基于IL-25/NF-κB信号通路探讨益气温阳护卫汤对支气管哮喘大鼠气道炎症的改善作用

目的 基于IL-25/NF-κB信号通路探讨益气温阳护卫汤对支气管哮喘大鼠气道炎症的作用机制。方法 将60只大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组(0.2 mg/mL)和益气温阳护卫汤低、中、高剂量组(1、2、4 g/mL),每组10只,采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝配制的混悬液进行腹腔注射,建立哮喘模型,造模后连续灌胃给药2周。每天观察各组大鼠饮食、精神状态、毛发、呼吸等情况,全自动血液分析仪对大鼠肺泡灌洗液(BALF)进行炎症细胞分类计数,HE染色观察肺组织病理变化,免疫组化(IHC)法检测肺组织IL-25蛋白表达,ELISA法检测BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平,RT-qPCR检测肺组织IL-25、TRAF6 mRNA表达,Western blot法检测肺组织IL-25、TRAF6、IκBα、p-IκBα、NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠肺组织严重受损,大量炎性细胞浸润;BALF中各类炎症细胞数量、IL-4、IL-5、IL-13水平升高(P<0.01),肺组织IL-25、TRAF6 mRNA表达,IL-25、TRAF6、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,益气温阳护卫汤各剂量均可改善肺组织炎性细胞浸润情况,降低BALF中各类炎性细胞数量、IL-4、IL-5、IL-13水平(P<0.05,P<0.01),降低肺组织IL-25、TRAF6 mRNA表达,IL-25、TRAF6、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达(P<0.01)。结论 益气温阳护卫汤可以抑制支气管哮喘大鼠气道炎症,其作用可能与抑制IL-25/NF-κB信号通路活化,减少炎症因子表达有关。

基于网络药理学研究益气温阳护卫汤治疗哮喘的分子机制

目的:运用网络药理学研究益气温阳护卫汤治疗哮喘的分子机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索益气温阳护卫汤中十味中药的主要化学成分,通过TCMSP、DrugBank、Swiss平台查找及预测中药化合物对应靶点,在OMIM、Malacards、CTD、Disgent数据库中搜索哮喘相关靶点,取二者交集导入Swiss平台,获得蛋白质-蛋白质相互作用网络,筛选核心作用靶点并构建益气温阳护卫汤-潜在靶点-哮喘作用网络。对核心靶点进行基因本体论(GO)分子功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。采用DiscoverStiudio软件对活性成分与靶点进行分子对接。结果:筛选得益气温阳护卫汤中主要活性成分221个,该活性成分有效靶点为770个,哮喘疾病靶点259个,取交集得核心靶点66个。GO富集分析显示靶点基因主要涉及炎症反应、凋亡过程的负调控、调控血管生成、酶结合、细胞因子活性、血红素结合、激酶活性等;KEGG信号通路主要包括癌症通路、缺氧诱导因子-1信号通路、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)信号通路、钙信号通路、核因子-κB信号通路等;分子对接结果中益气温阳护卫汤中主要活性成分与哮喘疾病靶点对接成功。结论:益气温阳护卫汤可通过调控TNF信号通路、核因子-κB信号通路、炎症介质对瞬时受体电位(Transient Receptor Potential,TRP)通道的调节,参与促炎症细胞因子的转录调节、过敏原诱导的炎症和气道上皮重塑等治疗哮喘。

基于网络药理学和分子对接技术探讨阳和汤治疗肺结节的作用机制

目的:基于网络药理学分析方法探讨阳和汤治疗肺结节的作用靶点与通路,并利用分子对接技术进行验证,为阳和汤的基础研究提供依据,并为肺结节的新药开发提供新方向。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、BATMAN-TCM数据库获取阳和汤的各中药成分的主要化合物与作用靶点,利用GenCards、OMIM数据库获取肺结节治疗相关的主要靶点,利用STRING平台构建阳和汤和肺结节相互作用靶点的蛋白质-蛋白质相互作用网络,DAVID数据库进行功能和信号通路的富集分析。将上述所得交映靶点导入Cytoscape 3.8.2软件进一步挖掘其核心蛋白质,构建成分、靶点、通路之间的相互作用网络图。最后通过AutoDock Vina软件进行分子对接验证上述结果的可行性,利用PyMOL将最佳对接结果可视化处理。结果:阳和汤治疗肺结节的核心活性成分为槲皮素、山柰酚、柚皮素、美迪紫檀素、谷甾醇等;核心靶点有信号转导因子和转录激活因子3(Signal Transducer and Activator of Transcription 3,STAT3)、JUN原癌基因(Jun Proto-Oncogene,JUN)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Akt Serine/Threonine Kinase 1,AKT1)等;主要生物学作用通路集中在癌症相关通路、磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路等。结论:本研究初步揭示了阳和汤可以通过各成分、靶点及其通路参与肺结节相关细胞的增殖、浸润与凋亡等生物过程的调控。

支气管扩张症合并亚临床动脉硬化性疾病患者的临床特征与高危因素相关性分析及中医证型分布研究

目的:分析支气管扩张症(以下简称支扩)合并亚临床动脉硬化性疾病(SAS)患者的高危因素及中医证型分布规律。方法:采用回顾性横断面调查研究方法,选取2021年7月至2022年8月因急性加重就诊于江西中医药大学附属医院的支扩患者157例,根据合并SAS与否分为支扩合并SAS组(91例)和单纯支扩组(66例)。描述两组在一般资料方面的特征,用倾向得分匹配法消除组间混杂因素,Logistic回归模型分析支扩合并SAS的影响因素,并进行中医证型分布规律的探讨。结果:在控制其他因素的条件下,FEV1%pred、FVC%pred、CD4+T、CD8+T可以显著影响支扩合并SAS的发病,为影响支扩合并SAS发病的高危因素。单纯支扩组以实证为主,痰热蕴肺证最常见,占比51.52%(34/66);支扩合并SAS组以虚实夹杂证为主,痰热阻肺兼气阴两虚证最常见,占比42.42%(28/66)。结论:肺通气功能的下降与机体免疫机能的减弱为支扩合并SAS发病的独立危险因素;与单纯支扩相比,支扩合并SAS患者的中医证型更多呈现虚实夹杂的病机特点,痰热阻肺兼气阴两虚证最常见。