线粒体氧化应激在染铅小胶质细胞炎性活化中的作用研究

目的:探讨线粒体氧化应激在铅(Pb)导致的小胶质细胞炎症反应中的作用及机制。方法:将BV2小胶质细胞分为4组,分别用0μmol/L(对照组)、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L乙酸铅处理BV2细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测小胶质细胞白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA的表达水平,免疫荧光观察小胶质细胞激活状态以及线粒体活性氧(mtROS)表达,JC-1染色检测线粒体膜电位;将C57BL/6小鼠分为对照组、Pb染毒组(Pb组)(100 ppm)、MitoTEMPO处理组(MitoTEMPO组)(5 mg/kg)、MitoTEMPO联合Pb处理组(MitoTEMPO+Pb组),酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定小鼠血清及大脑皮层炎症因子IL-1β和TNF-α水平,蛋白质免疫印迹(western blotting)法测定小鼠海马NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白水平。结果:Pb可使BV2小胶质细胞激活,与对照组相比,Pb组的IL-6、IL-8和TNF-α mRNA水平出现剂量依赖性升高,mtROS增高,线粒体膜电位下降;MitoTEMPO可抑制Pb导致的小鼠海马区小胶质细胞活化,血清及大脑皮层炎症因子IL-1β和TNF-α水平下降,海马NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白水平增高(均P<0.05)。结论:Pb导致线粒体氧化应激,可使小胶质细胞激活,其机制可能与NLRP3炎症小体活化有关。

铅暴露加重Aβ_(1-42)处理的小胶质细胞活化和小胶质细胞中的铜离子蓄积

目的探讨铜离子在铅(Pb)加重Aβ_(1-42)处理的小胶质细胞活化及神经元损伤中的作用,以揭示铅加重阿尔兹海默症(AD)样变的调控机制。方法将BV2细胞分为Control组(不予任何处理)、Aβ_(1-42)组(5、10、15、20μmol/LAβ_(1-42)处理12 h)、Pb组(5、10、15、20μmol/L Pb处理12 h)和Aβ_(1-42)+Pb组(10μmol/LAβ_(1-42)+10μmol/L Pb处理12 h)。CCK8检测细胞活力,相差显微镜观察细胞形态学改变,细胞免疫荧光检测iNOS释放及氧化应激情况,ELISA检测小胶质细胞的炎性因子释放情况,Western blot检测CTR1和ATP7A蛋白表达量,ICP-MS检测细胞铜含量。结果15μmol/L和20μmol/L的Aβ_(1-42)处理BV2细胞12 h可降低其生长活力(P<0.05和P<0.01);与对照组相比,10μmol/L Aβ_(1-42)处理BV2细胞12 h可引起iNOS、炎性因子TNF-α和IL-6释放增加(P<0.05);10μmol/LAβ_(1-42)联合15μmol/L和20μmol/L的铅处理BV2细胞可影响其生长活力(P<0.05);与10μmol/L Aβ_(1-42)单独处理组相比,10μmol/L铅与10μmol/LAβ_(1-42)联合处理BV2细胞12h可使激活的小胶质细胞增多,具体表现为BV2细胞形态呈现胞体增大、突起增多且细长,iNOS、炎性因子TNF-α和IL-6、IL-1β释放增加(P<0.05),细胞ROS释放增多,细胞内铜离子蓄积(P<0.001),铜转运蛋白CTR1表达水平上升(P<0.05);BV2细胞的激活明显降低了海马神经元HT22细胞生长活力(P<0.001);与Aβ_(1-42)+Pb组相比,在使用抗氧化剂NAC和铜螯合剂TM后,激活的小胶质细胞減少,且对神经元细胞的生长活力损伤有所减轻(P<0.05)。结论铅暴露加重了Aβ_(1-42)处理的小胶质细胞造成的神经元损伤,与铅加重Aβ1-42处理的小胶质细胞铜离子蓄积,氧化应激,炎性因子释放增加,引发小胶质细胞活化有关。

噪声作业工人双耳高频平均听阈和血压的影响因素分析

目的了解噪声作业工人的健康状况,分析噪声对听力和血压的影响,提出防护措施。方法选取深圳市某电机有限公司参加职业健康检查的2282名噪声作业工人为调查对象,采取横断面调查方法,分析双耳高频听力和血压异常的影响因素以及两者之间的关系。结果2282名噪声作业工人中,男性占67.6%,女性占32.4%,年龄中位数为37.90岁,职业危害接触工龄中位数为5.83 a。噪声双耳高频平均听阈(校正值)中位数为23.00 dB,双耳高频听力损伤检出率为7.2%,年龄越大、男性工人的高频听力损伤检出率越高;血压异常检出率为9.8%,年龄、工龄越大,血压异常检出率有增加趋势,男性工人的血压异常检出率明显高于女性工人(χ^(2)=70.907,P<0.05)。双耳高频听力损伤组的血压异常检出率明显高于正常组(χ^(2)=5.837,P<0.05),同时高频听力损伤组的收缩压和舒张压均明显高于正常组(Z=-3.709,P<0.05;Z=-3.187,P<0.05)。结论该电机公司的噪声作业工人存在听力损伤,建议加强噪声防护宣传教育和防护措施,减少噪声职业损伤的发生。