强直性脊柱炎患者血清TNF-α、RANKL、OPG和IL-34水平与附着点病变的相关性研究

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者TNF-α、细胞核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)和IL-34水平与超声评估附着点病变、实验室指标和临床指标的相关性。方法选取AS患者21例(AS组),类风湿关节炎(RA)患者21例(RA组),健康者41例(健康对照组)。采用ELISA法检测各组血清TNF-α、RANKL、OPG和IL-34水平。分析AS患者TNF-α、RANKL、OPG和IL-34与超声评估附着点病变、实验室指标和临床指标的相关性,并分析4项血清指标之间的相关性。结果 AS组患者血清TNF-α、RANKL和IL-34水平均高于RA组患者及健康对照组,血清OPG均低于RA组患者及健康对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。AS患者血清RANKL和IL-34水平与超声评估附着点骨侵蚀关节个数(r=0.564和0.482,均P<0.05)及附着点炎关节个数(r=0.634和0.545,均P<0.05)均呈正相关。AS患者血清IL-34水平与Bath强直性脊柱炎病情活动指数呈负相关(r=-0.454,P<0.05)。AS患者血清RANKL水平与血清OPG水平呈负相关(r=-0.461,P<0.05)。ROC曲线显示血清RANKL和IL-34水平诊断AS的AUC分别为0.994和0.941,均P<0.05。当血清RANKL水平≥125.85pg/ml,灵敏度为0.95,特异度为0.95;当血清IL-34水平≥728.15pg/ml,灵敏度为0.95,特异度为0.73。结论 AS患者外周血中存在较高水平的RANKL和IL-34,其与超声评估附着点病变骨侵蚀关节个数及附着点炎关节个数均呈正相关,提示两者可作为预测AS患者存在附着点病变的尤其是存在骨侵蚀的可靠指标。

类风湿关节炎患者血清缺氧诱导因子-1α的检测及与关节滑膜病变的相关性

目的探讨类风湿关节炎（RA）患者血清缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）水平与关节滑膜病变的关系。方法采用酶联免疫吸附法检测18名健康人、20例骨关节炎（OA）患者及63例RA患者血清中HIF-1α的水平。RA组根据疾病活动评分确定活动组与稳定组，活动组中再根据病程分为早期活动组及中晚期活动组，其中早期活动组22例，中晚期活动组21例，稳定组20例，并分析血清HIF-1α水平与RA关节滑膜病变及病情活动指标的相关性。结果RA组血清HIF-1α水平（064±1．90）ng／ml显著高于OA组（O13±0．01）ng／ml及健康对照组（O．12±0．01）ng／ml，早期活动组RA组血清HIF-1α水平（1．54±3．25）ng／ml显著高于中晚期活动组（0．35±0．35）ng／ml、稳定组患者（0．17±0．09）ng／ml及OA组（013±001）ng／ml；RA患者血清HIF-1α水平与存在滑膜增厚的关节个数计数、28个滑膜增厚的总积分、采集到能量信号的关节个数计数呈正相关，而与存在关节积液的关节个数计数、28个关节积液的总积分、每个关节的滑膜点评分最高的点所得的分数和各关节滑膜内动脉的阻力指数总和、CRP、血沉、血清抗环瓜氨酸抗体、关节肿胀数、关节压痛数、疾病活动度DAS28评分无明显相关性。结论HIF-1α与RA初期滑膜组织增厚相关，检测其血清水平有助于早期诊断RA。

HIF-VEGF-ANG轴与类风湿关节炎研究进展

类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）是以关节滑膜组织慢性炎症为主要表现的自身免疫性疾病。炎症环境下滑膜成纤维细胞、巨噬细胞及淋巴细胞大量增殖活化导致滑膜增厚,增加血管和滑膜细胞间的距离,超越氧气的扩散极限（100～200mm），

HIF-1α及VEGF在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的表达及意义

目的研究类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞在体外常氧和缺氧培养条件下缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的差异性及意义。方法对RA患者及骨关节炎(OA)患者的关节滑膜细胞在体外常氧和缺氧条件下分别进行培养,根据培养条件分为常氧组、缺氧6h组及缺氧12h组;采用免疫印迹法分别检测各组成纤维样滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达情况。结果与常氧组相比,缺氧6h及12h的RA和OA患者滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均显著增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。同时RA和OA患者缺氧12h组滑膜细胞HIF-1α及VEGF的表达高于缺氧6h组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。RA和OA患者3组滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均呈正相关(均P<0.05)。常氧组RA与OA患者滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均无统计学差异(均P>0.05);而缺氧6h和12h组中RA滑膜细胞HIF-1α及VEGF的表达均高于OA滑膜细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在缺氧条件下RA患者滑膜细胞HIF-1α及VEGF表达显著升高且密切相关,可能缺氧一HIF-1α—VEGF这一信号途径在RA的发生、发展中起着重要作用。

类风湿关节炎患者血清铁调素与贫血及疾病活动性的关系

目的探讨血清铁调素(hepcidin,Hepc)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者中的作用及其与贫血及病情活动度的关系。方法用酶联免疫吸附法测定80例RA患者(RA组)、20例其他结缔组织病(connective tissue disease,CTD)患者(其他CTD组)、20例健康志愿者(健康对照组)血清Hepc水平及RA患者白介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,比较3组间Hepc的差异,分析RA患者中贫血与非贫血、不同病情活动度间Hepc及其他细胞因子水平差异,以及RA患者血清Hepc水平与其他因素间的相关性。结果血清Hepc水平在RA组中明显升高,与其他CTD组及健康对照组相比,差异有统计学意义(均P<0.01)。血清Hepc升高的RA患者病情活动度评分和IL-6浓度均高于Hepc正常组(均P<0.05)。RA贫血者血清IL-6水平明显高于非贫血者(P<0.05),TNF-α、IL-1β及Hepc在RA贫血者与非贫血者间差异无统计学意义(均P>0.05)。RA高度活动者的血红蛋白浓度明显低于非高度活动者(P<0.05),而Hepc水平则较非高度活动者升高,但差异无统计学意义(P=0.063)。RA患者血清Hepc水平与IL-6(r=0.298)和RF(r=0.264)均存在正相关(均P<0.05);与DAS28存在明显正相关(r=0.359,P<0.01)。结论 Hepc可能作为一个炎性因子参与了RA的发展,检测Hepc可能作为RA病情活动度和预后的评价指标之一。

RNA干扰HIF-1α对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的VEGF表达及增殖的影响

目的探讨shRNA特异性干扰沉默缺氧诱导因子-1α[(HIF-1α)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)的血管内皮生长因子(VEGF)表达及其增殖的影响。方法获取9例RA患者滑膜组织进行RA-FLS的分离培养及传代。将FLS分为4组:常氧组、缺氧组、阴性质粒组(转染阴性质粒)和阳性质粒组(转染HIF-1α阳性质粒),常氧组进行常规培养,后3组进行缺氧培养12h;采用Western blot和qRT-PCR法分别检测各组FLS中HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGF mRNA表达情况。将缺氧组、阴性质粒组和阳性质粒组的FLS分别于缺氧条件下培养6、12、24、48h,应用MTT比色法检测各组细胞增殖情况。结果与常氧组相比,缺氧组FLS的HIF-1α(和VEGF以及HIF-1α和VEGF mRNA表达明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),而阴性质粒组和缺氧组FLS的HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGF mRNA表达水平无明显差异(P>0.05);阳性质粒组FLS的HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGF mRNA较缺氧组下调,差异均有统计学意义(均P<0.05)。4组FLS的HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGFmRNA表达呈正相关(P<0.01)。缺氧培养12h后阳性质粒组的FLS生长较缺氧对照组及阴性质粒组减慢,差异有统计学意义(P<0.05),而后两组FLS生长无统计学差异(P>0.05)。结论 RNA干扰HIF-1 oc表达能有效下调RA-FLS中HIF-1α和VEGF以及HIF-1α和VEGF mRNA水平,并且能抑制FLS的异常增殖。

原发性干燥综合征外周血单个核细胞P2X7受体表达及其与焦虑、抑郁的相关性

目的探讨原发性干燥综合征(primary Sjgren’s syndrome,pSS)患者外周血单个核细胞(PBMC)表面P2X7受体表达情况及其与焦虑、抑郁的相关性。方法用汉密尔顿焦虑、抑郁量表对31例pSS患者(pSS组)进行心理评估,分离其PBMC,在有或无ATP刺激后用流式细胞术检测CD14+PBMC及CD14-PBMC表面P2X7受体的表达水平,并用酶联免疫吸附试验测定ATP刺激前后白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6水平。另外,分别设有19例类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者(RA组)及18例单纯焦虑、抑郁障碍患者(焦虑抑郁组)作为阳性对照,20例健康人(健康组)为阴性对照。结果所有4组受试者PBMC表面均有P2X7受体表达。ATP刺激较未刺激,CD14+PBMC(单核细胞)表面P2X7受体表达仅在pSS组[(5.6%3±2.48%)vs.(3.98%±1.68%),t=3.647,P=0.001]显著增高,而在CD14-PBMC(主要为淋巴细胞)表面其表达在pSS组[(16.92%±9.25%)vs.(10.06%±4.35%),t=4.908,P<0.001]及焦虑抑郁组[(12.68%±8.15%)vs.(8.07%±5.05%),t=3.412,P=0.003]均显著增高。ATP刺激后,pSS组CD14+PBMC表面P2X7受体表达显著高于RA组[(5.63%±2.48%)vs.(4.15%±2.20%),P=0.044]、焦虑、抑郁组[(5.63%±2.48%)vs.(3.35%±1.80%),P=0.004]及健康组[(5.63%±2.48%)vs.(3.25%±2.05%),P=0.002]。ATP刺激后,pSS患者PBMC上清中IL-1β水平与刺激后外周血CD14+PBMC表面P2X7受体表达呈显著正相关(r=0.447,P=0.025)。pSS组存在焦虑的患者占45.2%(1431),存在抑郁的患者占32.3%(1031)。ATP刺激后,CD14-PBMC表面P2X7受体表达与pSS组、焦虑抑郁组焦虑评分(r=0.344,P=0.030)及抑郁评分(r=0.319,P=0.045)呈显著正相关。结论 pSS患者PBMC表面P2X7受体高表达,可能与pSS的发病机制及其合并焦虑、抑郁相关。

类风湿关节炎患者血清骨形态发生蛋白6和铁调素与贫血的关系

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者骨形态发生蛋白6(BMP-6)和铁调素(Hepc)与贫血的关系。方法采用酶联免疫吸附法测定99例RA患者、19例系统性红斑狼疮(SLE)患者、40例健康志愿者的血清BMP-6、Hepc水平,同时检测RA患者的红细胞计数(RBC)、血红蛋白水平(HGB)、白细胞介素6(IL-6)、血清铁(SI)、血清可溶性转铁蛋白受体(sTfR)、铁蛋白(SF),分析比较RA组与SLE组和健康对照组、RA患者贫血组与非贫血组、慢性病性贫血(ACD)与慢性病伴缺铁性贫血(IDA+ACD)组间及不同疾病活动度组间BMP-6、Hepc和其他贫血相关指标,以及RA患者血清BMP-6和Hepc水平与其他因素间的相关性。结果 RA患者贫血发生率为59.6%,其中ACD占52.5%,IDA+ACD占47.5%。血清BMP-6和Hepc水平在RA患者中明显升高,与SLE组、健康对照组的差异均有统计学意义(均P<0.05)。RA贫血组的IL-6水平及类风湿关节炎疾病活动性评分(DAS28)较非贫血组均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而两者SI、SF、BMP-6和Hepc水平的差异均无统计学意义(均P>0.05);RA伴ACD患者的血清SF、Hepc、BMP-6水平及DAS28评分均明显高于RA伴IDA+ACD组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。DAS28>5.1的RA疾病高度活动组血清BMP-6及Hepc较DAS28评分≤5.1的疾病非高度活动组明显升高,而HGB水平明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。RA患者的血清BMP-6与Hepc水平呈正相关(P<0.01),且两者均与IL-6、DAS28呈正相关(P<0.05),BMP-6还与SI呈正相关(P<0.05)。结论 RA患者贫血类型以ACD为主,其血清BMP-6和Hepc水平均明显升高,在伴ACD或疾病高度活动的RA患者中升高尤其明显,且互相关系密切,说明BMP-6和Hepc水平异常正是诱导RA患者发生ACD的主要因素之一,两者可能可以作为RA患者ACD治疗的靶点,其在RA中的作用机制值得进一步研究探索。

SLC2A9、SLC22A12、ABCG2、P2RX7基因启动子区甲基化与原发性痛风

目的探讨基因(SLC2A9、SLC22A12、ABCG2和P2RX7)启动子区甲基化在原发性痛风中的作用。方法于2016年1月至2017年1月在宁波市第二医院纳入原发性痛风患者50例,同期纳入50例健康体检者作为对照,采集所有受检者的外周血,采用焦磷酸测序技术检测SLC2A9、SLC22A12、ABCG2和P2RX7基因的甲基化率。采用SPSS 20. 0统计学软件对痛风组和对照组间的DNA甲基化率进行比较。结果痛风组患者SLC2A9 (pos 1、3、4、5、7)低于对照组、SLC22A12pos 2高于对照组,ABCG2 (pos 1、2、4、5、6)甲基化率明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0. 05)。其中痛风组与对照组SLC2A9基因各位点的甲基化率分别明显不同[pos 1:(0. 56±0. 05)%比(1. 27±0. 12)%,P=0. 042; pos 3:(0. 07±0. 01)%比(0. 82±0. 03)%,P=0. 012; pos 4:(1. 22±0. 23)%比(2. 69±0. 78)%,P=0. 043; pos 5:(0. 01±0. 00)%比(0. 76±0. 13)%,P=0. 003; pos 7:(0. 01±0. 00)%比(0. 87±0. 03)%,P=0. 003];基因SLC22A12 [pos 2:(94. 05±1. 13)%比(93. 15±2. 04)%,P=0. 008];基因ABCG2 [pos 1:(0. 76±0. 12)%比(1. 52±0. 34)%,P=0. 007; pos 2:(0. 12±0. 01)%比(0. 68±0. 11)%,P=0. 033; pos 4:(1. 06±0. 02)%比(1. 82±0. 32)%,P=0. 033;pos 5:(0. 10±0. 01)%比(0. 90±0. 02)%,P=0. 017; pos 6:(0. 04±0. 00)%比(0. 58±0. 03)%,P=0. 004]。但分析该3个基因的功能,只有基因SLC2A9的结果可解释痛风的发病机制。结论 SLC2A9(pos 1、3、4、5、7)低甲基化水平可能增加原发性痛风的风险。

类风湿关节炎患者超声评估滑膜病变与血清血管内皮生长因子检测的相关性研究

目的观察类风湿关节炎关节超声声像和血流动力学特点,探讨其与血清血管内皮生长因子(VEGF)水平和疾病活动度的关系。方法超声检查29例类风湿关节炎患者双肩、双肘、双腕、双侧掌指关节及近端指间关节、双膝关节,测量其滑膜厚度(US joint count SH、US index SH)、关节积液(US joint count SF、USindex SF)及RI值,并进行能量多普勒评分(TSS),同时对受检患者进行DAS28评分,采用酶联免疫吸附法检测血清中VEGF的含量。结果 RA患者血清VEGF与US joint SH、US index SH、US joint PD、TSS呈正相关,与RI呈负相关。RA患者DAS28评分与US joint SH、US index SH、US joint SF、US index SF、US jointPD、TSS呈正相关,与RI呈负相关。结论超声检查可以作为反映类风湿关节炎滑膜炎性病变及滑膜血管翳一种简单易行、安全有效的检查手段。

Th17/Treg在系统性红斑狼疮患者中的探讨

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血辅助性T细胞17（Th17）与调节性T细胞（Treg）及血浆中相关细胞因子白细胞介素（IL）-17、IL-6、IL-23的变化.方法 收集SLE患者70例和健康对照组30例,采用SLE疾病活动指数（SLEDAI）评分方法将SLE患者分为活动组（≥5分,38例）和稳定组（0～4分,32例）.采用流式细胞术（FCM）检测外周血Th17、Treg百分数,用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血浆中IL-17、IL-6、IL-23水平.结果 SLE患者外周血Th17占CD4＋T细胞比例高于对照组（P＜0.05）,SLE活动组Th17占CD4＋T细胞比例较SLE稳定组及对照组高（均P＜0.05）;SLE患者外周血Treg占CD4＋T细胞比例低于对照组（P＜0.05）,SLE活动组Treg占CD4＋T细胞比例较SLE稳定组及对照组低（均P＜0.05）;SLE患者外周血Th 17/Treg高于对照组（P＜0.05）,SLE活动组Th 17/Treg高于SLE稳定组及对照组（均P＜0.05）.Th17、Th 17/Treg、IL-6与SLEDAI评分均呈正相关（r=0.923、0.567、0.397,均P＜0.05）,Treg与SLEDAI评分均呈负相关（r=-0.458,均P＜0.05）.结论 SLE患者中Th17细胞、调节性T细胞百分数存在异常,且与疾病活动性密切相,提示两种共同变化或失衡可能在SLE的发生、发展过程中起重要作用.

锝[99Tc]亚甲基二磷酸盐治疗难治性强直性脊柱炎的疗效观察

目的观察锝[99Tc]亚甲基二磷酸盐针(即云克)治疗难治性强直性脊柱炎的临床疗效。方法对宁波市第二医院风湿免疫科13例难治性的强直性脊柱炎患者在原有的免疫抑制剂的基础上加用云克治疗,具体方法采用每天予以"云克针22mg+生理盐水100mL"静脉注射,第1疗程为21d,第2、3疗程为14d,每个疗程后间隔14d,共3个疗程。比较治疗前、治疗3个疗程结束时及治疗3个疗程结束后2个月患者的临床症状及外周关节肿胀数、指地距、Schober试验、血沉、及CRP改善的情况。结果 3个疗程结束时13例患者中,显效0例,有效4例,无效9例总有效率为30.7%;3个疗程结束后2个月,显效2例,有效7例,无效4例,总有效率为69.2%。对三个时段(组)的多个指标进行多次重复测量方差分析,均具有统计学意义(P值均<0.01)。对各组数据的两两比较进行Bonferroni法检验,三组各观察指标的差异也均具有统计学差异(P值均<0.05)。结论云克对于难治性的AS有一定的疗效,起效较慢。云克为治疗难治性强直性脊柱炎的治疗提供了一种新的选择。

Th17及相关细胞因子在系统性红斑狼疮中的变化

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)及血浆中相关细胞因子白细胞介素(IL)-17、IL-6、IL-23的变化。方法收集SLE患者62例和健康对照组30例,采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分方法将SLE患者分为活动组(≥5分,34例)和稳定组(0～4分,28例)。采用流式细胞术(FCM)检测外周血Th17细胞百分数,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆中IL-17、IL-6、IL-23水平。结果 SLE患者外周血Th17占CD4+T细胞比例高于健康对照组(<0.05),SLE活动组Th17占CD4+T细胞比例较SLE稳定组高(<0.05)。SLE患者组血浆中IL-6、IL-17、IL-23均较健康对照组高(<0.05)。Th17、IL-6、IL-17、IL-23与SLEDAI评分均呈正相关(=0.923、0.393、0.689、0.501,均<0.05)。结论 Th17细胞在SLE的发病及发展过程中起重要作用。

类风湿关节炎患者血清骨形态发生蛋白6与骨质疏松的关系

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者骨形态发生蛋白(BMP)-6与骨质疏松(OP)的关系。方法比较分析99例RA患者与40例健康组及RA患者中不同骨密度组间BMP-6以及其他因子水平,以及各因子之间的相关性。结果 RA患者OP发生率明显高于健康组,其腰椎和股骨颈的骨矿密度(BMD)均低于健康组,而其血清BMP-6浓度明显升高(均<0.05)。RA伴OP的患者BMP-6水平明显升高,抗环瓜氨酸(CCP)抗体水平也明显升高(均<0.05);RA患者的腰椎BMD和股骨颈BMD正相关(=0.817,<0.01),而腰椎BMD与血清BMP-6及年龄负相关(=-0.393、-0.449,均<0.05);股骨颈BMD则与年龄及抗CCP抗体水平负相关(=-0.551、-0.458,均<0.05)。RA患者血清BMP-6浓度与DAS28评分及IL-6、TNF-浓度正相关(=0.249、0.237、0.263,均<0.05)。结论 BMP-6水平异常可能是诱导RA患者发生OP的因素之一,其在RA中的作用机制值得进一步研究探索。

涎腺超声联合血清BAFF检测在原发性干燥综合征诊断中的价值

目的探讨涎腺超声联合血清B淋巴细胞刺激因子(BAFF)检测在原发性干燥综合征(pSS)诊断中的临床价值。方法选择pSS患者80例(pSS组),类风湿关节炎(RA)患者60例(RA组),健康体检者20例(健康对照组)。采用ELISA法检测各组血清BAFF、增殖诱导配体(APRIL)、TNF-α、IL-1β及IL-6水平;通过二维超声评估pSS患者涎腺受累情况。分析比较各组血清BAFF、APRIL、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,并分析pSS患者血清BAFF、APRIL、TNF-α、IL-1β、IL-6与涎腺超声评分的相关性。结果3组血清BAFF、IL-1β、TNF-α比较差异均有统计学意义(均P<0.05),其中pSS组患者血清BAFF、IL-1β、TNF-α水平明显高于RA组与健康对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。pSS患者血清BAFF与涎腺评分呈负相关(r=-0.462,P<0.05),血清IL-1β与涎腺评分呈正相关(r=0.403,P<0.05)。涎腺超声、血清BAFF对pSS诊断的灵敏度高于抗干燥综合征A抗原(SSA)/干燥综合征B抗原(SSB)、类风湿因子(RF),差异均有统计学意义(均P<0.05)。对于涎腺超声评分≤2分的早期pSS患者,涎腺超声联合BAFF检测诊断特异度达到96.77%。结论pSS患者血清BAFF在疾病的早期即有明显升高,有助于早期诊断。涎腺超声对pSS的诊断比抗SSA/SSB有更高的灵敏度,特异度相当;BAFF对pSS的诊断比抗SSA/SSB灵敏度高,但特异度较低。对于涎腺超声评分≤2分的pSS患者,涎腺超声联合血清BAFF检测可提高诊断的特异度,可作为早期筛查指标。

肌肉骨骼超声对强直性脊柱炎患者外周附着点病变的诊断价值

目的探讨肌肉骨骼超声在强直性脊柱炎(AS)患者评估附着点病变的临床意义。方法应用肌肉骨骼超声检查40例AS患者双下肢9个附着点(包括跖底筋膜止点、跟腱止点、股四头肌肌腱止点、股骨和胫骨内外髁韧带附着点、髌韧带起点和止点),同时采用酶联免疫吸附法检测患者血清白介素17(IL-17)、核转录因子-κB配体受体激动剂(RANKL)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,分析患者超声评估附着点病变与血清IL-17、RANKL及TNF-α相关性。结果 720个附着点中超声发现275处(38.2%)附着点病变,最常见的病变是骨侵蚀,超声评估附着点存在骨侵蚀个数及附着点炎个数与AS患者血清IL-17及RANKL均呈正相关(r=0.479、0.379、0.416、0.354,均P<0.05)。结论肌肉骨骼超声是观察AS附着点炎和骨侵蚀的安全有效的检查方法。

女性类风湿关节炎DNA甲基化特征

目的应用基因芯片技术对类风湿关节炎(RA)DNA甲基化特征进行研究,探讨DNA甲基化在RA发病机制中的作用。方法随机选取本院门诊确诊为RA的12例女性患者作为RA组,体检的12名健康女性作为对照组,采用Infinium公司的基因芯片对两组受试者进行全基因组CpG岛DNA甲基化检测,筛选差异甲基化位点,采用Gene Ontology(GO)分析和Pathway分析对筛选基因进行功能分类和通路分析。结果RA组与对照组相比,共有24183个CpG位点甲基化水平发生改变(P<0.05),其中有13672个高甲基化位点,10511个低甲基化位点。RA组显著差异甲基化位点共191个,共对应着115个基因,其中高甲基化基因如IL-26、PCSK6、MICB、NCF4、GALNT9、PHF19、ADAMTS4、ACTN1等,低甲基化基因如CYP2E1、SMAD3、SLC1A1、CD44、AGPAT1、KCNQ1、AHRR等。GO生物学过程分析显示,差异甲基化基因参与生物学过程富集于:细胞因子介导的信号通路、炎症反应、核转录因子-κB(NF-κB)信号通路、免疫反应调节、T细胞活化、透明质酸的代谢等;Pathway分析显示,RA组特异的差异甲基化基因与沙门菌感染、Toll样受体信号通路、炎性肠病、NF-κB信号通路、TRP通道的炎性介质调节、趋化因子信号通路、TNF信号通路、破骨细胞分化、系统性红斑狼疮等信号通路有关。结论DNA异常甲基化可能参与了RA的发生发展,异常甲基化的基因可能成为RA评估发病、疾病进展和疾病严重程度的生物标记物或预测因子,也有望成为RA治疗的潜在靶点。

类风湿关节炎患者血清血管内皮生长因子血管生成素-1和2的检测及其与关节滑膜病变的相关性研究

目的检测类风湿关节炎（RA）患者血清血管内皮生长因子（VEGF）、血管生成素-Ⅰ（Ang-1）与Ang-2的水平，分析各组间的差异及其与超声评估关节滑膜病变的相关性。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测82例RA患者，21名健康者，24例骨关节炎患者血清中VEGF、Ang-1和Ang-2的水平，RA患者根据疾病活动评分（DAS28）确定活动组与稳定组，活动组中再根据病程分为早期活动组及中晚期活动组，其中早期活动组28例，中晚期活动组32例，稳定组22例，同期超声扫查29例RA患者28个关节，记录滑膜厚度指标[滑膜增厚的关节数（USiointcountSH）、滑膜增厚积分（USindexSH）]、关节积液指标[关节积液的关节数（USjointcountSF）、关节积液积分（USindexSF）]、血流信号[采集到能量信号的关节数（USiointcountPD）、能量多普勒评分（TSS）]及滑膜动脉阻力指数（RI值），分析三者与RA关节超声检查关节滑膜病变的相关性，并分析三者间血清水平相关性。另外检测25例活动期患者经治疗3个月后血清中3个因子的水平，对比组间血清VEGF、Ang-1、Ang-2水平、红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）及DAS28差异。组间比较采用单因素方差分析，治疗前后比较采用Wilcoxon检验，相关性分析采用直线回归或Spearman秩相关。结果RA组的血清VEGF，Ang-1水平[（1285±272）Dg／ml，（0．55±0．25）ng／m1]高于骨关节炎组[（934±80）pg／ml，（0．32±0．16）ng／ml]及健康对照组[（565±115）pg／ml，（0．24±0．21）ng／ml]，RA组的血清Ang-2水平[（1．36±0．40）ng／m1]高于健康对照组[（0．52±0．32）ng/mal]．RA早期活动组血清VEGF水平[（1355±194）pg／ml]高于中晚期活动组[（1096±477）pg／ml]和稳定期组[（862±91）pg／ml]，RA早期活动组、中晚期活动组和稳定组间血清Ang-1水平差异无统计学意义，RA稳定期组血清Ang-2水平[（2．0±2．0）ng／ml]高于中晚期活动组[（0．9±0．8）ng／ml]；RA患者血清VEGF与USjointSH、USindexSH、USjointPD、TSS呈正相关，与RI呈负相关，血清Ang-1水平与USiointSH、USiointPD、TSS呈正相关，与RI呈负相关，血清Ang-2水平与超声评估指标无相关性。活动期RA患者血清VEGF、Ang-1与Ang-2水平相互间呈正相关。稳定期血清VEGF水平、Ang-1与Ang-2水平相互间无相关性。血清VEGF、Ang-1水平治疗前及治疗后水平差异无统计学意义，治疗后血清Ang-2水平[（4．2±4．1）ng／ml]高于治疗前水平[（1．3±2．1）ng／ml]。治疗后ESR、CRP、DAS28均低于治疗前。结论血清VEGF和Ang-1水平可能作为反映RA滑膜增厚及血管翳存在的有用指标，而血清Ang-2水平可能作为疗效观察的指标之一。血清VEGF、Ang-1、Ang-2可能通过相互影响及相互促进，介导RA滑膜增厚及血管翳形成，是滑膜炎症发生发展的重要因子。

类风湿关节炎患者血清铁调素与骨形态发生蛋白6的变化及临床意义

目的 探讨血清铁调素和骨形态发生蛋白（BMP）-6在类风湿关节炎（RA）患者中的水平变化及其临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法测定99例RA患者、40例其他结缔组织病患者（CTD组）、40名健康志愿者的血清铁调素、BMP-6浓度及RA患者的白细胞介素（IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α,并检测类风湿因子（RF）水平及其他临床指标,比较3组间铁调素、BMP-6的差异；同时比较RA患者中不同疾病活动度（DAS28）评分组间、血清铁调素浓度升高组与正常组间的铁调素、BMP-6及各临床指标及细胞因子水平的差异,并分析血清铁调素及BMP-6水平与其他因素间的相关性.组间比较采用t检验或Mann-Whithey U检验,相关分析采用Spearman相关分析.结果 血清铁调素和BMP-6浓度在RA患者中[分别为（9.9±9.3）、（0.48±0.45） ng/ml]明显升高,与CTD组[分别为（3.8±1.3）、（0.32±0.27） ng/ml]和健康对照组[分别为（3.6±1.8）、（0.20±0.18） ng/ml]比较,其差异均有统计学意义（P＜0.05）；铁调素及BMP-6在DAS28评分＞5.1的RA疾病高度活动组中较DAS28评分≤5.1的非高度活动组明显升高,其差异均有统计学意义（P＜0.05）,而血红蛋白浓度在疾病高度活动组中明显低于非高度活动组（P＜0.01）；46例RA患者血清铁调素升高,其BMP-6、IL-6浓度及DAS28评分均高于铁调素正常组（P＜0.05）；RA患者的血清铁调素水平与BMP-6、IL-6、RF、DAS28呈正相关（r=0.376,0.298,0.264,0.267；P均＜0.05）,而BMP-6也与IL-6、TNF-α、RF、DAS28呈正相关（r=0.237,0.263,0.539,0.249；P均＜0.05）.结论 推测铁调素、BMP-6和IL-6是RA中同一信号通路上的相关炎症因子,共同参与了RA的炎症反应；血清铁调素及BMP-6水平可能可以作为RA疾病活动性评价指标.

基于同位素标记相对和绝对定量技术筛选原发性痛风的血清生物标记物研究

目的筛选原发性痛风的生物标记物。方法应用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）标记技术结合液相色谱串联质谱技术筛选出差异蛋白，并且通过生物学过程、细胞定位、分子功能、京都基因和基因组的百科全书（KEGG）通路及蛋白相互作用上进行生物信息学分析，找出有意义的差异蛋白。2组之间差异比较用t检验。结果共鉴定出95个差异蛋白（50个上调蛋白和45个下调蛋白），20条显著的KEGG通路。其中，GAPDH、α-烯醇酶（ENOA）、磷酸甘油酸激酶（PGKl）、葡萄糖-6-磷酸异构酶（G6P[）和膜突蛋白等差异蛋白在原发性痛风发病中具有关键作用。结论通过iTRAQ技术从蛋白组学筛选出来的差异蛋白为研究原发性痛风的生物标记物及发生机制奠定了强有力的理论依据。但是，仍需在后期的研究中对这些差异蛋白进行验证及基因水平上的深入探究。