连续性血液净化成功救治重症钩端螺旋体病合并多器官功能衰竭1例

钩端螺旋体病（1eptospirosiS）简称钩体病，是由致病性钩端螺旋体引起的一种呈世界范围流行的人兽共患性传染病。我国发病以南方为主，有研究表明1991-2010年我国的年发病率为0．7／10万，病死率约为10％。本文对深圳市第三人民医院血液净化中心采用连续性血液净化（continuous blood purification，CBP）救治成功的1例重症钩端螺旋体病合并多器官功能衰竭病例进行回顾性分析，报告如下。

非IgA系膜增生性肾小球肾炎患者全基因组miRNA表达谱的特征

目的了解非IgA系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)患者肾脏组织全基因组微小核糖核酸(miRNA)的表达特征及其作用。方法分别收集6例非IgA MSPGN患者肾穿组织和6例镜下病理检查正常的肾皮质组织作为Ms PGN组和NRC组,运用Illumina高通量测序技术分别对其miRNA表达水平进行检测,分析miRNA的表达差异,运用生物信息学技术初步分析其功能。结果在两组样本中具有显著性差异表达的miRNA有139种,其中在非IgA MSPGN组中表达上调的有13种,表达下调的有126种;另外还有20种miRNA在NRC组中特异性表达。生物信息学分析显示这些miRNA靶基因与系膜增生有关。结论非IgA MSPGN患者肾脏组织具有特定的miRNA表达,这些miRNA可能在疾病的发展中具有重要作用。

血液净化治疗流行性出血热合并急性肾衰竭15例临床分析

目的分析和探讨血液净化治疗流行性出血热合并急性肾衰竭的疗效。方法15例流行性出血热合并急性肾衰竭患者为研究对象,均行血液净化治疗。观察患者治疗结果,治疗前及治疗后第3、10天的血常规、肾功能、肝功能指标。结果15例患者中,14例治愈出院,1例因多器官功能衰竭死亡。住院时间(17.50±8.11)d。治疗前、治疗后第3天、治疗后第10天,患者的白细胞计数(WBC)分别为(15.87±4.78)、(11.57±3.01)、(7.24±1.42)×10^(9)/L,中性粒细胞百分比(NEUT%)分别为(72.84±11.54)%、(67.53±10.88)%、(60.76±11.59)%,血小板计数(PLT)分别为(60.73±31.31)、(111.27±43.80)、(186.6±61.71)×10^(9)/L,C反应蛋白(CRP)分别为(50.89±22.39)、(26.93±18.19)、(4.48±3.16)mg/L。患者治疗前、治疗后第3天、治疗后第10天的WBC、NEUT%、PLT、CRP比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后第3、10天,患者的WBC、CRP均低于治疗前,PLT均高于治疗前,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后第10天,患者的WBC、CRP低于治疗后第3天,PLT高于治疗后第3天,NEUT%低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。患者治疗后第3天与治疗后10天的NEUT%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。患者治疗前、治疗后第3天、治疗后第10天的血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、胱抑素C(Cys-C)、β_(2)微球蛋白(β_(2)-M)比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后第3、10天,患者的BUN、Cr、Cys-C、β_(2)-M均较治疗前降低,且治疗后第10天低于治疗后第3天,差异有统计学意义(P<0.05)。患者治疗前、治疗后第3天、治疗后第10天的血白蛋白(ALB)、谷草转氨酶(AST)比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后第3、10天,患者ALB均较治疗前升高,AST均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后第10天,患者ALB高于治疗后第3天,AST低于治疗后第3天,谷丙转氨酶(ALT)低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血液净化治疗流行性出血热合并急性肾衰竭疗效显著,能明显改善患者肾功能、肝功能及炎症反应。

高通量测序分析系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞microRNAs表达谱差异

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)外周血单个核细胞microRNA(miRNA)表达谱的差异及新miRNA序列。方法采用Solexa高通量测序技术,对SLE组与正常对照组(NC)测序,比较两组外周血单个核细胞差异性表达miRNAs,进行生物信息学分析,并对部分差异表达基因通过Real-time PCR进行验证。结果 SLE组41种新miRNAs显著差异表达,33种上调,8种下调。结论差异表达的新miRNAs在SLE的发生发展过程中起重要的调控作用,可能成为早期诊断SLE的新的生物标志物。

基于诱导多能干细胞的Alport综合征差异性表达小核糖核酸的生物信息学分析

目的寻找Alport综合征患者(AS)与健康对照者(NC)差异性表达小核糖核酸(micro RNAs)。分析差异性表达micro RNAs的生物信息学特点。方法收集AS与NC组的尿液,从尿液中分离尿肾脏管细胞,将尿肾脏管细胞诱导分化成多能干细胞(i PSCs)。运用高通量测序找出2组之间差异性表达的micro RNAs,用于预测特异性靶基因。靶基因可进行gene ontology(GO)富集与Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG)通路信号分析。确定差异性表达的micro RNAs靶基因的主要富集位点与通路信号条目。结果在2组样本中发现30个micro RNAs具有差异性表达,包括19个上调与11个下调。差异性表达micro RNAs靶基因GO富集主要聚集在细胞分子、细胞组成与细胞生物学过程。嘌呤代谢通路与丝裂原激活的蛋白激酶是主要的KEGG信号传导通路。结论差异性表达micro RNAs靶基因的生物信息学可能在AS发病机制中起重要作用,可作为潜在靶点用于AS病因的深入研究。

高通量测序筛查特发性膜性肾病患者外周血细胞microRNA的差异性表达

目的 :寻找特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)患者外周血单个核细胞小核糖核苷酸(micro RNA)的差异性表达以及发生碱基突变的难易度。方法:运用高通量测序技术分别对IMN患者和健康对照者(NC)的micro RNA进行测序,构建IMN与NC组之间micro RNA差异性表达谱。并对两组的micro RNA进行碱基编辑分析,寻找发生了碱基突变的micro RNA,比较IMN与NC组micro RNA碱基突变的难易程度。结果:通过构建表达谱,找到了has-mi R-208b、has-mi R-195-3p、has-mi R-23b-5p、has-mi R-95、has-mi R-503、has-mi R-449a、has-mi R-486-3p与has-mi R-27 8个micro RNAs最具有差异性表达。2组共同表达的41个micro RNA中,IMN比NC更容易发生碱基编辑而引起碱基突变。结论:IMN患者与健康对照者的micro RNA存在着差异性表达,差异性表达的micro RNA特异性很高,可以作为深入研究IMN发病机制的靶点。IMN患者相比健康对照者更容易发生micro RNA碱基编辑引起碱基突变,这些发生碱基突变的micro RNA可能用于解释IMN的病因基础。

类风湿性关节炎患者循环microRNAs生物标志物的筛选及鉴定

目的:分析类风湿性关节炎(RA)患者血浆中差异表达的microRNAs(miRNAs)。方法:采用mi RNA芯片检测、筛选RA患者与正常人血浆中表达有显著变化的miRNAs,并采用RT-q PCR技术对芯片数据进行验证。数据处理采用Gene Spring GX软件,t检验和方差分析用于统计学分析。结果:RA患者与正常人间存在差异的循环mi RNAs共有40个,其中18个上调,22个下调。根据循环miRNAs在芯片中表达差异的倍数和潜在的生物学价值,选取4个miRNAs进行RT-q PCR验证,候选的miRNAs与正常对照间差异有统计学意义(P<0.05),证实芯片结果可靠性。结论:RA患者体内具有差异表达的循环miRNAs,这些循环miRNAs可作为一种潜在的RA候选生物标志物。

系统性红斑狼疮患者microRNAs差异性表达谱及其靶基因的功能分析

目的利用高通量测序技术筛选系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞micro RNAs与正常对照者差异性表达micro RNAs,对差异micro RNAs靶基因进行基因本体(GO)富集与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路信号分析。方法选择20例SLE患者作为SLE组,同期20例健康体检者作为对照组。对差异性表达micro RNAs靶基因进行GO分析及KEGG分析。结果SLE组与对照组比较,表达有差异micro RNAs共有282种,其中表达上调的有206种,表达下调的有76种。生物学过程靶基因主要富集在cellular component organization or biogenesis条目中。细胞组成主要富集在cytoplasm中。分子功能主要富集在binding中。差异性表达micro RNAs靶基因共有20条显著性KEGG信号通路,主要包括Pathways in cancer、PPAR signaling pathway等信号通路。结论差异性表达的micro RNAs可能在SLE的发生发展过程中起重要的调控作用。

胃癌患者长链非编码RNA的差异表达

目的研究胃癌患者癌组织长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达。方法提取8例胃癌患者癌组织与癌旁对照样本中的总RNA,应用lncRNA表达谱芯片检测技术对两者之间差异表达的lncRNA进行分析。在差异表达倍数≥10的lncRNA中选择4个lncRNA(uc010lhn、uc.341、AK096257及BC048127),利用荧光定量RT-PCR技术在细胞水平对微阵列检测结果进行验证。结果胃癌患者癌组织与癌旁对照样本间差异表达的lncRNA共2 621个,其中1 215个表达上调,1 406个表达下调,差异表达倍数≥10的lncRNA 22个。荧光定量RTPCR验证结果显示,与正常胃上皮细胞系GES-1相比,4种lncRNA(uc010lhn、uc.341、AK096257及BC048127)在胃癌细胞系中的表达具有显著差异,与芯片检测结果一致。结论多种lncRNA在胃癌患者肿瘤组织中呈异常表达,其中uc010lhn及uc.341等在胃癌发生、发展过程中可能起一定的作用。

替诺福韦酯与恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎患者疗效和血清成纤维细胞生长因子-23水平变化

目的探讨替诺福韦酯与恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者的疗效和血清成纤维细胞生长因子-23(FGF-23)水平的变化。方法2018年1月~2019年1月我院就诊的150例CHB患者被随机分为两组,每组75例,分别给予恩替卡韦或替诺福韦治疗,观察48 w。采用ELISA法测定血清β2-微球蛋白(β2-MG)、FGF-23和胱抑素-C(Cys-C水平),使用ABI7300荧光定量PCR分析仪检测血清HBV DNA水平。结果在治疗观察结束时,替诺福韦治疗组血清HBV DNA转阴率为100.0%,显著高于恩替卡韦治疗组的93.3%(P<0.05),而两组血清HBeAg转阴率和血清谷丙转氨酶(ALT)复常率比较,无统计学差异(分别为10.1%对8.0%和96.0%对93.3%,P>0.05);替诺福韦治疗组血清HBV DNA水平为(0.9±0.5)Ig IU/mL,与恩替卡韦治疗组的(1.3±0.6)Ig IU/mL比,无统计学差异(P>0.05),两组血清ALT和AST水平比较,也无统计学差异(P>0.05);替诺福韦治疗组血清β2-MG水平为(1.6±0.5)mg/L,显著高于恩替卡韦治疗组【(1.4±0.5)mg/L,P<0.05】,血清FGF-23水平为(382.2±61.3)pg/mL,显著高于恩替卡韦治疗组【(363.2±53.3)pg/mL,P<0.05】,血清Cys-C水平为(3.0±0.8)mg/L,显著高于恩替卡韦治疗组【(2.8±0.8)mg/L,P<0.05】。结论恩替卡韦和替诺福韦酯治疗CHB患者均能获得良好的近期疗效,但替诺福韦治疗能升高血清β2-MG、FGF-23和Cys-C水平,其意义和对远期疗效的影响还需要进一步评估。

基于诱导多潜能干细胞的Alport综合征蛋白质组学的生物信息

目的:探讨Alport综合征(AS)差异性表达蛋白质主要参与的GO富集分析和KEGG通路,为AS的进一步机制研究奠定基础.方法:10例AS患者与10例健康对照者(NC)作为实验对象.分别收集实验参与者尿液200 m L,并从尿液中分离尿肾脏管细胞,将尿肾脏管细胞诱导分化成多潜能干细胞(i PSCs),运用i TRAQ技术找出2组之间差异性表达蛋白质,对其进行生物信息学分析.结果:在2组样本中发现35种蛋白质具有差异性表达,包括18种上调与17种下调.差异性表达蛋白质GO富集主要聚集在细胞分子、细胞组成与细胞生物学过程.嘌呤代谢通路与丝裂原激活的蛋白激酶是主要的KEGG信号传导通路.结论:差异性表达蛋白质的生物信息学有助于AS发病机制研究,可作为机制研究参考和补充.

膜性肾病差异性表达microRNA的靶基因功能分析

目的：探讨膜性肾病（MN）差异性表达microRNA的靶基因主要参与的Gene Ontology（GO）富集与Kyo-to Encyclopedia Genes And Genomes（KEGG）通路．方法：100例MN患者与100例健康对照者（NC）作为实验对象．100例NC随机分成10组（NC1～10），每组10人．同样100例MN随机分成10组，每组10人（MN1～10）．分别从实验参与者静脉采取全血10 mL，来源于静脉血的单个核细胞用于提取RNA．总RNA以组为单位等量混合用于高通量技术测序（high-throughput sequencing），对RNA测序结果进行长度分布，基因比对，RNA分类注释，RNA特有序列及其公共序列分析后，获得小核糖核酸（microRNA）进行MN与NC差异性表达分析来寻找显著表达microRNA．应用相关的软件对差异性表达的microRNA进行靶基因预测，靶基因借助功能注释软件对其参与的生物过程进行GO富集及KE GG通路分析．结果：靶基因在GO富集分析中主要集中在细胞器官组成，细胞膜组成，离子结合，生物代谢过程，生物调节过程等．靶基因在KE GG通路分析中主要参与嘌呤代谢通路，代谢产物生物合成，癌症通路，蛋白激酶信号通路等．结论：MN与NC之间存在着显著差异性表达microRNA．差异性表达的microRNA的靶基因参与的GO富集与KE GG通路可能与MN的发病机制与临床症状有着密切的联系．

Alport综合征肾脏损害的研究进展

Alport综合征（Alport syndrome,AS）,是一种主要表现为血尿、肾功能进行性减退、神经性耳聋和眼部异常的遗传性肾小球基底膜（glomerular basement membrane,GBM）疾病.AS最终将进展为终末期肾病（endstage kidney disease ES-RD）,需要肾脏替代治疗.本文综述了AS肾脏损害的发病机制、临床表现、诊断和治疗,重点阐述了AS与足细胞病理变化的关系以及AS治疗现状.

基于诱导多潜能干细胞Alport综合征的蛋白质组学研究

目的筛选并鉴定Alport综合征(AS)患者与健康对照者(NC)差异性表达蛋白质,寻找AS的生物标记物。方法收集AS组与NC组的尿液,从尿液中分离尿肾脏管细胞,将尿肾脏管细胞诱导分化成多潜能干细胞(i PSCs)。运用i TRAQ技术找出两组之间差异性表达蛋白质。采用Western blot检测差异蛋白质。结果共鉴定出12 600条特有肽段序列,对应3 470种非冗余蛋白质。在两组样本中发现383种蛋白质具有差异性表达,其中差异2倍以上的蛋白质有35种,包括18种上调蛋白质和17种下调蛋白质。Western blot检测KRT14、TUBA1A、PAPSS1、UTF1、SF3B14、MTHFD2等6种差异蛋白质在各组中的表达结果与i TRAQ检测结果一致。结论筛选得到与AS发病相关的差异蛋白质,可以作为AS早期诊断和治疗的生物标记物。