海南省0~3岁儿童屏幕暴露现况及影响因素研究

目的了解海南省0~3岁儿童屏幕暴露现况,分析其影响因素,为儿童屏幕暴露干预提供科学依据。方法采用多阶段抽样方法,对2020年12月至2021年7月于海南省18个市(县)的5843名0~3岁儿童家长进行问卷调查,收集儿童人口学信息、家庭类型、主要带养人及每日平均视屏时间(近一个月)等资料;分别将0~<18月龄儿童视屏时间>0小时/天、18~36月龄儿童视屏时间>1小时/天定义为屏幕暴露,采用多因素Logistic回归分析屏幕暴露的影响因素。结果5843名儿童中男童3259名(55.78%),女童2584名(44.22%)。65.10%的儿童未接触屏幕,24.75%的儿童每日视屏时间在0~<1小时,5.96%的儿童每日视屏时间在1~2小时,4.19%的儿童每日视屏时间超过2小时。0~3岁儿童屏幕暴露报告率为20.11%,其中0~<18月龄儿童屏幕暴露报告率低于18~36月龄,差异有统计学意义(17.17%vs.26.19%,χ^(2)=65.138,P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示,0~<18月龄中,在农村居住(OR=1.264,95%CI:1.003~1.594)、主要带养人为祖/外祖父母(OR=1.536,95%CI:1.157~2.040)是儿童屏幕暴露的危险因素;18~36月龄中,家庭类型为主干家庭是儿童屏幕暴露的保护因素(OR=0.772,95%CI:0.627~0.950)。结论0~3岁儿童屏幕暴露问题普遍,屏幕暴露程度易受到外界多种因素干扰,制定干预措施需考虑家庭养育环境的影响。

海口市学龄前儿童屏幕暴露影响因素及其对夜间睡眠的影响分析

目的了解海口市学龄前儿童屏幕暴露对夜间睡眠的影响,为改善海口市学龄前儿童的夜间睡眠质量提供参考依据。方法于2019年6月-2020年6月在海口市展开现况研究,对482名学龄前儿童家长进行自制问卷调查,儿童观看电子屏幕时间>1 h/d定义为屏幕暴露。收集入组儿童的人口学特征、屏幕暴露时间、儿童睡眠习惯等信息,采用卡方检验、Logistic回归分析探讨学龄前儿童屏幕暴露的影响因素,以及对夜间睡眠的影响。结果学龄前儿童上学日的屏幕暴露率为31.7%,低于节假日屏幕暴露率(60.4%)(χ^(2)=123.8,P<0.001),有7.1%的儿童节假日屏幕暴露时长>4 h。不论在上学日(r=0.18,P<0.01)还是节假日(r=0.20,P<0.01),屏幕暴露时间越长,对学龄前儿童睡眠问题的影响越大。上学日和节假日屏幕暴露情况与用餐时习惯性使用电子屏幕有关(OR=19.73,95%CI=6.29~61.83和OR=7.45,95%CI=2.03~27.28)。节假日屏幕暴露还与电子屏幕设备的使用数量相关(OR=2.15,95%CI=1.05~4.38)。结论海口市学龄前儿童屏幕暴露率较高,且影响睡眠质量,需引起家长和有关部门的关注,采取科学措施降低学龄前儿童屏幕暴露率及暴露时长。

海南省461例0~3岁儿童维生素A营养状况及其影响因素分析

目的 了解海南省0~3岁儿童血清维生素A营养状况,并探讨其影响因素,为应对维生素A缺乏问题提供科学依据。方法 采用分层随机抽样的方法,抽取海南省5个市县在乡镇卫生院进行健康体检的461例0~3岁儿童为研究对象,收集其人口学特征、喂养情况等信息,采用高效液相色谱法对其进行血清维生素A含量测定,分析比较不同特征儿童血清维生素A水平和维生素A缺乏情况的差异。结果 461例儿童中男276例、女185例,血清维生素A水平为(369.12±134.81)ng/mL,边缘缺乏率为24.73%,缺乏率为9.33%。不同性别的儿童维生素A营养状况比较差异无统计学意义(P> 0.05)。各年龄段儿童血清维生素A水平差异有统计学意义(P <0.05),0~<6月龄组边缘缺乏率(45.98%)和缺乏率(22.99%)最高,随月龄增加边缘缺乏率和缺乏率均降低(r=-0.414,P <0.05)。城市儿童血清维生素A水平高于农村儿童,边缘缺乏率和缺乏率低于农村儿童,差异均有统计学意义(均P <0.05)。每天摄入水果、维生素A补充剂的儿童血清维生素A水平均高于摄入频率≤6次/周的儿童,边缘缺乏率和缺乏率均低于摄入频率≤6次/周的儿童,差异均有统计学意义(均P <0.05)。分层回归分析显示,控制人口学特征变量后,摄入水果情况能解释维生素A营养状况2.10%的变异。结论 海南省0~3岁儿童维生素A缺乏状况属于轻度公共卫生问题,应提高3岁以下儿童维生素A缺乏情况的监测力度,及时通过添加维生素A补充剂、合理膳食等手段加以干预。

海南省居民肝癌死亡与期望寿命损失情况分析

目的 分析海南省2018年居民肝癌死亡情况及其对期望寿命的影响,为政府制定肝癌防控措施提供依据。方法 收集2018年海南省全员人口数据库人口和死亡数据以及海南省疾病预防控制中心居民死亡监测数据,计算海南省居民肝癌死亡率、中国人口标化率(中标率)、世界人口标化率(世标率)和肝癌造成的期望寿命损失。结果 2018年海南省居民肝癌死亡率为30.57/10万,中标率为23.19/10万,世标率为22.70/10万。2018年海南省居民肝癌导致的期望寿命损失为0.62岁,男性和女性居民肝癌导致的期望寿命损失分别为0.89和0.24岁,城市和农村居民肝癌导致的期望寿命损失分别为0.54和0.66岁。结论海南省居民肝癌死亡率及其导致的期望寿命损失较高,为降低肝癌死亡率,提高海南省居民人均期望寿命,建议政府增强全民肝癌防治意识,扩大乙肝疫苗接种范围,加强肝癌致病因素防控,推进肝癌筛查及早诊早治工作。

基于LMS法的海南省7岁以下儿童生长曲线及参考值

目的了解海南省儿童生长发育状况,建立海南省7岁以下儿童身高(身长)、体重与头围的区域生长参考值。方法以海南省19个市县的0~6岁儿童(男童10698人,女童9452人)为调查对象,统一配置标准的测量工具于2020年12月至2022年6月直接测量身高(身长)、体重、头围4项体格发育指标并建立数据库。应用偏度系数-中位数-变异系数法(LMS)对海南省7岁以下儿童调查数据进行拟合,构建海南省儿童生长发育的百分位数及离差法参考值。结果建立了海南省7岁以下儿童年龄别身高(身长)、体重和头围第P3、P10、P25、P50、P75、P90和P97百分位及±3、±2、±1倍标准差的生长参考值及生长曲线。海南省7岁以下儿童生长水平总体上低于2006年世界卫生组织(WHO)和2022年中国儿童生长水平。结论海南省儿童体格发育与全球及全国水平存在差异,建议有关卫生部门提高重视,长期探索有效策略措施,提高海南省儿童的体格发育水平。

胎儿生长受限大鼠胎盘sFLT-1、PLGF的表达及川芎嗪的干预作用

目的:观察川芎嗪干预下大鼠胎儿生长受限(FGR)胎盘中可溶性血管内皮生长因子受体-1(SFLT-1)、胎盘生长因子(PLGF)的表达及其意义。方法:15只SD大鼠分为川芎嗪(TMP)组(FGR治疗组)、FGR非治疗组、正常对照组,FGR治疗组给予高粱酒灌胃,烟熏3次,每次15min,第13天起每天清晨烟熏灌胃后给予TMP 8mg/kg腹腔注射;FGR非治疗组从妊娠第7天起,每日给予高粱酒灌胃,烟熏3次,每次15min;正常对照组从妊娠第7天起,每天9点9mL/kg生理盐水灌胃,每天3次烟熏箱关15min但不烟熏。3组大鼠均于妊娠第20天解剖,比较各组大鼠胎盘PLGF、sFLt-1的表达。结果:FGR治疗组与FGR非治疗组、正常对照组SFLT-1差异无统计学意义(P>0.05);FGR治疗组与FGR非治疗组、正常对照组PLGF差异有统计学意义(P<0.01)。结论:FGR大鼠胎盘SFLT-1升高、PLGF下降,SFLT-1、PLGF可考虑作为胎儿生长受限的筛查指标;经川芎嗪处理后的大鼠胎盘SFLT-1无显著差异,PLGF升高,川芎嗪可考虑作为胎儿生长受限的治疗药物。

兔膝关节骨关节炎模型建立的探讨

目的探讨应用前交叉韧带和内外侧半月板切除的方法制作骨关节炎(OA)动物模型的可行性及可靠性。方法成年雄性新西兰大白兔20只,于右后肢膝关节切断前交叉韧带和切除内外侧半月板,左后肢仅打开关节囊,不对关节内部进行操作,观察术后兔子活动情况;于第2、6、10周处死,观察其左、右两侧后肢膝关节软骨病理改变。实验动物2、6、10周后取右后肢膝关节软骨为实验组,左侧肢体膝关节软骨标本为对照组,比较两组软骨病变情况。结果 2、6、10周后,从实验动物活动表现和大体标本观察,兔右后肢膝关节均呈典型的OA特征。结论前交叉韧带和内外侧半月板切除是一个制作OA动物模型的较为理想的方法。

QPCR技术检测孕妇外周血中胎儿DNA方法的建立

目的:建立QPCR技术检测孕妇外周血中胎儿DNA的方法,并探讨其方法的稳定性、灵敏性与可靠性。方法:通过prime5.0设计出SRY与β-globin的TapMan探针,并对其QPCR反应体系进行优化。结果:分别得到了SRY与β-globin的引物及探针的反应最适浓度比,建立了其最佳QPCR反应体系,并得出所需外周血的最少量。结论:成功建立了QPCR技术检测孕妇外周血中胎儿DNA的方法,该方法将可用于无创性相关产前诊断。

PCOS不同临床表型的关系分析

目的分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者的临床基本特征,探讨PCOS患者不同临床表型的相关性。方法采用病例对照研究设计,选取2013年6月至2015年12月就诊于广东省计划生育专科医院的门诊患者,按照Rotterdam标准诊断的PCOS患者301例为病例组,选取月经规律且有正常生育史的女性135例为对照组。采用问卷调查方法收集调查对象的基本信息,比较两组性激素、胰岛素、血糖水平及身体质量指数(BMI)等临床特征;将病例组高雄激素症(HA)、胰岛素抵抗(IR)和肥胖进行交互关联分析和Logistic回归分析。结果病例组与对照组的年龄、雌二醇(E2)和黄体生成素/卵泡刺激素(LH/FSH)比较差异均无统计学意义(均P>0.05),平均月经周期、体重、身体质量指数(BMI)、FSH、LH、泌乳素(PRL)、睾酮(T)比较差异均有统计学意义(t值分别为-30.07、-2.32、-3.83、-6.85、-6.65、-6.79、-11.64,均P<0.05)。病例组与对照组在HA、IR、HA+IR、IR+肥胖、HA+IR+肥胖等单独或组合临床特征表型比较差异均有统计学意义(χ^2值分别为13.27、18.14、14.97、17.02、19.40,均P<0.05)。交互关联分析和Logistic回归分析结果显示:在未校正年龄和BMI影响的情况下,HA(OR=4.81,95%CI:2.06~11.21)及IR、HA+IR、IR+肥胖及HA+IR+肥胖(β=20.88)是PCOS的主要影响因素(均P<0.05);校正年龄和BMI的影响因素后,仅有HA是PCOS的主要影响因素(OR=4.67,95%CI:1.97~11.08,P<0.05)。结论HA是PCOS众多临床表型的病理生理基础,高胰岛素血症和肥胖影响HA的发生。

学龄前儿童睡眠与生长发育相关性研究进展

睡眠障碍是学龄前期儿童的常见疾病,但很多儿科医生对睡眠障碍性疾病仍认识不足,现有研究表明,即使是短暂的睡眠问题也可能妨碍儿童的生长发育,甚至迁延至成年期,造成多种并发症。本文概括了学龄前儿童睡眠的流行病学研究,并回顾总结了近年来国内外有关儿童睡眠与疾病、环境、遗传、家庭习惯等方面关系的研究,为学龄前儿童睡眠医学的进一步深入研究发展提供可行的关注方向。

2018年海南省居民非故意伤害死亡特征及对人均期望寿命影响的分析

目的分析海南省居民主要非故意伤害死因及对居民人均期望寿命的影响,了解海南居民不同性别、不同年龄的非故意伤害主要死因,为政府制定防控措施提供依据。方法选取海南省2018年死亡人口信息登记管理系统中非故意伤害死亡居民个案,计算不同性别、年龄的各类非故意伤害的死因构成比、死亡率以及期望寿命损失。结果2018年海南省居民非故意伤害死因首位是道路交通伤害,死亡率为13.67/10万,位列全人群死因第10位,期望寿命损失为0.376岁。其次分别为跌倒/坠落和溺水,死亡率分别为10.12/10万和5.05/10万,期望寿命损失分别为0.173岁和0.190岁。男、女非故意伤害首位死因分别为道路交通伤害和跌倒/坠落,死亡率分别为20.55/10万、10.18/10万,期望寿命损失分别为0.521岁、0.156岁。20岁以下、20~69岁、70岁及以上居民非故意伤害首位死因分别为溺水、道路交通伤害、跌倒/坠落。结论海南省居民非故意伤害主要死因为道路交通伤害、跌倒/坠落、溺水。其中,道路交通伤害造成的人均期望寿命损失最高,建议政府积极采取措施加强男性青壮年的道路交通伤害、儿童青少年的溺水及老年人的跌倒/坠落等非故意伤害的监测及干预,方可持续提高海南省居民人均期望寿命。

家庭伤害对儿童青少年心理认知和社会适应能力发展的影响

家庭是儿童青少年日常生活的主要场所,家庭伤害是家庭因素对儿童青少年心理认知和社会适应能力发展的主要影响因素之一,目前已成为危害儿童青少年身心健康的严重公共问题,受到国内外学者的广泛关注。但迄今为止,国内尚缺乏家庭伤害与儿童青少年心理认知和社会适应能力发展之间关系的综合论述。本文从家庭伤害相关理论、主要内容及其对儿童青少年心理认知和社会适应能力发展的影响等方面进行总结回顾,探讨家庭伤害对儿童青少年心理认知和社会适应能力发展的影响,旨在提高我国学者对家庭伤害的认识,共同促进儿童青少年健康成长。

海南省6~12岁儿童屏幕暴露现况调查

目的了解海南省6~12岁儿童屏幕暴露情况,分析影响因素,为制定儿童屏幕暴露干预措施提供参考。方法于2020年12月—2021年7月,采用多阶段分层整群抽样方法抽取海南省18个县(市)的6~12岁儿童进行问卷调查,收集人口学信息、父母文化程度、家庭类型和视屏时间等资料。分析儿童屏幕暴露率,并采用多因素logistic回归模型分析儿童屏幕暴露的影响因素。结果调查27501名儿童,其中男童13901人,占50.55%;女童13600人,占49.45%。年龄为(9.22±1.86)岁。3925名儿童存在屏幕暴露,暴露率为14.27%。多因素logistic回归分析结果显示,性别(女,OR=0.859,95%CI:0.796~0.926)、年龄(OR=1.078,95%CI:1.049~1.108)、民族(少数民族,OR=1.147,95%CI:1.041~1.254)、居住地(农村,OR=0.869,95%CI:0.801~0.944)、父亲文化程度(高中/中专,OR=0.879,95%CI:0.788~0.981;大专及以上,OR=0.686,95%CI:0.589~0.818)、母亲文化程度(大专及以上,OR=0.706,95%CI:0.588~0.846)、家庭类型(其他,OR=1.250,95%CI:1.105~1.414)和家庭年收入(>10万元,OR=0.741,95%CI:0.619~0.885)是儿童屏幕暴露的影响因素。结论海南省6~12岁儿童屏幕暴露率受到性别、年龄、民族、居住地,以及父母文化程度和家庭年收入等影响。

回应性喂养对婴幼儿睡眠影响的研究进展

回应性喂养(RF)是回应性照护的重要组成部分,是以婴幼儿主观意愿为主的喂养方式。婴幼儿早期阶段是机体神经系统发育和睡眠昼夜节律形成的关键期,不当的喂养方式可能造成婴幼儿各种睡眠问题。现有研究表明,回应性喂养能够提高婴幼儿睡眠质量,并有效预防睡眠问题相关疾病发生和发展。本文通过文献学习,对回应性喂养的概念、重要性、婴幼儿睡眠问题及其流行病学特征、以及回应性喂养对婴幼儿睡眠问题影响的研究进行总结回顾,探讨婴幼儿回应性喂养对睡眠的影响。

海南省学龄儿童睡眠不足现状及影响因素研究

目的分析海南省学龄儿童睡眠时间现状及其影响因素,为提高海南省儿童睡眠质量提供科学依据。方法于2021年11月-2022年1月采取多阶段分层随机抽样的方法,选取海南省86所小学共25162名儿童,通过自制问卷对主要带养人进行儿童睡眠时间和人口学资料的调查,应用logistic回归模型探索儿童睡眠不足的影响因素。结果海南省最终纳入的24200名学龄儿童上学日和周末夜间睡眠时间分别为(8.79±0.81)和(9.51±0.98)h,睡眠时间总量分别为(10.06±1.18)和(11.62±1.20)h,睡眠不足发生率占30.8%。随着年龄的增加,儿童睡眠不足报告率增加,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归模型分析显示,11~12岁组儿童发生睡眠不足的风险是6~7岁组儿童的1.59倍(95%CI=1.43~1.77)。父亲大专及以上文化程度的儿童发生睡眠不足的风险是父亲文化程度为小学及以下儿童的1.36倍(95%CI=1.15~1.60)。核心家庭和主干家庭的儿童睡眠不足发生的风险分别为其他家庭类型儿童的1.13、1.14倍(95%CI=1.01~1.26,1.04~1.34)。与每日户外活动>2 h相比,每日户外活动<1 h可使儿童发生睡眠不足的风险增高至1.69倍(95%CI=1.42~2.00)。每日屏幕暴露时间>2 h儿童发生睡眠不足的风险是屏幕暴露时间<1 h的1.34倍(95%CI=1.18~1.51)。结论海南省学龄儿童普遍存在睡眠时间不足,特别是夜间睡眠时间过短现况更为严重。儿童睡眠不足与年龄、父亲文化程度和家庭类型相关;长时间屏幕暴露也是导致儿童发生睡眠不足的主要危险因素,较长的户外运动时间能改善睡眠不足现象。

高危型HPV持续感染与宫颈癌前病变的相关性

目的探讨不同型别的HPV持续感染对宫颈病变进展的时效及作用。方法在现有流行病学调查的基础上,对340例持续HPV阳性的妇女进行TCT检测,根据检测结果,将细胞学检查为ASCUS、ASC-H、LSIL、HSIL及CIN1/2/3妇女的HPV检测结果进行对比分析。结果 340例HPV感染者中,感染比例较高的四种优势型别分别为52型(29.41%,100/340),16型(15.59%,53/340),58型(15.29%,52/340)(P<0.05),18型(10.29%,35/340);一年持续感染率为25.76%,持续感染的优势型别分别为:18型(40.00%,14/35),58型(38.46%,20/52),31型(31.25%,5/16),66型(30.00%,3/9),52型(21.00%,21/100),51型(20.00%,5/25)),16型(18.87%,10/53);初感率和持续1年的感率相比较,58型、18型、31型和66型有显著差异(P<0.05);初筛人群中,58,16,18型的HSIL级别病变的发生率显著高于52型(P<0.05);持续感染1年的人群中,58,16,18型HSIL级别病变发生率显著高于52型(P<0.05)。18型的LSIL病变级别的初感染率和持续1年感染率有显著差异(P=0.03)。结论 58,16,18三种型别的持续感染率高且对宫颈病变的进展关系密切。

多囊卵巢综合征患者H19基因多态性与复发性流产的相关性

目的探讨H19基因多态性与多囊卵巢综合征(PCOS)患者复发性流产(RSA)遗传易感性的相关性。方法选择PCOS患者115例和75例对照组为研究对象。PCOS的诊断标准参照鹿特丹工作组修正的标准。在115例PCOS患者中,55例为已生育无流产史的PCOS患者,60例为PCOS伴复发性流产(RSA)患者。提取研究对象基因组DNA,采用高通量测序法进行基因组测序。分析长链非编码RNA (lnc RNA) H19基因结合区单核苷酸多态性(SNPs)与PCOS伴发RSA的相关性。结果PCOS+RSA组、PCOS对照组和正常对照组中H19基因的rs7103849位点存在AA、AG、GG 3种基因型和A、G两种等位基因,PCOS+RSA组3种基因型和A/G两种等位基因频率分别为26.3%、57.9%、15.8%、55.3%及44.7%;PCOS对照组3种基因型和A/G两种等位基因频率分别为66.7%、26.7%、6.7%、80.0%及20.0%;正常对照组3种基因型和A,G两种等位基因频率分别为24.0%、60.0%、16.0%、54.0%及46.0%,3组在3种基因型的频率分布上差异无统计学意义(P>0.05);而两种等位基因频率分布上差异有统计学意义(P=0.047)。结论 lnc RNA H19基因rs7103849位点SNP多态性可能与RSA的发生相关。

抑制素B与多囊卵巢综合征不同临床表型相关性研究

目的分层对照分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者的临床基本特征,探讨抑制素B(INH B)对PCOS的临床意义及与不同临床表型的相关性。方法选取2013年6月至2015年12月广东省计划生育专科医院按照Rotterdam标准诊断的148例PCOS患者为病例组,选取月经规律且有正常生育史的女性40例为对照组。收集调查对象基本信息,根据血清睾酮(T)≥1.97 nmol/L分为高雄激素血症(HA)组和非高雄激素血症(NHA)组;根据稳态模式胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)≥2.69分为胰岛素抵抗(IR)组和非胰岛素抵抗(NIR)组;根据BMI≥24分为超重组和非超重组;将3组进行对照分析,探讨INH B与PCOS不同临床表型的相关性。结果对照组和PCOS组在BMI、黄体生成素(LH)、LH/卵泡刺激素(FSH)、T、抗苗勒管激素(AMH)和HOMA-IR差异有统计学意义[23.13±3.72 vs.30.15±4.42,(7.83±4.53)U/L vs.(4.65±2.00)U/L,1.73±1.82 vs.0.94±0.41,(2.40±1.42)nmol/L vs.(1.45±0.85)nmol/L,(9.21±4.77)μg/L vs.(5.44±3.01)μg/L,3.96±2.45 vs.1.70±0.50,P<0.01];INH B差异无统计学意义(P>0.05)。在HA组和NHA组的比较中,INH B差异有统计学意义[(53±28)ng/L vs.(112±37)ng/L,P=0.000],AMH、BMI和HOMA-IR比较差异无统计学意义(P>0.05);在IR组和NIR组的比较中,BMI和INH B在两组中的差异有统计学意义[21.85±3.41 vs.23.89±3.71,(89±32)ng/L vs.(32±27)ng/L,P<0.05],T和AMH差异无统计学意义(P>0.05);在超重组和非超重组的比较中,HOMAIR和INH B在两组中的差异有统计学意义[(3.35±1.99 vs.5.02±2.76,(86±24)ng/L vs.(38±22)ng/L,P=0.001),T和AMH差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PCOS具有高度的临床异质性,高雄激素、胰岛素抵抗和超重等不同临床表型可能具有不同的病理生理机制,导致INH B在不同表型反映不同。

胰岛素抵抗和多囊卵巢综合征各临床特征的相关性分析

目的通过描述多囊卵巢综合征(PCOS)的临床基本特征,分层对照分析胰岛素抵抗(IR)与PCOS各种临床特征的相关性。方法采用病例对照研究设计,选取Rotterdam标准诊断的PCOS患者301例为病例组,选取月经规律且有正常生育史的女性144例为对照组;采用问卷调查方法收集调查对象基本信息,根据临床特征分为IR组和非IR组进行分层对照分析,分析各组临床特征的差异以及IR与各种临床特征间的相关性和交互作用。结果对照组和PCOS组在月经周期、BMI、LH及T的均值差异有统计学意义(P<0.05);对照组均无IR发生。在单一临床特征的分层比较中,IR与月经周期、肥胖及多囊卵巢有关(P<0.05)。结论 IR与PCOS各临床特征具有直接的相关性,应重视IR在PCOS疾病发生中的作用。

利用CRISPR/Cas9技术制备敲除AR和IRS2基因大鼠

目的探讨应用CRISPR/Cas9技术制备敲除雄激素受体(AR)和胰岛素受体底物2(IRS2)基因大鼠,构建可用于研究的稳定遗传的基因敲除大鼠品系。方法针对与雄激素表达相关基因-AR基因和胰岛素表达有关的胰岛素受体底物(IRS)基因设计出了20 bp的AR/IRS2 sgRNA和30 bp AR/IRS2 sgRNA,设计出的sgRNA和Cas9体外转录后显微注射至SD大鼠受精卵细胞,F0代大鼠出生后取其基因组DNA测序鉴定基因型后,对确认敲除的大鼠F0与野生型交配,获得杂合子F1代。结果设计了20 bp AR/IRS2 sgRNA和30 bp AR/IRS2 sgRNA,与Cas9一起进行了体外转录后显微注射至SD大鼠受精卵细胞,共获得2个受精卵并移植到1只雌性代孕大鼠。繁殖出嵌合体大鼠F0 2只(#51,#56),F0#51、#56与野生型大鼠合笼,繁殖出F1大鼠9只,其中F0#51繁殖出3只为双敲大鼠(#12,#13,#18),其余6只为单敲大鼠,F0#51产生的3只双敲大鼠发生不同程度的碱基插入或缺失,其中#12,#18大鼠在AR基因上缺失7个碱基(CCCCGGC),在IRS2基因上缺失4个碱基(GCGC)。#13大鼠在AR基因上插入2个碱基(CG),在IRS2基因上缺失4个碱基(GCGC)。大鼠的AR、IRS2基因表达被破坏。结论采用CRISPR/Cas9技术成功获得敲除基因AR、IRS2大鼠,经基因测序和蛋白质免疫印迹鉴定AR、IRS2,证明正确,为下一步鉴定是否表现出多囊卵巢综合征表型特征打下基础。