不同产地杜仲药材水提液高效液相色谱指纹图谱及其共有模式

目的：采用高效液相色谱法建立不同产地杜仲药材水提液指纹图谱。方法采用 SinoChrom ODS-BP （250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^－1,检测波长为230 nm,柱温25℃。结果确定14个共有峰,10批不同产地杜仲药材水提液的色谱指纹图谱整体相似度在0.592-0.986,并得出对照指纹图谱。结论该指纹图谱方法简便、重复性好,为有效地控制杜仲药材的内在质量提供科学依据。

枳椇子对肝纤维化大鼠脂质过氧化的动态影响

将96只肝纤维化模型大鼠随机分为三组。自然恢复组口服羧甲基纤维素钠(CM C-N a)溶液;对照组口服秋水仙碱-CM C-N a混悬液;治疗组口服枳子-CM C-N a混悬液,用药后于不同时间点观察各组肝细胞结构变化及纤维化程度,检测肝脏内丙二醛(M DA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果与自然恢复组相比,治疗组细胞结构趋于正常,无炎性细胞浸润及气球样变;胶原纤维增生呈局限性,肝组织恢复良好;M DA含量明显降低,SOD活性明显升高。证实枳子能明显加速肝脏修复速度,减轻肝纤维化程度,降低脂质过氧化对肝组织的损伤,加快肝组织恢复。

三七总皂苷壳聚糖缓释微球的制备及体外释放特性研究

目的制备三七总皂苷壳聚糖缓释微球,并对其体外释药特性进行研究。方法采用乳化交联法制备三七总皂苷壳聚糖微球,以粒径分布、包封率、载药量及体外释药速度为评价指标,考察处方因素对壳聚糖微球的影响。并采用正交设计L9(34)对处方进行优化。结果微球的平均粒径为(4.2±0.3)μm,包封率为(28.58±2.76)%(n=3),载药量为(17.15±1.65)%(n=3)。结论通过优化处方和制备工艺,采用乳化交联法制备的三七总皂苷壳聚糖缓释微球,其体外释药具有明显的缓释作用且制备工艺简单。

三七总皂苷缓释微球体外释药研究

目的:寻找一种合适的三七总皂苷缓释微球的体外释放度测定方法。方法:采用直接释药法与透析释药法测定三七总皂苷缓释微球在pH=7.4的磷酸盐缓冲液与0.1mol.L-1的盐酸溶液中释放度。结果:直接释药法可反映微球的体外释放情况。结论:直接释药法是最适合模拟三七总皂苷缓释微球体外释放度的方法。

桑葚花色苷对小鼠的抗疲劳作用

目的:研究桑葚花色苷对小鼠的抗疲劳作用,并探讨其抗疲劳机制。方法:经制备、分析后,评价桑葚花色苷样品抗氧化活性;将小鼠随机分为安静组、有氧运动组、模型组、低、中、高剂量组(桑葚花色苷剂量分别为100、200、400 mg/kg),进行负重游泳。连续灌胃4周后,检测小鼠的血乳酸(Lac)、血尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)等疲劳相关生化指标和氧化应激指标,评价桑葚花色苷的抗疲劳作用;并通过测定核因子E2相关因子(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)m RNA相对表达水平,初步探讨桑葚花色苷抗疲劳机制。结果:经过纯化、富集后,桑葚花色苷中活性成分含量升高,并显示出与维生素C相当的抗氧化能力。与模型组比较,低、中、高剂量桑葚花色苷可显著延长运动时间(P<0.05),提升运动耐力;中、高剂量桑葚花色苷显著降低小鼠血液中Lac和BUN含量、CK和LDH活性(P<0.05),提高了骨骼肌中SOD和GSHPx活性,降低了ROS、MDA、8-OHdG含量(P<0.05),同时,Nrf2/HO-1 mRNA的表达显著(P<0.05)增加。结论:桑葚花色苷可通过调控Nrf2/HO-1信号途径,提高机体的抗氧化能力,以发挥抗疲劳作用。

筒鞘蛇菰乙酸乙酯萃取物的止血作用

目的探讨筒鞘蛇菰乙酸乙酯萃取物止血作用及其机制。方法Wistar大鼠50只,随机分为空白对照组、云南白药组和筒鞘蛇菰乙酸乙酯萃取物小、中、大剂量组,每组10只,连续给药5d,给药结束后分别测定大鼠血浆复钙时间(PRT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)。结果与空白对照组比较,筒鞘蛇菰乙酸乙酯萃取物能显著缩短大鼠PRT、TT、PT、APTT(P<0.01或P<0.05),大、中剂量组大鼠FIB升高(P<0.01),TXB2显著升高,6-keto-PGF1α含量下降(P<0.01或P<0.05),TXB2/6-keto-PGF1α比值显著升高(P<0.01)。结论筒鞘蛇菰乙酸乙酯萃取物主要通过激活内源性和外源性凝血系统中的多种凝血因子,调节TXB2、6-keto-PGF1α水平,发挥止血作用。

筒鞘蛇菰止血有效部位的筛选

目的:筛选筒鞘蛇菰止血有效部位。方法:用95%乙醇对筒鞘蛇菰原药材进行回流提取,残渣加水煎煮,合并滤液,浓缩。依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对浓缩液进行萃取,分别制得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水相部位。通过测定凝血、出血时间和体外血浆复钙时间,考察其止血活性部位。结果:与空白对照组比较,乙酸乙酯部位能显著地缩短凝血、出血时间和体外血浆复钙时间(P<0.01)。正丁醇高剂量组也可缩短小鼠的出血时间和体外血浆复钙时间(P<0.05),但对小鼠凝血时间影响不显著(P>0.05)。石油醚部位和水部位组对小鼠凝血、出血时间和体外血浆复钙时间均无明显影响(P>0.05)。结论:筒鞘蛇菰中具有止血作用的活性成分主要集中在乙酸乙酯部位。

高效液相色谱一测多评法同时测定木丹颗粒中9种成分

目的建立高效液相色谱一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定木丹颗粒中巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量。方法采用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃;流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1);检测波长分别为280 nm[检测巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素和去氢紫堇碱]和254 nm(检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素)。以延胡索乙素为内参物,建立其他8种成分的相对校正因子,测定含有量。结果巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素分别在4.91~98.20,3.57~71.40,1.03~20.60,2.39~47.80,1.62~32.40,1.79~35.80,1.06~21.20,0.58~11.60,1.86~37.20μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率(RSD)分别为100.01%(0.73%)、99.17%(0.59%)、97.93%(0.78%)、98.81%(0.98%)、98.78%(0.43%)、97.74%(0.60%)、96.99%(0.62%)、96.96%(0.46%)和99.28%(0.37%),一测多评法所得结果与外标法结果无明显差异。结论该方法操作便捷、结果准确,重复性好,可用于同时测定木丹颗粒中巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素含量。

天英灌肠液薄层鉴别

目的:建立天英灌肠液的薄层色谱鉴别方法,为制定其质量控制标准提供试验依据。方法:采用薄层色谱鉴别法鉴别处方中的主药。蒲公英鉴别中以36%的醋酸为展开剂;丹参鉴别中以氯仿-丙酮-甲酸(4∶2∶1)为展开剂;野菊花鉴别中以醋酸乙酯-丁酮-氯仿-甲酸-水(15∶15∶6∶4∶1)为展开剂。结果:处方中的蒲公英、丹参、野菊花3味药的薄层色谱具有鉴别特征,斑点清晰。结论:薄层色谱鉴别方法简便可靠,专属性、重复性好,可作为天英灌肠液的质量控制指标之一。

南苜蓿总皂苷改善2型糖尿病大鼠糖代谢的作用机制

目的探讨南苜蓿总皂苷(TSMP)对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖代谢的作用及其可能的机制。方法采用高脂加小剂量链脲佐菌素诱导T2DM大鼠模型,将大鼠分为对照组、模型组、二甲双胍组(0.2g/kg)、TSMP高剂量组(1.4g/kg)、TSMP低剂量组(0.7g/kg),连续给药4周,末次给药后测定胰岛素抵抗指数(IRI)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、肝糖原、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、游离脂肪酸(FFA)、瘦素(Leptin)水平,以及丙酮酸激酶(PK)、己糖激酶(HK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)、果糖-1,6-二磷酸酶、葡萄糖激酶(GK)的活性;检测肝脏组织中G-6-Pase、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)蛋白的表达。结果与模型组比较,给予高剂量(1.4g/kg)TSMP能降低T2DM大鼠IRI、FBG、HbA1c、IL-1β、TNF-α、FFA、Leptin水平,升高肝糖原水平,提高PK、HK、GK的活性,降低G-6-Pase、果糖-1,6-二磷酸酶的活性,并下调肝脏组织中G-6-Pase、PEPCK蛋白表达水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TSMP可以改善T2DM大鼠的糖代谢紊乱,可能与其促进葡萄糖的利用,减轻炎性反应和改善胰岛素抵抗有关。

南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠胰腺功能保护作用的研究

目的:观察南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠胰腺的保护作用。方法:建立2型糖尿病大鼠模型,除对照组外,将成模大鼠分为模型组、二甲双胍组(0.2 g/kg)、南苜蓿总皂苷组(2.8 g/kg、1.4 g/kg),分别治疗4周。末次给药后测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、肝糖原,取全血测定血液流变性。取胰腺组织匀浆测定SOD、MDA、GSH-Px、IL-1β、TNF-α。提取胰腺组织总蛋白,采用蛋白免疫印迹法检测胰岛内质网应激蛋白(CHOP、JNK)和VEGF蛋白的表达。结果:与模型组比较,南苜蓿总皂苷2.8 g/kg、1.4 g/kg能降低大鼠的FBG、FINS、Hb A1c水平;降低糖尿病大鼠胰腺组织MDA、IL-1β、TNF-α的水平,升高SOD、GSH-Px和肝糖原含量。2.8 g/kg组能改善糖尿病大鼠的血液流变性,减少CHOP、JNK蛋白的表达;增加VEGF蛋白的表达。结论:南苜蓿总皂苷保护T2DM大鼠胰腺的保护作用,其机制可能与抑制胰腺的氧化应激和炎症反应,减轻胰岛细胞凋亡发生,改善微循环有关。

竹节参皂苷Ⅴ对PC-12细胞损伤的修复作用

目的 观察竹节参皂苷Ⅴ对损伤的PC-12细胞的修复作用以及对淀粉样前体蛋白样蛋白-1（APLP-1）和去整合素-金属蛋白酶-17（ADAM-17）基因表达的影响.方法 利用β-淀粉样蛋白25-35（Aβ25-35）诱导制备PC-12细胞损伤模型,噻唑蓝（MTT）法测定竹节参皂苷Ⅴ对受损PC-12细胞增殖活力的恢复作用,实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定竹节参皂苷Ⅴ对PC-12细胞中APLP-1、ADAM-17基因表达的影响.结果 终质量浓度为15 μmol/L的Aβ25-35在作用于PC-12细胞12、24、48 h时,对细胞增殖的抑制率分别为13.15％、22.80％和9.80％,与空白组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.在Aβ25-35诱导的细胞损伤模型（24h）的基础上,竹节参皂苷Ⅴ作用6、12、18、24h时PC-12细胞的增殖率与模型组比较分别增高5.53％、7.74％ （P＜0.05）、9.60％（P＜0.01）和2.07％.模型组中PC-12细胞中APLP-1基因的相对表达量较空白组明显上调,ADAM-17基因的相对表达量则明显下调;竹节参皂苷Ⅴ给药组中APLP-1基因的相对表达量相对模型组明显下调,而ADAM-17基因明显上调.结论 竹节参皂苷Ⅴ对Aβ25-35诱导损伤的PC-12细胞有修复作用,推测是通过下调APLP-1的相对表达量,使淀粉样前体蛋白（APP）低量表达,并上调ADAM-17基因的相对表达量,使APP朝着非Aβ生成途径降解的方式来修复损伤的PC-12细胞.

竹节参多糖抗血栓活性的研究

目的 观察竹节参多糖的抗血栓活性.方法 采用大鼠腹主动脉插管取血,体外试管法测定竹节参多糖对大鼠血凝块的溶解作用;采用比浊法测定竹节参多糖对人血小板聚集的影响;采用胶原蛋白-肾上腺素诱导的血栓形成模型和血瘀证大鼠模型,观察竹节参多糖的体内抗血栓作用并探讨其作用机制.结果 体外研究时,低、中、高剂量竹节参多糖对血凝块的溶解率分别达到53.08%、57.03%和68.15%,对人血小板聚集的抑制率则分别为6.78%、29.49%和40.30%,与对照组比较差异均有统计学意义,且其血凝块溶解作用和血小板聚集抑制作用均与给药剂量呈正相关.肺血栓小鼠模型中,竹节参多糖低、中、高剂量组小鼠死亡数分别为2、2、1只,小鼠偏瘫数分别为5、4、4只,肺指数则分别为1.89%、1.71%和1.43%,均表现出显著的抗血栓作用.低、中、高剂量竹节参多糖作用于血瘀证大鼠模型后,血小板最大聚集率分别降至45.62%、41.33%和31.40%,体现了明显的抗血小板聚集作用;与模型组比较竹节参多糖低剂量组对组织型纤维溶酶激活剂（t-PA）、6-酮前列腺素F1α（6-Keto-PGF1α）的含量无明显影响,中、高剂量组可显著升高t-PA、6-Keto-PGF1α的含量,竹节参多糖各组均可显著降低大鼠体内血栓素B2（TXB2）、纤溶酶原激活物抑制因子（PAI）的含量.结论 竹节参多糖高、中、低剂量组均有显著的体外和体内抗血栓活性,其抗血栓作用可能与影响血小板功能和提高纤溶系统活性有关.

大鼠在体肠回流法研究三七总皂苷壳聚糖微球的吸收行为

目的:研究三七总皂苷壳聚糖微球在大鼠小肠的吸收行为。方法:采用乳化交联法制备三七总皂苷壳聚糖微球。大鼠在体肠回流法研究微球在大鼠小肠的吸收行为。结果:当微球中药物浓度从0.213 8g.L-1逐渐增至0.855 4g.L-1时,累积吸收量从(0.064±0.003)mg.cm-2增至(0.391±0.017)mg.cm-2,但当浓度继续增至1.069 2g.L-1时,累积吸收量缓慢增至(0.402±0.014)mg.cm-2,呈现饱和现象。加入空白微球,累积吸收量明显减少(P<0.01);降低Na+浓度,加入P-糖蛋白抑制剂(盐酸维拉帕米)和能量抑制剂(2,4-二硝基苯酚,DNP),对累积吸收量没有显著影响。结论:三七总皂苷壳聚糖微球在大鼠小肠的吸收是以被动扩散的吸收方式为主,以其他吸收方式为辅。

竹节参地上部分总苷成分对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用

目的观察竹节参地上部分提取物中所含总件成分对大鼠佐剂性关节炎模型的药理活性。方法取24只雄性Lewis大鼠随机分为正常对照组、模型组、竹节参地上部分总苷组和地塞米松组,每组6只。后3组通过在大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂诱发佐剂性关节炎建模,实验中进行大鼠佐剂性关节炎评分,分别对各组大鼠体重变化趋势、脾脏指数、胸腺指数进行测定;在实验结束时,采用放射免疫法检测大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量。结果造模后28 d,竹节参地上部分总苷组佐剂性关节炎指数较模型组明显降低(7. 81比9. 522,P <0.05)造模后大鼠体重出现下降,但19,23 ,28 d,竹节参地上部分总苷组大鼠体重与模型组相比已无显著差异(322. 50 比 314.56,300. 46 比 328. 88,310. 37 比 325. 69,P >0. 05)。与模型组比较,竹节参组极显著下调大鼠脾脏指数(0. 236比0. 302,P<0.01 )和胸腺指数(0. 104比0. 132,P<0.01)。竹节参总苷组大鼠血清 TNF(0. 276 比 0.369,P<0.01 )和 IL-1β水平(0. 088 比 0. 147,P<0. 01)与模型组相比均显著降低。结论竹毎参地上部分中所含总苷可以改善弗氏佐剂所致大鼠多发性关节炎,可能与抑制血清炎性细胞因子TNF、IL-1β的分泌有关.

复方竹节参片对模型家兔血清炎性因子表达的影响

目的:研究复方竹节参片对骨性关节炎模型家兔的药理作用及临床意义。方法:取40只6个月左右月龄家兔随机分为A组(正常对照组)、B组(模型对照组)、C组(复方竹节参片给药组)、D组(对照药物组)。第1周全部采用正常喂养方式,第2周开始B、C、D 3组进行Hulth造模,构建家兔骨性关节炎的动物模型,术后1周内注射青霉素预防感染。C组第4周开始双氯芬酸钠灌胃,持续2周;D组第4周开始中药灌胃,持续2周。第6周开始分组进行家兔模型的心脏取血,采用放射免疫法检测其血清中白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF)水平。采用Autodock分子对接预测筛选复方竹节参片中的炎性因子靶向抑制活性成分。结果:与A组相比,B组上述各因子水平明显升高;C、D 2组与B组相比,2组上述因子水平明显下降,具有非常显著的差异(P<0.01)。C、D 2组相比差异无显著性(P>0.05)。分子对接中与阳性对照相比,26个竹节参皂苷配体、36个白芍苷和101个甘草酚与TNF的结合能低于阳性对照;18个白芍苷、26个甘草酚与IL-1的结合能低于阳性对照,20个白芍、45个甘草酚与IL-8的结合能低于阳性对照,表明这些配体分子能与IL-1或IL-8结合形成稳定的复合物从而产生疗效。结论:复方竹节参片对于模型家兔血清中炎性因子有一定的抑制作用,且与对照药物组实验数据相比差异无显著性。具有一定的临床参考价值。预测复方竹节参片处方中对TNF起主要抑制作用的成分为竹节参、对IL-1和IL-8起主要抑制作用的成分为白芍和甘草,三者协同作用于TNF、IL-1和IL-8产生治疗骨性关节炎的疗效。