五子衍宗方对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞凋亡的保护作用

目的:探讨五子衍宗方对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞凋亡的保护作用。方法:随机将50只成年雄性Balb/C小鼠分为正常对照组、模型组以及五子衍宗方低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组,每组10只。五子衍宗方3个剂量组每天分别灌胃相应剂量五子衍宗方,正常对照组和模型组灌胃等体积双蒸水,1次/d。正常对照组从第4天开始腹腔注射生理盐水,其余各组从第4天开始腹腔注射环磷酰胺200 mg/kg,每隔7 d注射1次,共4次,同时各组每天继续灌胃相应药物。第4次腹腔注射环磷酰胺后间隔12 h称量小鼠体质量,乙醚麻醉颈椎脱臼处死小鼠,迅速取出睾丸去除多余组织,称量睾丸质量,计算睾丸指数,HE染色观察睾丸组织形态变化,TUNEL检测睾丸生殖细胞凋亡,Western blot检测睾丸组织中凋亡相关蛋白Caspase-3、BAX、BCL-2表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠体质量、睾丸质量、睾丸指数、睾丸内各级生殖细胞数量及睾丸组织内BCL-2蛋白表达水平显著降低,睾丸内凋亡阳性染色细胞显著增多,睾丸组织内BAX、Caspase-3蛋白表达水平显著升高;而五子衍宗方可显著升高小鼠体质量、睾丸质量、睾丸指数、睾丸内各级生殖细胞数量以及睾丸内BCL-2蛋白表达水平,明显减少睾丸内凋亡阳性染色细胞,降低睾丸内BAX和Caspase-3蛋白表达水平。结论:五子衍宗方能显著减少环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞凋亡,其作用机制可能与升高BCL-2蛋白表达水平、降低BAX、Caspase-3蛋白表达有关。

五子衍宗方总黄酮对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响

目的探讨五子衍宗方总黄酮(Total flavonoids from Wuzi Yanzong prescription,TFWZ)对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响。方法利用腹腔注射CTX制备小鼠少弱精症模型,灌胃给予TFWZ,末次给予CTX 12 h后称体质量处死小鼠,计算睾丸指数和附睾指数;HE染色观察小鼠睾丸组织形态学变化;TUNEL检测小鼠睾丸细胞凋亡的变化;Western blot检测小鼠睾丸细胞内Caspase-3、p-p53和p-p38蛋白的表达情况。结果与模型组比较,TFWZ可显著增加小鼠体质量、睾丸质量、睾丸指数、附睾质量和附睾指数,改善睾丸组织形态,并显著减少睾丸细胞凋亡,降低睾丸内Caspase-3、p-p53和p-p38蛋白的表达。结论 TFWZ能显著减少CTX致小鼠睾丸生殖细胞凋亡,其机制可能与抑制p38活化,减少p53磷酸化有关。

五子衍宗方对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响

目的:探讨五子衍宗方对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组及五子衍宗方低、高剂量组,五子衍宗方低、高剂量组分别提前灌胃给予五子衍宗方140、280 mg/kg,其余各组灌胃给予生理盐水。从第3天开始,除正常对照组腹腔注射生理盐水外,其余各组注射CTX 50 mg/kg,隔2 d注射1次,连续10次。参照精液分析方法检测小鼠精子浓度、精子形态正常率、精子活率;单细胞凝胶电泳观察小鼠睾丸细胞DNA损伤的变化;免疫组化检测小鼠睾丸DNA损伤蛋白γ-H2AX的定位与表达变化;Western blot检测小鼠睾丸生殖细胞内DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Ku70及DNA损伤修复相关蛋白p-P53、P21核内表达水平。结果:与模型组比较,五子衍宗方低、高剂量均可显著升高模型组小鼠精子浓度、精子形态正常率及精子活率,显著降低彗星尾长、尾距、Olive尾矩和尾部DNA百分率及睾丸组织中γ-H2AX的阳性点数。Western blot结果表明,与模型组比较,五子衍宗方可显著降低睾丸生殖细胞核内DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Ku70及DNA损伤修复相关蛋白p-P53、P21的表达。结论:五子衍宗方能显著减轻CTX致小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤,其机制可能与调控P53信号通路有关。

五子衍宗方对环磷酰胺致小鼠睾丸细胞DNA损伤的影响

目的探讨五子衍宗方(枸杞子、菟丝子、覆盆子、车前子、五味子)对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸细胞DNA损伤的影响。方法将50只成年雄性Balb/C小鼠中40只腹腔注射环磷酰胺后随机均分为模型对照组(生理盐水)以及五子衍宗方低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg),10只另设正常对照组(生理盐水),乙醚麻醉小鼠后颈椎脱臼处死。检测小鼠精子数量、精子活率及精子畸形率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测血清中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含有量,单细胞凝胶电泳技术检测睾丸细胞DNA损伤程度,Western blot检测睾丸组织中磷酸化的肿瘤抑制蛋白53(p-P53)、γ位磷酸化的组蛋白(γ-H2AX)蛋白表达。结果相较于模型对照组,五子衍宗方各组可显著升高小鼠精子数量、精子活率,显著降低精子畸形率、血清8-OHdG水平,显著降低睾丸组织中p-P53与γ-H2AX蛋白表达。结论五子衍宗方能通过下调p-P53、γ-H2AX蛋白表达来显著减轻环磷酰胺致小鼠睾丸细胞DNA损伤。

五子衍宗方对环磷酰胺致小鼠肝脏细胞DNA损伤的保护作用

目的研究五子衍宗方对环磷酰胺(CTX)诱导的小鼠肝脏细胞DNA损伤的保护作用。方法将BALB/c小鼠随机分为正常对照组,模型组,五子衍宗方低、高剂量组,每组10只。五子衍宗方组预给药一周之后,除正常对照组之外,其余各组注射CTX(100 mg/kg)隔天给药共3次,末次注射CTX 12 h后处死小鼠。检测小鼠的肝脏指数,血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活力。硫代巴比妥酸法检测肝脏中丙二醛(MDA)的量,ELISA检测肝脏中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)的量,单细胞凝胶电泳技术检测肝脏细胞的DNA损伤。结果五子衍宗方能够升高小鼠的肝脏指数,降低ALT、AST的活力,降低肝脏中的8-OHd G、MDA的量,五子衍宗方组均可以使小鼠Olive尾矩、尾长、尾距和尾部DNA%降低。结论五子衍宗方能拮抗CTX造成的小鼠肝脏细胞的DNA损伤,提高肝脏的抗氧化能力。

五子衍宗方对环磷酰胺致小鼠DNA损伤的影响

目的观察五子衍宗方对环磷酰胺(CTX)致小鼠DNA损伤的影响,并探讨其作用机制。方法将BalB/c小鼠随机分为正常组、模型组、五子衍宗方低剂量组、五子衍宗方高剂量组。五子衍宗方低、高剂量组预给药1周后,除正常组外,其余各组腹腔注射CTX 100 mg/kg造模,隔日1次,共3次,同时五子衍宗方低、高剂量组继续给药,末次给予CTX后12 h处死小鼠,分离血清,ELISA检测血清中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量,应用单细胞凝胶电泳技术检测骨髓细胞DNA损伤。结果五子衍宗方低、高剂量组能够降低血清中8-OHdG的含量,使小鼠骨髓细胞彗星图像的Olive尾矩、尾距、尾长和尾部DNA含量降低。结论五子衍宗方对CTX致小鼠DNA损伤具有较好的保护作用。

高年级段培智语文新教材的编写特点与教学建议

培智语文新教材的编写既遵循了学生的心理逻辑,也遵循了学科内在的知识逻辑,两条线并进。细致分析高年级段的语文新教材,可以看出新教材一些新特点与趋势,如教材中生活化内涵进一步升华、语文要素不断增强、情感价值观导向突出,新理念下需要一线教师去思考如何才能更有效地落实语文要素,如何才能更有效地推动学生的主体性落地,如何才能真实地找准学科性和生活性的联结点等问题。

环磷酰胺致DNA损伤及其防治机制的研究进展

CTX是临床上常用的抗肿瘤药物与免疫抑制剂,其在体内的代谢产物具有很强的烷化作用,可引起DNA链内和链间的交叉连接,干扰转录和复制,造成DNA的损伤。CTX导致DNA损伤的机制与环磷酰胺代谢过程中产生的自由基过量以及代谢产物产生的烷化作用有关,目前减轻CTX造成的DNA损伤的措施主要是提高机体的抗氧化能力和促进机体修复损伤的DNA。DNA损伤会对机体产生一系列变化如导致肿瘤、神经退行性病变、衰老和遗传易感综合症等疾病的发生、发展。本文综述了CTX导致DNA损伤的机制及其防治研究进展,以其为CTX的临床安全用药和今后的科学研究提供思路和依据。