中华圆田螺形态性状对体质量的影响

为探究中华圆田螺(Cipangopaludina cathayensis)形态性状与体质量的关系,采集中华圆田螺共505只,并对其壳宽(Z_(1))、壳高(Z_(2))、壳口高(Z_(3))、壳口宽(Z_(4))、体螺层高(Z_(5))、螺旋部高(Z_(6))、倒数第二螺层宽(Z_(7))、倒数第二螺层高(Z_(8))和体质量(W)等9个体尺性状进行测量,通过统计分析、相关性分析、通径分析和回归分析,确定中华圆田螺对体质量影响较大的主要形态性状,并建立回归方程。结果显示,中华圆田螺体质量的变异系数为59.61%,其选育潜力较大;壳宽、壳高、体螺层高和倒数第二螺层宽与体质量的相关系数均较高(≥0.949)。通径分析和岭回归分析均表明,壳高对体质量直接作用最大(0.963,0.152),直接决定系数最高(0.927),其他性状与壳高对体质量的共同决定系数均较高,总决定系数达1.117。建立中华圆田螺体质量与各主要影响性状的最优多元回归方程:W=-24.346+0.214Z_(1)+0.148Z_(2)+0.123Z_(3)+0.306Z_(4)+0.188Z_(5)+0.083Z_(6)+0.383Z_(7)+0.882Z_(8),决定系数(R2)=0.943。回归方程的方差分析显示,其回归关系达到极显著水平(P<0.01)。综上,壳高是影响中华圆田螺体质量的最主要性状。

全州禾花鲤鳞片下层组织的结构及全长转录组分析

为研究全州禾花鲤(Cyprinus carpio var.Quanzhounensis)皮肤组织结构和转录组差异、丰富鲤鱼皮肤转录组信息,选用建鲤(Cyprinus carpio var.Jian)和全州禾花鲤鳞片下层组织,利用透射电镜观察结构差异,发现禾花鲤与建鲤相比组织缺乏层叠排列的鸟嘌呤结晶且黑色素颗粒增多;利用牛津纳米孔(ONT)测序技术分析了转录组特征,获得高质量数据18.49Gb,识别为全长序列17182183条,检测出可变剪接(AS)事件3075个、可变多聚腺苷酸化(APA)57624个,预测新基因编码区序列15615个、长链非编码RNA(lncRNA)771个。其中,可变剪接事件中外显子跳跃、内含子保留数量在种间差异极显著(P<0.01),具有5个多聚腺苷酸化位点的转录本数量在种间差异极显著(P<0.01),表明可变剪接和多聚腺苷酸化参与性状形成相关的调控过程;共筛选出差异表达转录本841个,KEGG通路分析表明其在细胞外基质–受体相互作用、粘着斑等通路富集,GO分析发现其在细胞外隙、转录因子复合体、整合素复合物等词条显著富集,且最显著富集的KEGG通路和GO词条均与细胞外基质紧密关联,推测这些转录调控的变化可能导致皮肤细胞外基质的组成、密度和构象变化。后续研究应更多关注鸟嘌呤结晶缺失造成的皮肤性状变化,有助于全州禾花鲤种质资源开发与利用。

光合细菌在水产养殖上的应用

光合细菌是一种能进行光合作用的水生微生物,广泛分布于水田、坑塘、湖沼、江河、海洋、活性污泥和土壤中,特别喜欢含有机质丰富的污染水体。它在不同来源的有机废水处理、家禽饲养、水产养殖、农作物种植和园艺等活动的增产增质方面均起到明显作用,同时在摄取食用色素、食品和医药中也将有更广泛的用途。

八种品系罗非鱼及其尼奥罗非鱼耐寒性能的比较试验

比较不同罗非鱼品系的耐寒性能,为耐寒罗非鱼品种的选育提供育种材料及理论支撑。通过室内人工低温胁迫的方式,对8个品系罗非鱼和15个尼奥杂交罗非鱼品种进行耐寒能力的测定,比较分析它们的耐寒性能。试验发现3个品系奥利亚罗非鱼的半数死亡温度分别为:美国品系奥利亚罗非鱼7.82℃,夏奥1号8.22℃,广东品系8.44℃,死亡率分别为56.76%,62.25%,79.43%;5个品系尼罗罗非鱼中,美国品系、埃及品系、广东品系、泰国品系和吉富品系半数死亡温度分别为8.86,9.39,9.30,9.57,10.13℃,死亡率分别为70.43%,56.43%,67.24%,83.54%,91.66%;15种尼奥杂交配套系组合罗非鱼中,以埃及品系尼罗罗非鱼为母本,美国品系奥利亚罗非鱼为父本的杂交鱼的耐寒能力最强,其半致死温度为8.22℃,死亡率为51.06%。对各品种及品种间的半致死温度和死亡率进行相关分析,结果显示各品种的半致死温度和死亡率相关性极显著。尼奥罗非鱼耐寒性能与亲本高度相关,其耐寒能力可能通过细胞质遗传,加强对母本的筛选可获得更快的遗传进展。经过耐寒性能的比较,确定以埃及品系尼罗罗非鱼与美国品系奥利亚罗非鱼为尼奥罗非鱼杂交的耐寒育种材料。

尼奥罗非鱼杂交配套系耐寒和生长性能的选育

以埃及品系尼罗罗非鱼家系的雌鱼作为母本,美国品系奥利亚罗非鱼家系的雄鱼作为父本进行杂交配对。通过耐寒与生长性能评价及低温选育,筛选获得亲本后,以巢式配对的方法(雌雄比例3∶1)配对尼奥罗非鱼杂交家系,获得F1代家系36个。耐寒和生长性能结果表明,F1代31个尼奥家系平均半致死温度为7.45°C,比自然种群降低8.81%,平均相对存活率提高17.6%,平均生长速度提高13.2%。获得综合性能优秀的F1代耐寒型尼奥罗非鱼杂交配套系组合2个(F1CT0401、F1CT0203),其平均半致死温度分别为7.02和7.24°C,低温死亡率分别为40.50%和49.5%,比自然种群杂交尼奥罗非鱼降低17.4%和11.35%,相对死亡率降低30.0%和26.9%,产量分别提高12.9%和38.7%。示范养殖F1代耐寒型尼奥罗非鱼成活率为(84.39±6.65)%,平均产量(1 220.20±94.77)kg/667m2,平均规格(723.0±101.2)g;与对照组相比,示范池塘的耐寒型尼奥罗非鱼越冬死亡率降低了19.11%(P<0.05),平均每667m2产量提高了36.59%(P<0.05)。耐寒和生长性能比自然种群有了大幅提高。

早春罗非鱼苗暴发车轮虫病、三代虫病的防治

车轮虫和三代虫是一类常见的鱼类体外寄生虫,常感染不同种类、不同规格鱼类,造成大批量鱼死亡,给养殖户带来巨大经济损失。2010年3月至4月期间,笔者在培育早春罗非鱼鱼苗时就曾遭遇到车轮虫和三代虫侵袭,现将该病治疗情况介绍如下,以供参考。

奥尼杂交罗非鱼及其亲本热休克蛋白Hsp70基因cDNA序列克隆与比较分析

为探讨杂交罗非鱼抗应激遗传能力及其与亲本之间关系,采用RT-PCR方法克隆了奥尼杂交罗非鱼及其亲本热休克蛋白Hsp70基因完整编码区(code sequences,CDS)的cDNA序列。序列分析结果表明:杂交奥尼罗非鱼及其父本奥利亚罗非鱼和母本尼罗罗非鱼热休克蛋白Hsp70基因CDS均为1923bp,编码640个氨基酸,含有84个碱性氨基酸,95个酸性氨基酸,理论等电点为5.462。通过antheprot分析发现Hsp70家族的3个签名序列分别为IDLGTTYS,IFDLGGGTFD,VVLVGGSTRIPKIQK,核定位信号标签:KRKHKKDISQNKRALRR,Dank特征基序DLGTT-S-V,胞质Hsp70特征基序EEVD,靠近C端的GGMP4肽序列,另有2个糖基化位点NKSI和NVSA。奥尼杂交罗非鱼与其亲本Hsp70的序列比对发现,奥尼杂交罗非鱼Hsp70的核苷酸(100%)和氨基酸序列(99.8%)与父本奥利亚罗非鱼基本一致,与母本尼罗罗非鱼有2个氨基酸不同,5个核苷酸突变位点;与母本尼罗罗非鱼、莫桑比克罗非鱼、青鳉、牙鲆氨基酸序列同源性分别为99.5%、99.4%、93.1%、83.9%。系统发育树分析表明奥尼杂交罗非鱼与父本奥利亚罗非鱼距离最近,与母本尼罗罗非鱼距离远,该结果与传统杂交罗非鱼偏父本遗传结论相符。

奥尼单性罗非鱼苗池塘繁育技术

一、越冬管理 1．越冬塘的选择及越冬棚的搭建 越冬塘应选择水温稳定在18℃以上并且有泉水的地方，池塘面积一般在4～6亩，池深1．5～2米，有完整的排水系统，形状呈长方形，长宽比例为2：1，每只塘配备1～2台增氧机。

两种养殖模式下全州禾花鲤4种风味物质的差异性分析

为研究池塘和稻田养殖模式对全州禾花鲤(Cyprinus carpio var. Quanzhounensis)风味物质的影响,采用顶空固相微萃取法检测全州禾花鲤肌肉和肝胰腺中的E-2-壬烯醛、2-甲基异茨醇(2-MIB)和土臭素(GSM)的含量,以及利用高效液相色谱串联质谱仪检测次黄嘌呤核苷酸(IMP)的含量,并进行比较分析。结果显示,在土腥味物质方面,稻田养殖模式下禾花鲤肌肉的2-MIB和GSM含量极显著高于池塘养殖模式,肝胰腺的E-2-壬烯醛和GSM含量极显著高于池塘养殖模式(P<0.01);在鲜味物质方面,稻田养殖模式下禾花鲤肌肉的IMP含量极显著高于池塘养殖模式(P<0.01),肝胰腺的IMP含量不存在显著差异(P>0.05)。综上所述,稻田养殖的全州禾花鲤鲜味更高,但土腥味更重;池塘养殖的全州禾花鲤土腥味淡,但鲜味不浓。

全州禾花鲤皮肤转录组特征分析

为探究全州禾花鲤乌褐色、半透明的经济体色性状,发掘全州禾花鲤的皮肤基因信息,以全州禾花鲤的皮肤组织为研究对象,利用高通量测序技术进行转录组比较分析。结果显示,全州禾花鲤和建鲤(对照)的皮肤组织转录组测序获得37066778~58708166条clean reads,Q30在94.96%以上,GC碱基比例在51.00%左右;发现新基因10537个,检测出单核苷酸多态性(SNP)位点1278906个、插入缺失(InDel)位点80238个。筛选显著差异基因11717个,其中上调基因5133个,下调基因6584个。GO注释到56个二级分类,显著富集的GO条目127个,主要集中在生物学过程和细胞组分;KEGG分析获得显著富集通路60个;网络分析结果显示,以代谢途径(Metabolic pathways)、p53信号通路(p53 signaling pathway)和细胞周期(Cell cycle)通路作为网络核心,与众多KEGG通路关联且相对独立。

环棱螺池塘吊养深度初探

环棱螺也叫石螺、螺蛳,属于田螺科的一种软体动物,主要栖息在水田、河沟、湖泊或水库等区域,以有机碎屑、藻类等为食。环棱螺肉质鲜美,营养丰富,在我国作为美食而广受欢迎,而且作为柳州螺蛳粉的主要原料之一,市场需求量很大(闻海波等,2021)。随着环棱螺越来越受关注,相关的研究也日益深入。目前,环棱螺的研究主要在群体遗传学(金武等,2022;顾钱洪,2013)、生物学特性(Huang S等,2020)以及对水质环境的修复(马本贺等,2022;王雪飞等,2021)等方面。

吉富罗非鱼HSP70基因的多态性及其与耐寒性状的相关性研究

利用PCR-SSCP技术对吉富罗非鱼HSP70基因多态性进行检测,并采用最小二乘法分析多态性与罗非鱼Oreochromis niloticus耐寒性状的相关性。结果发现,依据HSP70基因序列设计的引物HP70-1、HP70-4、HP70-6不同耐寒能力样本中的电泳图具有带型多态性,且该基因多态性与其耐寒性状显著相关。据此推断HSP70基因是潜在的罗非鱼耐寒相关基因。

两种罗非鱼的耐寒性能比较

本文采用人工室内垂直降温模式对尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼进行不同降温速度的低温胁迫实验,计算出实验鱼的半致死低温与低温胁迫死亡水温范围,计算不同温度下实验鱼的死亡率,得出致死低温范围,讨论持续性低温的伤害。另外,通过双变量Logistic模型拟合降温速度、降温时间和死亡率关系的三维曲面,分别计算2种罗非鱼的冷伤害上限温度(ULCIZ)和半致死伤害积温(SIT)。结果表明,尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼的ULCIZ分别为15.44℃和15.00℃、SIT分别为-0.0389h·℃和-0.1044h·℃,说明奥利亚罗非鱼群体的耐寒能力较尼罗罗非鱼群体的强,尼罗罗非鱼耐寒性能有待进一步选育提高。

低温胁迫对罗非鱼生理生化指标的影响

为研究低温胁迫对尼罗罗非鱼血液生理生化指标的影响,进行了不同温度下尼罗罗非鱼血液生化指标的影响试验。研究发现:⑴在外界环境温度从28℃降至16℃时,罗非鱼血液中的谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、葡萄糖(GLU)含量均有下降或显著下降;但当温度继续降至10℃时,这些指标均显著上升,恢复或超过常温下的水平。⑵血红蛋白浓度(HGB)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)和平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)3个指标均明显升高。相对于16℃组,12℃组的红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)显著下降;但相对于28℃组,10℃组RDW-CV的变化不显著。相对于16℃或12℃组,10℃组的平均血小板体积(MPV)和血小板比率(P-LCR)均显著升高,但是10℃组与28℃组间差异均不显著。⑶相关分析结果表明,HGB、MCH、MCHC与胁迫温度显著相关,平均红细胞压积(MCV)与水温呈正相关,其中MCV和MCHC两个指标呈极显著负相关。HGB、MCH、MCHC和MCV可作为低温胁迫的生理指标。

基于线粒体D-loop区和COI基因序列研究2个禾花鲤群体和野生鲤群体的遗传多样性与系统进化关系

利用线粒体D-loop区和COI基因序列分析了全州禾花鲤(Quanzhou Procypris merus)、融水禾花鲤(Rongshui P.merus)和野生鲤鱼群体的遗传多样性和系统进化关系。基于D-loop区序列分析结果表明:序列长度为927~930 bp,共统计变异位点53个;A、T、G、C核苷酸平均含量分别为33.4%、32.9%、14%和19.7%,A+T(66.3%)明显高于G+C(33.7%);总体的单倍型数(h)、单倍型多样性(Hd)和核苷酸多样性(π)分别为40个、0.95和0.0083;遗传分化指数(Fst)为0.22459。基于COI基因序列分析结果显示:序列长度为897~899 bp,共统计变异位点33个;A、T、G、C核苷酸平均含量分别为26.7%、28.5%、17.8%和27%,且A+T(55.2%)高于G+C(44.8%);总体的h为25个,Hd为0.91,π为0.00316;Fst值为0.19143。在3个群体内和群体间遗传距离分别在0.003~0.009和0.003~0.01,远小于种群分类水平0.05。分子方差分析(AMOVA)结果表明,77.54%(D-loop)和80.86%(COI)变异来自群体间变异,22.46%(D-loop)和19.14%(COI)来自群体内变异。单倍型进化树和网络图显示,全州禾花鲤和野鲤群体均存在单独聚为一支的单倍型,而融水群体未出现单独成支现象。研究表明,线粒体D-loop区作为反映3个群体间遗传多样性的灵敏度要高于COI基因,并且3个群体均属于高单倍型多样性和高核苷酸多样性。综上,3个群体间出现了较为明显的分化现象。

吉富罗非鱼生长模型研究

采用Von Bertalanffy生长方程(VB GF)、逻辑斯谛生长方程(Logistic GF)、Gompertz生长方程(Gompertz GF)和灰色动态生长方程(GD GF)等4种常用动物生长模型对网箱养殖的吉富品系尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的生长进行拟合,根据各模型拟合残差平方和的大小判断拟合程度。结果表明:VB GF生长模型对体重生长的拟合效果最好,而Gompertz GF生长模型对吉富罗非鱼体长生长的拟合效果最好。从实际拟合结果综合评价来看,VB GF生长方程最好,体长、体重生长方程分别为Lt=39.008(1-1.005e-0.08t),R2=0.993;Wt=1514.50(1-1.025e-0.101t)3,R2=0.999,体重生长拐点为11.13月龄,相应的体长为22.92 cm,体重为448.74 g。吉富罗非鱼生长模型可以用于描述罗非鱼生长过程,反映机体生长发育规律,可为罗非鱼规模化养殖和选育工作提供参考。

中国圆田螺肌肉营养成分及消化酶活力比较分析

为探究不同生长阶段中国圆田螺(Cipangopaludina chinensis)的肌肉营养价值和消化能力,分别对中国圆田螺幼螺和成螺的肌肉一般营养成分、氨基酸含量和消化酶进行测定。营养成分结果显示,成螺粗蛋白和灰分含量高于幼螺,幼螺水分和粗脂肪含量高于成螺;氨基酸评分(AAS)和化学评分(CS)结果显示,中国圆田螺的第一限制氨基酸为蛋氨酸+半胱氨酸,成螺必需氨基酸指数(EAAI)、氨基酸总量(TAA)、必需氨基酸总量(EAA)、支链氨基酸(BCAA)、非必需氨基酸(NEAA)和呈味氨基酸(FAA)均高于幼螺。消化酶活力结果显示:在胃、肠、肝胰脏中的α-淀粉酶活力和纤维素酶活力均为幼螺高于成螺;在肠、肝胰脏中的β-淀粉酶活力均为幼螺高于成螺,而在胃组织中则成螺高于幼螺,且在成螺和幼螺组织中两种淀粉酶活力均表现为肝胰脏>胃>肠,纤维素酶活力表现为胃>肝胰脏>肠;胃蛋白酶活力在三个组织中均为成螺高于幼螺,且在成螺和幼螺组织中均表现为肠>肝胰脏>胃。结果表明,中国圆田螺成螺蛋白质营养价值比幼螺更高,在幼螺阶段可能对淀粉和纤维物质的消化能力较强,对蛋白的消化能力较弱;而在成螺生长阶段则截然相反。

埃及品系尼罗罗非鱼三个世代耐寒性能的选育

采用闭锁群体继代选育法,以埃及品系尼罗罗非鱼的自然种群作为选育种群进行自繁,通过耐寒与生长性能评价及低温选育,获得埃及品系尼罗基础群和核心群各1个,基础群1 180尾,选留率30.50%;P0代核心群292尾,雌雄比例为1∶1,选留率16.48%;P1代核心群均由10个家系组成,每个家系选留80～100尾,选留率25%左右,核心群的个体在400尾左右。在核心群选育的基础上,应用巢式配对的方法配对P1代家系283个,产苗家系137个,配对成功率48.41%,产苗135 550尾;配对P2代家系91个,产苗家系42个,配对成功率46.13%,产苗30 400尾。选留的10个家系耐寒和生长性能结果表明,P1和P2代的平均半致死温度分别为8.07°C和7.75°C,比自然种群低7.88%和13.98%,平均相对存活率分别提高21.52%和26.35%,平均生长速度提高9.77%和18.90%;其中P1和P2代耐寒性能最好家系的半致死温度分别比自然种群降低9.13%和18.98%,平均相对存活率提高25.29%和30.34%,生长速度提高15.87%和33.00%。埃及品系尼罗罗非鱼耐寒选育P1、P2代的所有家系和核心群的耐寒和生长性能均高于自然种群。

全州禾花鲤色素细胞组成、分布及色素含量观测

采用显微镜、苏木精-伊红染色观察法和酶联免疫分析法,研究全州禾花鲤Cyprinus carpio不同部位皮肤、鳞片以及背鳍色素细胞的组成、分布、形态特征及色素含量,结果显示:全州禾花鲤背部呈乌褐色,腹部呈白色半透明,鳃盖透明可见鳃丝;鳞片中的色素细胞主要包括黑色素细胞、黄色素细胞以及少数红色素细胞,与建鲤Cyprinus carpio var.Jian相比不含鸟嘌呤结晶。背部皮肤中包含黑色素细胞、黄色素细胞和红色素细胞;腹部皮肤仅含有少量的黄色素细胞和红色素细胞,无黑色素细胞。鳍条中以黑色素细胞和黄色素细胞为主。皮肤切片染色观察显示,全州禾花鲤皮肤下无虹彩细胞带,皮肤中的黑色素和叶黄素含量分别为10.10 ng/L和1.53 mg/kg,分别比建鲤高39.70%(P<0.01)和低71.29%(P<0.05)。研究结果为进一步揭示全州禾花鲤特殊体色性状形成的分子机制和良种选育提供资料。

山豆根多糖对人工感染罗非鱼链球菌病的预防效果

试验研究山豆根多糖(SSP)对罗非鱼链球菌病的预防效果。从形态学、生化鉴定和双重PCR鉴定无乳链球菌GX107,测定LD_(50)。将罗非鱼分为6组(0.1%SSP、0.2%SSP、0.4%SSP、0.4%APS、无乳链球菌感染组、空白对照组),每组4个重复,每个重复20尾鱼。试验组饲喂混有不同剂量(0.1%、0.2%、0.4%)SSP的饲料,黄芪多糖(APS)对照组饲喂含0.4%黄芪多糖的饲料,无乳链球菌感染组和空白对照组投喂基础饲料。试验组和感染组以10倍的LD_(50)浓度的无乳链球菌GX107腹腔注射,空白对照组注射等量生理盐水,计算各组保护率和死亡率。结果显示,该菌在BA血平板上,出现β溶血环,在BHIA培养基上出现灰白或白色湿润凸起菌落,过氧化氢酶试验为阳性,双重PCR鉴定为无乳链球菌。感染无乳链球菌的罗非鱼肝脏、脾脏、肾脏、胆不同程度地水肿,LD_(50)为6.61×10^(5)CFU/mL。10倍LD_(50)浓度的无乳链球菌感染罗非鱼,死亡率为85.71%,添加SSP可极显著降低死亡率(P<0.01),其中0.2%的SSP保护率最高,为61.9%。研究表明,不同剂量的SSP对链球菌感染的罗非鱼能有着不同程度保护效果,可以有效降低罗非鱼感染无乳链球菌后的死亡率。