黄芪-丹参药对对特发性肺纤维化小鼠肺泡炎症及纤维化的影响

目的研究黄芪-丹参药对对特发性肺纤维化小鼠肺泡炎症及纤维化的影响。方法从软骨环间隙向心端一次性滴注博莱霉素构建小鼠模型,60只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、地塞米松组、黄芪组、丹参组、黄芪-丹参药对组,灌胃给药28 d。HE染色观察肺组织病理学的改变;Masson染色及羟脯氨酸含有量测定观察肺组织纤维化;利用碱性水解法检测肺组织中羟脯氨酸含有量;免疫组化检测TNF-α表达;Western blot检测TNF-α、p-IKK、NF-κB、NLRP3、IL-1β蛋白表达。结果 HE、Masson染色结果显示,模型组炎症细胞增多,大量浸润肺泡组织,肺组织间质性纤维化大量增生,经黄芪-丹参药对干预后肺组织炎症细胞、间质性纤维化有所改善。与模型组比较,黄芪-丹参药对组羟脯氨酸含有量降低(P<0.01),TNF-α、p-IKK、NF-κB、NLRP3、IL-1β蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论黄芪-丹参药对可以有效抑制肺泡炎症和控制肺纤维化发展,其作用可能与抑制TNF-α、P-IKK、NF-κB、NLRP3、IL-1β表达有关。

黄芪-丹参对LPS诱导的小鼠巨噬细胞焦亡的影响

目的:研究药对黄芪-丹参对LPS诱导的小鼠巨噬细胞炎症的影响,并探讨与焦亡相关的可能性的机制。方法:CCK-8法细胞增殖检测筛选诱导RAW264.7巨噬细胞活力值的最佳LPS浓度。用最佳的LPS浓度复制炎症模型,根据文献得到最佳的含药血清浓度干预造模后的巨噬细胞,24h后收集细胞上清做ELISA检测RAW264.7巨噬细胞炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β),提取细胞蛋白用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定TNF-!、NF-κB的水平。结果:CCK-8结果显示10μg/mL LPS作用时,细胞活力值显著最强,20%为最佳含药血清浓度。ELISA结果显示:模型组IL-1β浓度显著高于空白组(P<0.01),与模型组比较,黄芪-丹参药对组可降低IL-1β的水平(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示:模型组TNF-!、NF-κB蛋白表达量均高于空白组(P<0.05,P<0.01),与模型组相比较,黄芪-丹参药对组可降低TNF-!、NF-κB蛋白表达量(P<0.05)。结论:药对黄芪-丹参抗LPS诱导巨噬细胞活化可能是通过抑制TNF-!/NF-κB信号通路的焦亡相关指标的表达水平。