超声频率对大米蛋白酶解物及其胃肠模拟消化产物ACE抑制活性的影响

研究不同的超声频率预处理对大米蛋白酶解产物及其胃肠道模拟消化产物的ACE抑制活性的影响,同时研究不同阶段大米蛋白酶解产物的多肽含量。研究表明,单频、双频顺序及双频同步超声虽然对大米蛋白的水解度均无显著影响(P>0.05),但是均可以显著提高酶解产物的ACE抑制活性(P<0.05)。单频超声20 kHz、双频顺序超声20/35 kHz及双频同步超声20/35 kHz对ACE抑制活性的影响最为明显,与对照组相比,分别增加了35.68%,66.24%和56.17%。双频超声对ACE抑制活性的提高幅度明显高于单频超声,且顺序超声优于同步超声。经胃模拟消化后,不同超声频率预处理均能显著提高蛋白酶解产物的ACE抑制活性。然而过肠模拟消化以后,与对照组相比,不同超声频率预处理对蛋白酶解产物的ACE抑制活性显著升高(P<0.05),然而与胃消化的结果相比则显著降低(P<0.05)。多肽含量测定结果表明,与对照相比,超声显著增加胃模拟消化后大米多肽的含量(P<0.05),而对于肠模拟消化后的大米蛋白含量显著降低(P<0.05)。结论:不同超声频率预处理均可促进大米蛋白酶解物及胃模拟消化后的ACE抑制活性;大米蛋白酶解产物经过胃消化后的多肽含量增加,而经过肠消化后的多肽含量反而降低;双频顺序超声效果优于双频同步超声,更优于单频超声。

大豆粕玉米黄粉发酵物对小鼠免疫功能的影响

目的:研究大豆粕玉米黄粉枯草芽孢杆菌发酵物对小鼠免疫功能的影响。方法:实验组以低、中、高剂量0.334、0.667和2 g/(kg·d)的大豆粕玉米黄粉枯草芽孢杆菌发酵物灌胃小鼠,对照组以等体积纯净水灌胃,30 d后进行二硝基氟苯诱导小鼠迟发性变态反应实验、Con A诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验、抗体生成细胞检测实验、血清溶血素测定实验、碳廓清实验和NK细胞活性测定实验。结果:大豆粕玉米黄粉枯草芽孢杆菌发酵物对小鼠的耳廓肿胀、脾淋巴细胞转化、血清溶血素水平、吞噬指数a和NK细胞活性都有显著影响(p<0.05),但是对小鼠脾抗体生成细胞量无显著影响(p>0.05)。结论:大豆粕玉米黄粉枯草芽孢杆菌发酵物具有增强免疫力的功能。

豆粕发酵物改善小鼠睡眠功效及其与天麻的协同作用

本文研究了大豆粕枯草芽孢杆菌发酵物、天麻及其两者的混合物对改善小鼠睡眠功效的影响。以2.5 g/kg·BW·d剂量的豆粕发酵物、天麻和其两者1∶1混合物每日灌胃ICR小鼠,对照组灌胃等体积蒸馏水,14d后进行直接睡眠试验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验、巴比妥钠睡眠潜伏期试验和延长戊巴比妥钠睡眠时间试验,同时记录小鼠体重和脏器指数,用于观察小鼠及其脏器健康程度。试验结果表明,豆粕发酵物、天麻和豆粕发酵物-天麻混合物均有增加小鼠入睡率(P<0.05)的作用,灌胃单一的豆粕发酵物没有明显缩短小鼠睡眠潜伏期的作用,灌胃单一天麻也没有明显延长小鼠睡眠时间的作用。然而,豆粕发酵物与天麻的混合物不仅能显著缩短小鼠睡眠潜伏期(P<0.05),还能显著延长小鼠睡眠时间(P<0.01),说明豆粕发酵物具有改善小鼠睡眠功效,并与天麻具有协同作用。

酶解法制备菜籽多肽的工艺研究

本文以菜籽粕为原料,酸处理将菜籽粕脱毒后,采用碱溶酸沉法提纯菜籽蛋白,再用碱性蛋白酶酶解菜籽蛋白制备菜籽多肽,采用单因素逐级优化试验设计,以酶解液中菜籽多肽的含量为指标优化酶解工艺参数。结果表明:酸处理后的硫甙含量下降了84.32%,碱溶酸沉后,蛋白的提取率为76.25%。单因素逐级优化试验的结果表明:碱性蛋白酶酶解的最适条件为底物浓度4%、加酶量7%(E/S)、温度50℃、p H 8.5、酶解时间120 min,该条件下多肽含量为(35.4±0.11)mg/m L。

玛咖多糖提取过程的原位实时监测技术研究

研究超声辅助提取玛咖多糖及检测过程中提取液的多糖含量,同时应用近红外原位实时采集提取过程的光谱信息,通过光谱信息与多糖含量化学值之间的关系建立数学模型,从而达到实时监测提取过程中玛咖多糖的目的。研究结果表明,超声提取60 min内,多糖含量不断增加,随后增加缓慢并出现波动增长的趋势。对采集的原始光谱预处理,SG是最为有效地预处理方法,Rc和Rp最高,RMSECV和RMSEP数值最小。采用PLS、iPLS和si-PLS方法建立模型后,si-PLS所建立的模型最佳,联合4个最优的波长区间为:1 258.591~1 316.735 nm,2 027.121~2 084.226 nm,2 153.93~2 210.888 nm和2 337.239~2 387.696 nm,模型的Rc、Rp分别为0.9621,0.9667;RMSECV、RMSEP分别为0.0116,0.0137。结论:采用近红外光谱可较好的预测超声提取玛咖多糖过程中提取液中的多糖含量,实现提取过程中的原位监测。

超声功率对胰蛋白酶的酶活性与结构变化的影响

为研究超声功率引起胰蛋白酶的结构变化与酶活力之间的关系,研究了不同的超声功率对胰蛋白酶活力、热稳定性、酶解反应动力学和热力学参数的影响,并采用紫外光谱、傅立叶变换红外光谱和荧光光谱来分析超声功率对胰蛋白酶结构的影响。结果表明:除功率300,350W外,胰蛋白酶活性与对照相比有显著提高。80℃处理时,在功率300,350W时的胰蛋白酶热稳定性有显著性提升。20℃酶解时75W处理的胰蛋白酶的反应速率最快。200W处理时胰蛋白酶的表观活化能最小,150,200W处理时胰蛋白酶的活化焓和活化熵与对照相比显著降低,75~250W处理时胰蛋白酶的吉布斯自由能与对照相比无明显差异。光谱分析表明,超声功率不改变胰蛋白酶的肽键含量,然而显著改变其二级结构。超声功率诱导胰蛋白酶变性过程中,在200W出现1个中间体,且中间体状态的胰蛋白酶的有序性高,具有高酶活和反应速率。

玉米多肽制备方法及其功能活性研究进展

玉米蛋白粉是玉米湿磨生产淀粉中的主要副产品,其低水溶性、必需氨基酸缺陷等因素限制了其在食品工业中的应用。水解玉米蛋白粉制备玉米多肽是其高附加值利用方式之一,可以极大提高玉米蛋白粉的功能性和生物活性。本文重点介绍了玉米多肽的主要制备方法以及玉米多肽在抗氧化、抗血糖、抗高血压、醒酒护肝等方面的生物学功能,归纳总结了现有研究存在的问题及未来的发展前景,对食品企业高效利用玉米蛋白粉开发生物活性肽、提升行业经济效益具有重要意义。

脱毒菜籽多肽大鼠降血压试验及机理研究

研究了脱毒菜籽多肽一次性灌胃对原发性高血压大鼠(SHR)的降血压效果。分别对空白对照组、卡托普利阳性对照组、脱毒菜籽多肽组和脱毒菜籽蛋白组的大鼠进行一次性灌胃和30d灌胃实验,通过测定大鼠收缩压(SBP)和舒张压(DBP)变化、大鼠脏器组织ACE酶活及血清中相关生化指标含量,探究脱毒菜籽多肽的降压效果、作用器官及其降压机理。试验结果表明:一次性灌胃脱毒菜籽多肽4~12h大鼠SBP都有显著降低(P<0.05),最大降幅24.4mmHg出现在灌胃6h后,对DBP仅在灌胃4~8h时降低效果显著(P<0.05),30d灌胃实验中血压测定于灌胃前,灌胃脱毒菜籽多肽1周能显著降低大鼠SBP和DBP(P<0.05),第4周出现最大降幅13.3mmHg。脱毒菜籽多肽灌胃后主要作用于SHR的肺、肾和动脉抑制其ACE酶活。血清指标测定进一步表明脱毒菜籽多肽主要通过降低内皮素、肾素、血管紧张素II含量,提高NO、eNOS含量发挥降压功效。

脱毒菜籽多肽对小鼠免疫功能的影响

[目的]研究脱毒菜籽多肽对小鼠免疫功能的影响。[方法]试验组以低、中、高剂量组0.334、0.667和2.000 g/(kg·d)的脱毒菜籽多肽灌胃小鼠,对照组以等体积纯净水灌胃,30 d后进行二硝基氟苯诱导小鼠迟发性变态反应试验、Con A诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验、抗体生成细胞检测和血清溶血素测定试验、小鼠碳廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、NK细胞活性测定试验、试验前后小鼠体重以及脏器/体重比值试验。[结果]脱毒菜籽多肽对小鼠的耳廓肿胀、脾淋巴细胞转化、吞噬指数a和NK细胞活性均有显著影响,但对小鼠体重增长、胸腺/体重比值、脾脏/体重比值、脾抗体生成细胞量、血清溶血素水平和腹腔巨噬细胞吞噬能力均无影响。[结论]脱毒菜籽多肽具有增强免疫力的功能。

大米蛋白酶解产物的血管紧张素转化酶抑制活性及其分子质量分布

本文采用碱性蛋白酶酶解大米蛋白,研究了不同时间酶解产物的血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性,大米蛋白水解度,酶解产物中蛋白质含量及多肽分子质量分布与酶解产物ACE抑制活性的关系。结果表明:大米蛋白的水解度在15 min内呈现线性增长,60 min后逐渐趋于平缓;75 min酶解产物的ACE抑制率最高(63.27%),但与60、90 min的ACE抑制率无显著差异(P>0.05);酸溶蛋白和总蛋白含量随着酶解时间的延长,均呈现上升的趋势;多肽分子质量分布在200~1000 Da的比例最高。

脱毒菜籽多肽对大鼠的亚慢性毒性研究

[目的]通过对大鼠的90 d喂养试验,评价脱毒菜籽多肽的食用安全性。[方法]将动物随机分为4组,分别为低、中、高剂量组和对照组。试验组分别在基础饲料中添加1.65、3.30和6.60 g/kg脱毒菜籽多肽,按80 g/kg的日摄入量以自由采食的方式喂养大鼠90 d,观察脱毒菜籽多肽对大鼠体重、进食量、食物利用率、血清学、脏器系数以及组织病理学等指标的影响。[结果]与对照组相比,各剂量组大鼠体重、进食量、食物利用率、脏器绝对重量和脏体比均无显著差异(P>0.05),大鼠血液学指标检测值、生化指标检测值均在正常范围内;高剂量组各大鼠脏器均未出现明显的组织病理变化。[结论]脱毒菜籽多肽对大鼠的生长发育、血浆、生化功能及脏体比等指标均未见不良影响。

脱毒菜籽多肽毒理学试验研究

本文对脱毒菜籽多肽的毒理学进行了研究,通过小鼠急性经口毒性试验、鼠伤寒沙门菌/哺乳动物微粒体酶试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验评价菜籽多肽的食用安全性。结果表明,脱毒菜籽多肽对雌雄两种性别的小鼠经口最大耐受剂量均大于15 g/kg·BW,按照急性毒性分级标准规定,该受试物属无毒级;与对照组比较,喂食脱毒菜籽多肽的小鼠经3项遗传毒性试验检测,结果显示均为阴性,表明脱毒菜籽多肽无急性毒性、无诱变活性和致突变作用。脱毒菜籽多肽具有良好的食用安全性,可以作为一种保健食品原料进行开发、利用。

可溶化结合超声预处理对酪蛋白酶解产物ACE抑制活性的影响

本文研究了可溶化、超声及可溶化结合超声预处理对酪蛋白碱性蛋白酶及产物ACE抑制活性的影响,并测定不同预处理方式下的酪蛋白酶解终点的多肽含量及氨基酸组成。试验结果表明,与对照组相比,3种预处理方式均能显著提高(P<0.05)相同水解度条件下酶解产物的ACE抑制活性,缩短酶解时间,改变酶解终点,其中可溶化结合超声预处理方式效果最显著。通过酶解终点多肽含量及氨基酸组成结果的分析可知,3种预处理均可以提高酶解终点酶解液中的多肽含量,相比于对照组,其分别提高了17.54%,20.89%和32.09%。3种预处理方式均提高了酶解液中疏水性氨基酸的含量。结论:可溶化、超声及可溶化结合超声预处理均可通过提高酶解液的多肽含量及疏水性氨基酸含量来提高酶解产物的ACE抑制活性,同时可缩短酶解时间,改变酶解终点。其中,可溶化结合超声是最有效的预处理方式。

酪蛋白酶解反应过程的近红外光谱在线监测技术研究

本文研究了酪蛋白酶解过程中水解度、酶解液及其胃、肠模拟消化产物的ACE抑制率的变化。采用近红外光谱在线监测技术采集酶解过程的光谱信息,通过光谱信息与化学值之间的关系建立数学模型。结果表明,酪蛋白的水解度和酶解液的ACE抑制率均随着酶解时间的延长逐渐增加,酶解液经胃、肠模拟消化后的ACE抑制率显著升高。采用偏最小二乘算法、区间偏最小二乘法和联合区间偏最小二乘法建立光谱信息与酶解过程中的化学值建立定量模型。结果表明,联合区间偏最小二乘法可良好预测酪蛋白酶解过程的关键参数,且模型稳定性良好。结论:采用近红外光谱技术可实现酪蛋白酶解反应过程的在线监测,预测酪蛋白的水解度、酪蛋白酶解液及其胃肠模拟消化产物的ACE抑制活性。

盐酸曲美他嗪缓释片在Beagle犬体内药代动力学研究

文章建立了一种测定盐酸曲美他嗪血药浓度的HPLC定量分析方法,并研究盐酸曲美他嗪缓释片Beagle犬体内药代动力学特征。以盐酸利多卡因为内标,血浆样品前处理以乙酸乙酯萃取,采用高效液相色谱法(HPLC),流动相为磷酸二氢钾水溶液(pH 3.0)∶甲醇=85∶15(V/V),体积流量为1.0 mL/min;进样量为10μL;检测器为紫外检测器(波长230 mm)。结果显示:犬血浆中曲美他嗪的线性范围为100.9~4036.0μg/L,相关系数(r)为0.9998;日内和日间精密度(RSD)介于2.58%~9.27%之间。盐酸曲美他嗪经Beagle犬口服后,受试制剂与参比制剂相比,半衰期、达峰时间、达峰浓度均无显著性差异。结论:该方法专属性好,灵敏度高,准确度好、提取回收率高和稳定性好,可用于盐酸曲美他嗪缓释片药代动力学研究和生物等效性评价。

超声波预处理对大米蛋白酶解产物ACE抑制率的影响

研究了大米蛋白经三频平板式超声波设备预处理对碱性蛋白酶酶解后的大米多肽血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性的影响。分别采用紫外可见分光光谱仪、傅里叶变换红外光谱仪、荧光分光光度计对超声的大米蛋白进行了测定,探讨超声影响酶解产物活性的机制。结果表明,所有的频率组合均可显著提高大米蛋白酶解产物的ACE抑制活性,尤其是20,35,50 kHz顺序超声。通过超声后大米蛋白的紫外光谱,红外光谱,表面疏水性的变化表明:超声能改变蛋白的紫外吸收峰,降低蛋白二级结构中α-螺旋和β-转角的含量,同时提高β-折叠的含量。通过蛋白表面疏水性可知,超声能显著提高大米蛋白的表面疏水性,影响蛋白的结构,使碱性蛋白酶容易与酶切位点结合,从而影响蛋白酶解产物的ACE抑制活性。

马铃薯渣枯草芽孢杆菌发酵物毒理学研究

为探究马铃薯渣枯草芽孢杆菌发酵物的毒理学特性,以小鼠为研究对象,通过经口急性毒性试验、鼠伤寒沙门菌/哺乳动物微粒体酶试验、骨髓细胞微核试验和睾丸染色体畸变试验,评价马铃薯渣枯草芽孢杆菌发酵物的食用安全性。结果表明:马铃薯渣枯草芽孢杆菌发酵物对雌雄小鼠的经口最大耐受剂量均大于15g·kg-1(BW),按急性毒性分级标准,这一发酵物为无毒级;与对照相比,喂食马铃薯渣枯草芽孢杆菌发酵物的小鼠经3项遗传毒性试验检测,结果均为阴性,说明马铃薯渣枯草芽孢杆菌发酵物无急性毒性、无诱变活性和致突变作用。这一研究提示马铃薯渣枯草芽孢杆菌发酵物属于无毒级。