三叶青叶黄酮类化学成分的UPLC-MS/MS定性分析及HPLC含量测定

目的定性、定量分析三叶青叶黄酮类化学成分。方法采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)对三叶青叶化学成分进行鉴定,色谱柱为C_(18) Luna Omega(2.1 mm×100 mm,1.6μm);流动相:乙腈-水(50∶50,V/V);流速0.4 mL/min;柱温35℃;进样量5μL;全扫描模式扫描。采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定三叶青叶中5种碳苷黄酮的含量。色谱柱为Ultimate XB C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.2% H_3PO_4(10∶90,V/V);流速为1 mL/min;检测波长为350 nm;室温;进样量20μL。结果三叶青叶中共鉴定出6个化学成分,其中5个黄酮成分的保留时间、光谱图和质谱碎片离子信息与对照品一致,分别为异荭草素、荭草素、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、异牡荆素。HPLC测定8个不同产地来源的样品中上述5种成分含量,各成分线性关系良好(r> 0.9997),加样回收率在95.0%～105.0%之间。结论三叶青叶子中主要含2类碳苷黄酮,即荭草素类和牡荆素类;本研究建立的方法可定性、定量分析分析三叶青叶中主要化学成分,可用于控制药材质量。