黄连素通过抑制磷酸化埃兹蛋白表达阻断鼻咽癌细胞侵袭和转移的机制研究(英文)

目的:探讨黄连素(berberine,BBR)抑制鼻咽癌细胞侵袭及移动的分子机制,明确BBR是否通过抑制Ezrin蛋白抑制鼻咽癌侵袭转移。方法:采用细胞增殖实验(MTT)测定BBR非毒性浓度(non-cytotoxicconcentration,NCC),扫描电子显微镜观察BBR在NCC对鼻咽癌细胞5-8F细胞伪足形成的影响,Trans-well实验检测BBR处理后鼻咽癌细胞运动侵袭能力;Western印迹检测BBR对鼻咽癌细胞Ezrin蛋白表达及其磷酸化(phos-Ezrin)的影响;基因转染技术将pcDNA3.1-Ezrin和pcDNA3.1-Ezrin M转染至6-10B细胞,分析BBR对上述细胞运动能力的影响。结果:BBR的NCC为0～40μmol/L;BBR在此浓度范围能有效地抑制细胞伪足形成,抑制鼻咽癌细胞5-8F穿过人工基底膜,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),并具有浓度依赖性和时间依赖性;BBR抑制5-8F细胞phos-Ezrin表达且呈浓度依赖性和时间依赖性,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);BBR对6-10B-pcDNA3.1-Ezrin M侵袭移动抑制作用弱于6-10B-pcDNA3.1-Ezrin。结论:BBR可以通过抑制Ezrin磷酸化表达和细胞伪足形成阻断鼻咽癌细胞的转移。

小檗碱对EB病毒DNA复制的抑制作用

目的通过分析小檗碱处理后的Raji细胞中EB病毒DNA的变化,探讨小檗碱对EB病毒DNA复制的抑制作用。方法运用四甲基偶氮唑蓝法确定小檗碱对Raji细胞生长的细胞无毒性浓度,然后采用巢式荧光定量PCR方法检测该浓度处理后的Raji细胞EB病毒DNA含量,分析小檗碱对EB病毒DNA复制的影响。结果小檗碱对Raji细胞的细胞无毒性浓度(NCC)为0～10μmol/L.不同浓度(1.25、10和40μmol/L)的小檗碱处理后的Raji细胞EB病毒DNA拷贝数与未加药组相比显著降低(P<0.05),呈药物浓度依赖性。结论小檗碱在细胞无毒性浓度下,可抑制Raji细胞中EB病毒DNA的复制,为使用小檗碱或含小檗碱的中药复方防治EB病毒相关肿瘤提供了新的实验依据。

血清胱抑素C在多发性骨髓瘤肾功能损害诊断中的价值

目的探讨血清胱抑素C(CysC)在诊断多发性骨髓瘤(MM)肾功能损害中的价值。方法用日立7170A全自动生化分析仪检测32例MM患者和20例健康体检者血清CysC、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、尿酸(UA)及β2-微球蛋白(β2-MG)的含量。用受试者工作曲线(ROC)评价CysC的诊断价值。结果在新诊断的MM患者中,CysC含量(1.90±1.53)明显高于健康对照组(0.70±0.20)(P<0.05),并且与β2-MG成明显正相关(r=0.474,P<0.05)。受试者工作曲线(ROC)分析显示,CysC的曲线下面积(AUC)(0.903)高于β2-MG(0.881)、Cre(0.624)、Urea(0.636)和UA(0.770)。ISS-Ⅲ期MM中CysC(3.07±1.95)明显高于ISS-Ⅰ期(1.12±0.50)和ISS-Ⅱ期(1.32±0.48)(P<0.05)。结论 CysC可以作为诊断MM患者肾功能损害的敏感内源性指标之一,而且优于β2-MG、Urea、Cre和UA,在MM分期和判断预后中也有重要的临床意义。

Cdk3在结肠癌变过程中的表达及其意义

目的:研究Cdk3在结肠息肉、结肠腺瘤、结肠癌组织中的表达,探讨Cdk3在结肠癌变过程中的演变规律及其意义.方法:用免疫组织化学和原位杂交的方法检测22例结肠癌组织、22例结肠腺瘤组织、24例结肠息肉组织中Cdk3蛋白和mRNA的表达.结果:Cdk3蛋白和mRNA在结肠息肉、结肠腺瘤、结肠癌组织中的表达呈核.质型,以质为主.图像分析结果显示,结肠癌组织中Cdk3蛋白表达平均光密度值(0.80±0.36)明显高于结肠腺瘤组织(0.48±0.22)和结肠息肉组织(0.25±0.13)(P<0.05),结肠腺瘤组织中Cdk3蛋白表达平均光密度值明显高于结肠息肉组织(P<0.05),结肠癌组织中的阳性细胞数(266.5±40.2)明显高于结肠腺瘤组织(132.0±37.4)和结肠息肉组织(129.3±26.7).结论:Cdk3在结肠癌变过程中表达逐步增强,在结肠癌组织中异常高表达,可能在结肠癌变过程中发挥重要作用.

血清中HCV抗体与HCV-RNA检测在临床中的应用

目的探讨丙型肝炎病毒抗体与RNA在临床中的应用价值。方法用ELISA法检测934例丙型肝炎可疑患者病毒抗体,用实时荧光定量PCR检测379例丙型肝炎可疑患者病毒RNA。结果934例患者HCV抗体阳性率为19.16%,379例HCV-RNA阳性率为43.01%。53例为两者均做的病人,RNA和Ab均阳性的占52.8%(28/53),均阴性占15.1%(8/53),两者的一致率达67.9%,Ab的阳性率为81.1%(43/53),RNA的阳性率为56.6%(30/53)。结论HCV抗体联合HCV-RNA检测对丙型肝炎的临床诊断有一定的价值。

细胞周期依赖性蛋白激酶3(CDK3)的研究进展

细胞周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs)是细胞周期调控机制的核心,CDKs与相应的细胞周期素(cyclin)结合是细胞周期各类分子事件的启动和进行的必要条件。CDK3与CDC2(CDK1)和CDK2很高的同源性,CDK3与CDK1、CDK2功能有一定的相似,但又截然不同。在细胞周期行进过程中,CDK3与相应的cyclin结合参与调控细胞G1/S转变以及促进细胞G0期的退出,是细胞周期进程中的限速步骤。而目前有关CDK3准确的生物学功能及其在细胞周期中的调控机制还并不十分清楚。本文就目前CDK3的生物学功能及其在细胞周期中的调控机制的研究进展做一综述。

SH2-B在结肠癌组织中表达及临床意义

目的探讨SH2-B在结肠癌癌变过程中的演变规律,分析SH2-B表达与结肠癌临床分期的关系,分析SH2-B表达与结肠癌转移的关系。方法免疫组织化学方法检测69例结肠癌组织、27例结肠腺瘤组织、29例结肠息肉组织中SH2-B蛋白的表达。69例结肠癌患者Ⅰ期11例、Ⅱ期22例、Ⅲ期19例、Ⅳ期17例,其中无转移34例,淋巴节转移35例。结果免疫组织化学检测结果显示,SH2-B蛋白在结肠息肉组织、结肠腺瘤组织、结肠癌组织中的表达呈浆-核型,以胞浆为主。结肠息肉患者SH2-B阳性率为31%(9/29),结肠腺瘤患者SH2-B阳性率为52%(14/27),结肠癌患者SH2-B阳性率为93%(27/29)。结肠癌组织中SH2-B的阳性细胞率(0.64±0.26)明显高于结肠腺瘤组织(0.26±0.27)和结肠息肉组织(0.12±0.21)(P<0.001),结肠腺瘤组织中阳性细胞表达率明显高于结肠息肉组织(P<0.05)。结肠癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期强阳性率分别为18.2%(2/11)、45.4%(10/22)、57.9%(11/19)和82.3%(14/17)。转移组和非转移组强阳性率为45.7%(16/35)和23.5%(8/34),转移组SH2-B强阳性率显著高于无转移组(P<0.05)。结论 SH2-B过表达可能参与了结肠癌癌变过程,可能是结肠癌变的早期事件。SH2-B表达与结肠临床分期有关。SH2-B可能参与了结肠癌转移,SH2-B高表达与结肠癌转移呈正相关。

小檗碱通过Ezrin蛋白抑制鼻咽癌细胞迁移和伪足形成

目的观察小檗碱（Berberine，BBR）对鼻咽癌细胞埃兹蛋白（Ezrin）和磷酸化埃兹蛋白（phos-Ezrin）表达的影响以及其对细胞伪足形成和迁移的抑制作用，探讨BBR抗鼻咽癌转移可能的分子机制。方法以体外培养的鼻咽癌细胞株（CNE1）为研究对象，用MTr法分析BBR对CNE1细胞生长的影响，选用BBR细胞无毒性浓度（non-cytotoxic concentration，NCC）进行实验。免疫印迹（Western-blotting）分析CNE1Ezrin和phos-Ezrin的表达。用光镜CNE1观察细胞迁移能力，电子显微镜观察细胞伪足形成。Ezrin小干扰RNA（Ezrin-siRNA）转染阻断Ezrin蛋白表达，进一步确证BBR通过Ezrin抑制细胞伪足形成。结果MTT结果显示，BBR在5μM以上明显抑制CNE1增殖（P〈0．05），浓度（0—5）州对CNE1细胞生长增殖抑制作用不明显，为BBR对CNE1的细胞无毒性浓度（NCC）。BBR在NCC能明显抑制CNE1细胞phos-Ezfin表达，且呈浓度依赖性。光镜观察显示BBR对CNE1细胞迁移有明显的抑制作用。电镜观察结果显示，BBR抑制CNE1细胞伪足形成。结论BBR可能通过抑制Ezfin磷酸化而抑制鼻咽癌CNE1迁移。

细胞角蛋白20的表达与乳腺癌进展、转移及预后的相关性

目的:探讨细胞角蛋白20(CK20)在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌进展、转移和预后的相关性。方法:选取乳腺癌患者86例,以20例乳腺良性肿瘤组织作为对照,应用免疫组织化学染色方法检测CK20的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。结果:CK20在乳腺癌组织中的阳性表达率为80.23%(69/86),明显高于在乳腺良性肿瘤中的表达[20.00%(4/20),P<0.01]。CK20的表达与乳腺癌组织学分级(P<0.05)和病理类型(P<0.01)有关,与TNM分期(r=0.86,P<0.05)、淋巴结转移(r=0.73,P<0.05)和HER-2(r=0.69,P<0.05)呈正相关,与ER(r=-0.58,P<0.05)呈负相关。CK20阳性表达组和CK20阴性表达组的5年生存率分别为38.46%(25/65)和66.67%(10/15),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:CK20与乳腺癌的进展、转移有关,作为新的乳腺癌标记物,有一定的临床实际应用价值。

川崎病患儿血清肌钙蛋白Ⅰ和C-反应蛋白检测的意义

目的探讨川崎病(kawasaki disease,KD)患儿静脉注射免疫球蛋白前后心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)和C-反应蛋白(CRP)变化的临床意义。方法58例川崎病患儿,其中合并冠状动脉病变者12例,无冠状动脉病变者46例,于静脉注射丙种球蛋白前后采血测定血清肌钙蛋白I、C-反应蛋白。结果合并冠状动脉病变(CAL)组治疗前cTnI、CRP浓度值分别为(1.13±0.27)ng/mL和(66.63±17.13)mg/L,与其治疗后cTnI(0.93±0.08)ng/mL,CRP(59.58±13.97)mg/L比较差异无显著性(P>0.05);无冠状动脉损伤(NCAL)组治疗前cTnI、CRP浓度值分别为(0.66±0.23)ng/mL、(40.52±7.10)mg/L,与治疗后cTnI(0.15±0.16)ng/mL,CRP(17.85±4.43)mg/L比较差异有显著性(P<0.05)。川崎病患儿急性期血清肌钙蛋白I浓度与CRP呈正相关(r=0.731,P<0.01)。结论血清肌钙蛋白Ⅰ和C-反应蛋白检测可为川崎病合并冠状动脉病变的诊断提供重要参考,动态检测cTnI、CRP有助于KD静脉注射丙种球蛋白治疗效果及预后判断。

分子动态模拟及其在生物大分子研究中的应用

生物分子动态模拟技术是运用计算机对生物大分子的结构、功能、质子运动轨迹以及生物分子间的相互作用进行预测,是研究生物分子结构和功能的重要手段。该文介绍分子动态技术的原理及其在生命科学研究中的应用和研究进展,分析目前存在的问题,并提出对未来工作的展望。

蛋白质与蛋白质相互作用的研究进展

通过研究蛋白质与蛋白质的相互作用,人们能更好地注释蛋白质的功能,解码生命现象,特别是在新药物的设计上具有极大的实用价值,这是后基因组研究的重要任务之一。蛋白质结构的剖析、计算机分子模拟技术的发展和分子生物学技术更新为研究蛋白质间相互作用创造了各种有利条件。

血浆EB病毒DNA数量与鼻咽癌细胞凋亡的相关性分析

目的探讨血浆EBV-DNA数量与鼻咽癌细胞凋亡的关系。方法采用巢式荧光定量PCR,检测鼻咽癌患者血清EBV-DNA的拷贝数,TUNEL法检测鼻咽癌组织中癌细胞凋亡情况,分析EBV-DNA拷贝数与凋亡癌细胞的相关性。结果鼻咽癌患者血浆EBV-DNA检出率为96.4%(27/28),中位数为1 800 copies/μl(0～22 100 copies/μl)。28例鼻咽癌活检组织中癌细胞平均凋亡指数为30.0±18.0。EBV-DNA拷贝数与鼻咽癌细胞凋亡呈正相关(γ=0.927,P<0.05)。结论血浆EBV-DNA水平与鼻咽癌细胞凋亡呈正相关,鼻咽癌患者血浆EBV-DNA可能部分来源于凋亡的癌细胞。

鼻咽癌诊断和治疗的新标志物(英文)

目的采用代谢组学技术寻找鼻咽癌诊断和治疗的标志物。方法采用气-质联用(GS-MS)技术,检测了49例鼻咽癌患者(Ⅰ期19例,Ⅱ期17例,Ⅲ期13例),37例喉癌患者和40个健康人血清中52种内源性代谢物。结果代谢谱比较分析结果显示,犬氨酸、N-乙酰葡萄酰胺、硬脂酸、甘氨酸、N-乙酰半乳糖胺、N-乙酰葡萄胺和对羟基丙酮酸在鼻咽癌患者血清中显著升高(～3倍)(P<0.05),其中犬氨酸、N-乙酰葡萄酰胺、N-乙酰半乳糖胺、N-乙酰葡萄胺和对羟基丙酮酸在鼻咽癌Ⅰ到Ⅲ逐步升高(P<0.05),治疗后该5种内源性代谢物逐步降低,且恢复到正常水平(P<0.05)。其中4种代谢物犬氨酸、N-乙酰葡萄酰胺、N-乙酰葡萄胺和对羟基丙酮酸水平降低与鼻咽癌治疗后肿瘤减小率成正相关,因此其可作为鼻咽癌潜在标志物。此外,这4个代谢物还与鼻咽癌复发转移有关。结论犬氨酸、N-乙酰葡萄酰胺、N-乙酰葡萄胺和对羟基丙酮酸是鼻咽癌变和侵袭重要的代谢产物。

γ-IFN、ADA、β 2MG联合检测对结核性胸水的诊断价值

目的探讨胸水γ干扰素(interferon-γ,γ-IFN)、腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)及β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2MG)联合检测在结核性胸水鉴别诊断中的价值。方法γ-IFN检测采用酶联免疫吸附法(ELISA),ADA活力采用酶偶联速率法检测,β2MG采用免疫透射比浊法(ITA)检测;分别对40例结核性胸水和40例恶性胸水进引γ-IFN、ADA、β2MG含量检测。结果γ-IFN、ADA、β2MG在结核性胸水组中含量分别为(525.3±66.5)pg/mL、(63.8±20.5)IU/L、(4.05±0.85)mg/L明显高于恶性胸水组(65.2±36.5)pg/mL、(15.3±9.6)IU/L、(2.12±0.91)mg/L。结论联合检测γ-IFN、ADA、β2MG可显著提高结核性胸水鉴别诊断的灵敏度,具有重大临床参考价值。

系统性红斑狼疮患者血清IgE含量与疾病活动性关系

目的 :探讨活动期系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythematosus,SLE)患者血清总IgE含量变化与病患活动度性的关系。方法 :采用微粒子捕捉酶免疫分析 (MicroparticleEnzymeImmunoassay ,MEIA)测定活动期系统性红斑狼疮患者、稳定期和健康对照组血清中总IgE含量。结果 :6 0例活动期系统性红斑狼疮患者病人血清总IgE含量较稳定期和健康对照组明显增高 ,P <0 .0 1。结论

乳腺癌和癌旁组织中hK11的表达及其与临床病理学特征的相关性

目的:探讨人组织激肽释放酶11(hK11)在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理学特征的相关性.方法:采用SP免疫组织化学染色方法检测86例乳腺癌组织及癌旁5cm非恶性乳腺组织中hK11的表达情况,并分析其与乳腺癌组织临床病理学特征之间的关系.结果:hK11在乳腺癌细胞的细胞质中有表达,阳性率为76%(65/86);在癌旁非恶性乳腺组织腺泡上皮细胞以及导管上皮细胞的细胞质中表达,阳性率为19%(16/86).乳腺癌细胞表达阳性率与癌旁乳腺组织中上皮细胞表达的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01).hK11在乳腺癌组织中的表达与病理类型(P<0.01)、临床TNM分期(P<0.01)、腋窝淋巴结转移情况(P<0.05)、HER-2(P<0.05)有关,而与患者年龄、肿块大小、ER、PR及是否绝经无关.结论:hK11的表达可能在乳腺癌的发生、浸润、转移中起重要作用.

ICU多重耐药鲍曼不动杆菌血流感染的回顾性分析

目的:探讨重症监护病房(ICU)多重耐药鲍曼不动杆菌(Ab)血流感染的临床特点。方法:回顾性分析2012年1月至2015年3月收集的83例Ab血流感染患者的临床特点、危险因素,细菌耐药及预后。结果:83例患者中男60例(72.29%),女23例(27.71%),年龄为(46.23±19.22)岁;混合感染20例(24.10%),基础疾病种类3种以上共60例(72.29%);52例纳入病原菌同源性统计,下呼吸道的比例最高(29例),其次为导管11例,创面分泌物8例,脑脊液3例,腹水1例;危险因素有各类导管插管、严重的原发疾病,糖皮质激素的使用,手术及侵袭性操作等。Ab耐药性极高,以多重耐药菌为主,部分全耐药,对除头孢哌酮/舒巴坦及阿米卡星外的其他抗生素耐药率均大于80%。本组患者好转25例(30.12%),死亡55例(66.26%),治愈3例(3.62%)。结论:Ab耐药率高,病死率高,预后极差;对基础疾病严重的患者,应缩短住院时间,控制呼吸机和免疫抑制剂的使用;侵入性操作需严格执行消毒,减少血流感染的风险;避免抗生素滥用以减缓细菌耐药性增长。