军曹鱼NHE3和NKAα1a基因克隆、表达模式及相关miRNA的靶向调控

为了解军曹鱼NHE3与NKAα1a的序列特征、盐度胁迫下的基因表达模式以及相关miRNA的靶向调控作用,实验应用cDNA末端快速扩增技术克隆了NHE3与NKAα1a的全长cDNA序列;应用实时定量PCR(qPCR)技术分析了NHE3和NKAα1a的组织特异性和盐度适应性表达模式;采用双荧光素酶报告实验检测了NHE3和NKAα1a与相关miRNA的靶向调控关系。结果显示,军曹鱼NHE3与NKAα1a基因的开放阅读框长度分别为2718和3075 bp,分别编码905和1024个氨基酸;NHE3、NKAα1a在鳃、肠、心脏等9种组织中均有表达,其中以鳃组织中的表达丰度最高。随着盐度升高,NHE3在鳃中表达量下降,低盐和高盐适应后均呈显著差异。NKAα1a基因表达量随着盐度升高出现不同趋势,在鳃和肠中受低盐和高盐影响后均显著上调,而高盐环境下其在体肾中的表达水平显著下调。在不同盐度适应过程中,NHE3、NKAα1a均以鳃组织中的表达水平最高。NHE3-pmir-GLO-WT与miR-1335-3p共转染时,较对照组相对荧光素酶活性下降,并存在极显著差异;NKAα1a-pmirGLO-WT分别与miR-1788-3p和mimic NC(对照组)的共转染结果与上述结果类似。研究表明,miR-1335-3p和miR-1788-3p可分别与NHE3和NKAα1a 3′-UTR序列结合,并下调其mRNA表达水平。NHE3和NKAα1a在物种间高度保守;NHE3主要参与低盐适应,而NKAα1a在低盐和高盐适应中均发挥作用;miR-1335-3p和miR-1788-3p可分别负向调控其靶基因NHE3与NKAα1a,从而参与军曹鱼渗透压调节。以上研究结果为进一步研究军曹鱼miRNA-mRNA渗透压调控网络提供了理论基础。

激励理论在煤矿管理中的运用

煤矿企业属于高危险行业,在煤矿管理中,本文针对煤矿员工特别是井下员工文化素质偏低的问题,提出应用激励理论,以激励员工的积极性,提高企业的生产率。

应用目标管理法控制材料消耗

目前,许多企业都在应用一些新近的管理模式,以此来提高企业的管理效果。准备区借鉴兄弟单位经验,对材料费管理使用了目标管理法进行控制,收到了较好的成效。

探索职工安全教育与管理的方法和途径

本文着重论述了人本管理在煤矿安全生产中的重要作用,从多个方面剖析了"三违"产生的原因,最后针对煤矿的安全生产现状,提出了如何做到人本管理的方法与途径。

军曹鱼催乳素受体PRLR1基因的克隆及其在不同盐度条件下mRNA表达差异

催乳素受体通过结合催乳素,能调节鱼体渗透压。为研究催乳素受体1(PRLR1)在高盐水体和低盐水体中对军曹鱼(Rachycentron canadum)的渗透调节作用,利用cDNA末端快速扩增(RACE-PCR)技术,获得了军曹鱼PRLR1全长cDNA序列。该基因全长为2629 bp,包含1953 bp的开放阅读框ORF,可编码650个氨基酸。氨基酸序列包含了2个纤维连接蛋白3型结构域(FN3)、保守的WS区和box1。采用qRT-PCR技术,检测不同盐度(10‰、30‰和35‰)条件下鳃、肠、体肾中PRLR1基因mRNA表达情况。结果显示,PRLR1基因在军曹鱼的各个组织中均有表达,其中鳃表达量最高,其次是肌肉、体肾和肠,而在胃、脾、脑和心脏中则微量表达。低盐组、正常组和高盐组中,PRLR1基因的表达量均为鳃最高;肠次之;体肾最低。随着盐度提高,PRLR1基因的鳃、肠和体肾组织表达量变化规律均呈逐步下降趋势。以上结果反映了军曹鱼PRLR1在渗透压器官中的功能差异性,说明PRLR1在军曹鱼渗透压调节上具有重要作用。

建筑项目现场施工的质量管理与控制研究

介绍了建筑现场施工质量控制的步骤及实施要点,阐述了建筑现场施工质量控制存在的问题,提出了相应的防治对策。

杂交石斑鱼干扰素调节因子3(IRF3)基因的克隆及表达分析

干扰素调节因子家族(IRFs)具有抗病毒、免疫调节功能,干扰素调节因子3(Interferon regulatory factor 3,IRF-3)是IRFs家族中的一员,也是免疫相关因子。为了解IRF3基因在杂交石斑鱼(Epinephelus.fuscoguttatus,♀)×清水石斑鱼(E.polyphekadion,♂)应对外源病毒刺激的免疫反应,利用cDNA末端快速扩充(Rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆了杂交石斑鱼IRF3基因,该基因cDNA全长为2 529 bp,包含5'非编码区(5'-UTR)325 bp,3'非编码区(3'-UTR)916 bp,开放阅读框(Open reading frame,ORF)1 377 bp,可编码458个氨基酸。氨基酸序列包含N-末端DNA结合区(N-terminal DNA binding region,DBD)(1-108 aa)、1个C-末端干扰素相关区(C-terminal interferon related region,IAD)(255-435 aa)及色氨酸富含区(Tryptophan rich region,SRD)(440-450 aa)3个结构域。系统进化分析结果显示,杂交石斑鱼IRF3与花鲈(Lateolabrax maculatus)IRF3聚为一支,亲缘关系较近。利用实时荧光定量PCR检测IRF3基因在杂交石斑鱼肝、胃、鳃、肠和脾脏等9种组织表达情况,以及在外周血淋巴细胞(Peripheral blood lymphocytes,PBL)的时序性表达情况,结果显示,IRF3基因在9种组织中均有表达,肝、胃和肠中的表达量明显高于其他组织,头肾表达量最低。PBL在PolyI:C刺激1 h后IRF3基因表达量逐渐升高,4 h时表达量达到最大值(约为对照组的9.3倍),8 h后逐渐下降。

基于转录组测序的方斑东风螺单核苷酸多态性位点挖掘及功能注释

【目次】了解方斑东风螺中响应LPS刺激的SNP位点及SNP所在基因SNP-Unigenes的功能。【方法】使用SOAPsnp软件分析不同时间条件下转录组数据中的SNP位点,使用GO、COG和KEGG数据库进行功能注释。【结果】转录组数据中共挖掘到673 782个SNP位点,分布在110 869条SNP-unigenes序列上。SNP类型分析表明,转换位点发生的频率远高于颠换位点,且6种单碱基变异类型中以A/G转换发生概率最大。有5866条SNP-unigenes富集到298个KEGG子集中,其中以"内吞作用"子集中富集的SNP-Unigenes最多,共富集182条。

发酵饲料对吉富罗非鱼生长的影响

罗非鱼是世界上重要的养殖经济鱼类,是联合国粮农组织向世界推广的优良养殖品种。吉富罗非鱼凭借其较快的生长速度、较高的抗病能力和肉质细嫩、味道鲜美且易于饲养的特点,已成为世界罗非鱼养殖中的主要品系之一。

新形势下党支部如何充分发挥战斗堡垒作用助推各项工作新提升

2018年以来,在党的十九大胜利召开的大好形势下,我们掘进四区党支部坚决贯彻集团公司、矿业公司各项会议精神,坚持以'保安上产,降本增效'为重点,结合单位实际,打破思想禁锢,创新管理方法,积极谋划新常态下超常规举措,通过'稳队伍、保安全、创效益、强服务'等主题活动的深入开展,助推各项工作迈向新台阶。

发酵饲料对吉富罗非鱼生长的影响

罗非鱼是世界上重要的养殖经济鱼类,是联合国粮农组织向世界推广的优良养殖品种[1]。吉富罗非鱼凭借其较快的生长速度、较高的抗病能力和肉质细嫩、味道鲜美且易于饲养的特点,已成为世界罗非鱼养殖中的主要品系之一。近年来,随着我国罗非鱼整体养殖面积的扩大、单位养殖密度的增加及养殖技术的不断提高,使得罗非鱼的产量获得了巨大增长,随之而来的是养殖环境的恶化。

湖口县双钟圩上段大堤滑塌原因分析及其防治措施

本文从圩堤基础地质结构中存在着厚度大、强度低的软弱土层和水流侧向侵蚀作用等方面来分析影响大堤稳定性的内外因素，从而找出由于淤泥土承受不住上部土层的压力而沿软弱滑动面向侧向压力小的方向滑移造成大堤毁坏的原因，并根据大堤滑塌的原因提出了几条防治措施。这对今后修建高质量的大堤具有实际的指导意义。

汽车钣金维修工艺及现代化维修设备的应用

我国工业发展领域中,汽车行业发展速度快,为我国工业领域的发展提供了重要的推动力。同时,汽车生产电子化发展趋势日益明显,此种情况下,汽车维修行业形势严峻。基于此,文章针对汽车钣金维修工业与现代化维修设备应用进行了论述。

江西彭泽马湖长江堤岸地质灾害原因初探

1996年1月3—8日在彭泽县城北东,由于长江堤岸突然大规模塌陷造成的地质灾害,损失严重。造成该次地质灾害的主要原因,是由于土洞及溶洞的塌陷,同时还诱发了土层滑坡的并发。

动能定理能在某个方向上使用吗

在力学中，牛顿第二定律及动量定理和动量守恒定律都是矢量式，可以在正交坐标系（如直角坐标系）的某一方向上采用分量形式．而动能定理中的功与能是标量，可以在某个方向上使用吗？

从导函数的变化趋势看分子间斥力与引力变化的快慢

高中物理教材以及许多物理资料中都认为分子间斥力与引力都随分子间距离增大而减小．都随距离减小而增大．但斥力随距离变化总是比引力快。贵刊2004年第10期于正荣和季亚清两位老师在《分子间的斥力一定比引力变化快吗?》一文(以下简称原文)中提出了不同的看法。如图l所示．粗线表示分子间总的作用力的变化，细线分别表示分子间斥力和分子间引力的变化，其中r0表示分子问的平衡距离。

小学体育教学中学生自主学习能力的培养

随着新课标的不断改革,体育教学也要逐渐适应时代的要求,因为社会对教育的关注度逐渐提升。在小学的教育中,人们认为学生不仅要学会基础知识,还要具有与之相对应的能力。例如独立学习能力、团队合作能力和举一反三等多项能力。体育是小学教育中的基本科目,在现代教育中教师要秉持“生本”理念,提高对学生独立学习能力以及创新能力的重视程度。

慈悲喜舍 空门不空——记什邡罗汉寺的救灾善举

人们常把出家为僧为尼称为遁入空门。空门者，一切皆空也。汶川大地震发生后，四川什邡罗汉寺遭受重创，部分房屋倒塌、房梁断裂，80％成为危房。面对突如其来的灾难，方丈素全法师带领僧众一边开展自救，一边将过往清静寺院开辟成救助点，救助更多受灾更严重的群众。空门不空，什邡罗汉寺用悲心善举践行了庄严国土、利乐有情的佛教教义。