩短至24 h。结论优化了LR3IGF-1在毕赤酵母中的表达条件,为其规模化生产奠定了基础。

长链人胰岛素样生长因子-1的分离纯化

目的建立长链人胰岛素样生长因子-1(Long chain Arg3 human insulin-like growth factor-1,LR3IGF-1)的分离纯化方法。方法将LR3IGF-1毕赤酵母工程菌接种至30 L发酵罐进行高密度发酵,发酵液经离心、超滤浓缩后,采用SP Sepharose FF阳离子交换层析、Phenyl Sepharose FF疏水层析、S-100凝胶过滤层析和DEAE Sepharose FF层析对发酵上清液中的表达产物进行分离纯化,测定蛋白浓度,计算蛋白收率,并分析纯化样品的浓度。采用MTT法检测各步纯化样品促NIH-3T3细胞增殖的活性。结果纯化LR3IGF-1的蛋白总收率为28%,RP-HPLC纯度可达95%以上。随着纯化过程中样品纯度的增加,LR3IGF-1的活性也相应增强,各纯化步骤基本不影响LR3IGF-1的生物活性。结论初步建立了LR3IGF-1的分离纯化工艺,其简便有效,为LR3IGF-1的规模化生产奠定了基础。