艾滋病患者血清免疫球蛋白及补体的变化及其临床意义

目的测定AIDS患者抗病毒治疗前、后体内血清免疫球蛋白及补体水平,并探讨其临床意义。方法采用免疫散射比浊法测定50例未治疗患者及55例HARRT治疗患者血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA和补体C3水平,同时选取30例健康体检者为对照。结果未治疗组患者除IgM外,IgG、IgA水平均显著高于健康对照,补体C3则低于健康对照,差异具统计学意义(P<0.05);治疗组患者IgG、IgM、IgA水平较未治疗组显著下降,而补体C3显著升高,差异均具统计学意义(P<0.05);IgG、IgM、IgA水平与CD4+T细胞计数显著负相关,与病毒载量正相关,而补体C3则与CD4+T细胞计数正相关,与病毒载量负相关。结论 AIDS患者体液免疫功能紊乱,血清免疫球蛋白及补体变化与病情明显相关,动态测定免疫球蛋白及补体水平,对于判断病情、衡量治疗效果和预后的估计有重要价值。

肝损伤酶活性联合检测在肝胆疾病诊断中的相关分析

目的探讨肝损伤酶活性联合检测在肝胆疾病诊断中的临床意义。方法对健康对照组36例和各类肝胆疾病组204例患者的丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、腺苷脱氨酶、线粒体天门冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、5′-核苷酸酶活性进行测定与分析。结果肝胆疾病组丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、腺苷脱氨酶、线粒体天门冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、5′-核苷酸酶活性均高于健康对照组(P<0.01)。结论肝损伤酶活性联合检测有利于肝胆疾病的鉴别诊断及疗效观察。

实时荧光PCR检测儿童肺结核粪便中Mtb-DNA的效果评价

目的应用实时荧光PCR快速检测肺结核患儿粪便中Mtb-DNA,并初步评估其临床效果。方法收集肺结核住院儿童粪便标本76份,应用实时荧光PCR检测Mtb-DNA,检测结果与20例其他呼吸系统疾病患儿的粪便实时荧光PCR检测Mtb-DNA、76例粪便抗酸杆菌涂片检查以及41例患儿痰标本的涂片和(或)培养、实时荧光PCR检测结果进行比较。结果粪便实时荧光PCR检测敏感度达到23.68%(18/76),特异度为100.00%(20/20),肺结核患儿粪便PCR阳性率[23.68%(18/76)]明显高于涂片阳性率[6.58%(5/76)],41例患儿中痰涂片和(或)培养阳性例数(15例)和痰PCR检测阳性例数(18例)高于粪便PCR检测阳性例数(11例)。结论实时荧光PCR检测儿童粪便Mtb-DNA,是一种特异度高、比较敏感、非侵入性且相对安全的儿童肺结核快速诊断方法。

艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染的实验室检测特征

目的探讨艾滋病合并播散性马尔尼菲青霉菌感染的临床实验室特征。方法回顾56例艾滋病合并播散性马尔尼菲青霉菌感染者的实验室资料并对其进行统计学分析。结果艾滋病合并播散性马尔尼菲青霉菌感染者,外周血在沙氏琼脂培养基中马尔尼菲青霉呈酵母相(37℃)或菌丝相(25℃);外周血细胞计数三系均降低;外周血T淋巴细胞亚群计数CD4细胞显著减少(<50个/μL);T总淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞、杀伤性T淋巴细胞均异常;肝功能受损患者(占63%),血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)升高,血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)延长。结论艾滋病中晚期患者如出现相关的临床症状及实验室特征,提示马尔尼菲青霉菌感染,以便早诊断、早治疗。

唾液中多项生化成分的相关分析

目的通过同步检测唾液和血清中多项生化成分,探讨唾液与血清中相同成分的相关性,并进一步探讨唾液生化成分测定的临床意义。方法采用酶比色法和免疫比浊法测定18例健康体检者与22例患者唾液和血清的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白(Myo)、尿酸(UA)、尿素(Urea)、肌酐(Cr)、钙(Ca)、镁(Mg)、磷(P)、钾(K)、钠(Na)、氯(CL)水平,并进行统计学分析。结果唾液与血清中的各项生化指标按相关性从大到小依次排列为:Cr、Urea、AST、cTnI、UA、CL、K、Na、LDH、CK-MB、HBDH、CK、Myo、Mg、P、Ca;心功能异常组唾液AST、CK、CK-MB明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01),cTnI明显低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01);肾功能异常组唾液Cr、Urea明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论心功能异常患者唾液AST、CK、CK-MB、cTnI与病情明显相关,肾功能异常患者唾液Cr、Urea与病情明显相关,唾液AST、CK、CK-MB、cTnI、Cr、Urea测定有望成为新的疾病诊断方法。

Ⅰ型人类免疫缺陷病毒的核酸异质性及准种特点的研究

目的研究Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)膜蛋白基因(env)的准种与变异特点。方法采用巢式PCR方法对5例艾滋病患者血浆HIV-1env基因C2￣V3区进行PCR扩增,产物经纯化后克隆至pMD-18T载体中,每例患者分别挑取5￣8个克隆,共34株,完成阳性克隆的鉴定、抽提纯化和测序,将获得的DNA序列及氨基酸序列进行分析,并计算其氨基酸同源替换率(ds)与非同源替换率(dn)的比值。结果同一患者体内HIV准种株平均为83.5%,各克隆株之间的核苷酸同源性在88%￣99%之间;不同患者之间的核苷酸同源性在75%￣91%;34株序列的V3区平均变异频率明显高于C2￣C3区(P<0.05);而V3区和C2￣C3区的ds/dn比值均>1。结论艾滋病患者体内有大量HIV准种存在,基因的变异在V3区发生较频繁,免疫选择压力在该区变异中不起主要作用。

慢性乙型肝炎患者肝再生酶变化与肝纤维化的相关研究

目的探讨慢性乙型肝炎(下称乙肝)患者血清中β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)、单胺氧化酶(MAO)、胆碱酯酶(CHE)的活性变化与肝纤维化的相关性。方法采用速率法对健康对照组和慢性乙肝疾病组的NAG、MAO、CHE活性进行测定,应用肝穿刺活检对慢性乙肝患者肝组织的纤维化活动度进行观测。结果慢性乙肝组各种酶的活性与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。NAG、MAO与肝纤维化程度呈正相关,CHE与肝纤维化程度呈负相关。结论NAG、MAO、CHE与肝纤维化程度相关性显著,可以作为检测肝纤维化程度的良好指标。

利福平对血清胆红素测定的干扰探讨

目的探讨利福平对血清胆红素测定的干扰。方法用亚硝酸钠氧化法测定血清总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)浓度。结果利福平对TBIL、DBIL测定有正相干扰作用,干扰的程度与加入血清中的利福平的浓度呈线性关系。结论利福平对亚硝酸钠氧化法测定TBIL、DBIL可产生光学干扰。

青蒿琥酯及二氢青蒿素逆转耐药结核分枝杆菌的初步研究

【目的】了解青蒿素类中药单体(二氢青蒿素、青蒿琥酯)单独或联合利福平(RFP)及异烟肼(INH)对耐药结核分枝杆菌的作用,初步研究此类单体是否具有逆转细菌耐药性的作用。【方法】刃天青显色法判断各中药单体是否有抑菌或杀菌作用;MB/BACT系统(生物梅里埃)检测RFP或INH联合中药单体是否有逆转细菌耐药的作用。【结果】单独使用时各单体均不能杀灭结核分枝杆菌;RFP联合青蒿琥酯(200μg/mL)或二氢青蒿素(200μg/mL)可使11株耐RFP菌株中的9或6株变为敏感,敏感率分别为82%或55%;INH联合上述中药单体则亦可使11株耐INH菌株中的10或7株变为敏感,敏感率分别为90%或64%。【结论】青蒿琥酯及二氢青蒿素有较强的协同相应抗结核药或逆转结核菌的耐药性的作用,但青蒿琥酯敏感率较二氢青蒿素更高。

检测丙氨酸转氨酶及天门冬氨酸转氨酶在病毒性肝炎中的临床意义

目的探讨慢性乙型病毒性肝炎患者血清天门冬氨酸转氨酶与丙氨酸转氨酶比值和相关肝病的关系。方法187例慢性乙型病毒性肝炎患者,同时进行血清天门冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的检测,对比分析血清AST/ALT比值与肝脏病理诊断。结果慢性乙型病毒性肝炎患者中活动性肝硬化患者血清AST/ALT比值明显高于正常人及慢性肝炎轻度、中度和重度患者,肝纤维化程度S4期以上的患者血清AST/ALT比值高于S0～S3期的患者,差别均有显著性意义。结论血清AST/ALT比值对肝脏纤维化程度的判断及辅助诊断肝硬化有一定的指导意义。

慢性乙肝患者血清HBV DNA载量与肝组织炎症活动度及纤维化的相关性研究

目的 探讨HBVDNA的表达与肝组织炎症活动度及纤维化的相关性。方法 应用定量PCR技术测定了 170例慢性乙型肝炎 (乙肝 )患者的血清HBVDNA ,同时应用肝穿刺活检对肝组织的炎症活动程度及纤维化活动度进行了观测。结果 慢性乙肝患者血清HBVDNA载量越高 ,其肝组织的炎症活动度越强 ,且HBVDNA阳性的慢性乙肝患者发生肝纤维化的比例明显增加。结论 HBV复制是启动慢性乙肝患者肝组织病变的一大因素。

结核多肽特异性细胞内因子多色流式分析

目的建立能同时检测CD3、CD4、CD8表型及胞内因子IFN-γ、IL-4、TNF-α的多色胞内细胞因子染色流式细胞术;评价六条结核特异性多肽的性能。方法将结核患者组及健康对照组的PBMC,用结核特异性多肽或PMA刺激培养后,通过胞内细胞因子流式检测术,收集荧光标记阳性的淋巴细胞等;从而确定各亚群IFN-γ、IL-4、TNF-α阳性细胞的数量及百分率,得出两组间及各多肽间的性能差异。结果 1.各多肽均能刺激活化结核患者PB-MC产生IFN-γ等细胞因子,但百分率较低;IFN-γ及IL-4多数小于1%,而TNF-α则在大约10%左右。与对照组比较,IFN-γ及TNF-α的均值分别高1-12倍或1-3倍,IL-4+/CD4+T淋巴细胞活化率的倍数较小,而IL-4+/CD8+的倍数则较大;2.不同多肽刺激产生细胞内因子的比较:除多肽H256与H210活性能刺激CD4+亚群分泌更多IFN-γ外,其余各多肽刺激产生因子的性能无统计学差异;3.对于IFN-γ及IL-4因子,各多肽均无CD4+或CD8+亚群差异,但各多肽均可刺激CD8+细胞亚群产生更多TNF-α;4.双阳性(IFN-γ及TNF-α阳性)多功能T细胞分析,经多克隆刺激剂(PMA)活化后,IFN-γ+/CD4+及IFN-γ+/CD8+T细胞分别有83.0%及79.9%(均值)为双阳性细胞,而经多肽刺激后则为68.1%及65.7%(均值)。结论多色流式胞内因子染色能很好地检测特异性多功能细胞;所用的6条多肽均能活化结核特异性淋巴细胞产生细胞因子,但细胞因子的活化率较低。

检测血清前白蛋白在肺结核治疗中的临床意义

目的探讨通过检测血清前白蛋白(PA)及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)在发现肺结核患者治疗过程中早期肝损害的临床应用价值。方法采用免疫透射比浊法分别检测110例健康体检者和107例肺结核患者治疗前后血清前白蛋白及谷丙转氨酶、谷草转氨酶。结果在肺结核患者治疗前与健康体检者的血清PA检测结果相比较无显著性差异(P>0.05);经抗结核治疗后血清前白蛋白的检测结果降低(P<0.05),尤其随着疗程的延长血清PA水平降低更为显著(P<0.01);在抗结核治疗早期血清前白蛋白的阳性率为82%,高于ALT和AST的阳性率(32%)。结论血清前白蛋白检测可作为抗结核治疗后的常规肝功能指标,尤其适用于抗结核治疗后肝功能早期损害程度的判断。

肺结核患者粪便TB-DNA提取方法的应用比较

目的比较煮沸裂解法、酚/氯仿法和试剂盒法3种DNA提取法在肺结核患者粪便标本中检测TB-DNA的应用效果。方法收集肺结核患者粪便标本,分别用煮沸裂解法、酚/氯仿法和试剂盒法提取DNA,比较其TB-DNA实时荧光聚合酶链反应(PCR)扩增的检测阳性率及扩增效率,分析不同方法的差异。结果对于痰抗酸涂片阴性患者的粪便标本,3种方法均未测到有TB-DNA扩增。痰抗酸涂片阳性患者的粪便标本,煮沸裂解法、酚/氯仿法和试剂盒法的TB-DNA检出率分别为45%、70%和80%。酚/氯仿法与试剂盒法TB-DNA的定量结果比较,存在显著性差异,试剂盒法提取扩增效果显著强于酚/氯仿法。结论试剂盒法可有效去除粪便标本中的PCR抑制物,TB-DNA检出率和定量结果明显优于煮沸裂解法和酚/氯仿法,对于无法产生痰或咳出痰的肺结核患者的实验室诊断具有较高的应用价值。

HCV感染患者糖脂代谢与病情的变化规律研究

目的探讨慢性HCV感染以伴发胰岛素抵抗相关性肝纤维化的流行病学特征。方法选取HCV慢性感染者的血标本进行糖脂代谢的相关指标测定,根据HCV慢性感染者病情的进展程度分为肝脏炎症、纤维化、肝硬化及肝细胞肝癌分组,与健康体检对照组比较,以及各组之间的比较。结果胰岛功能两项(CPS和IRI)和空腹血糖(GLU)、以及血脂四项水平在病毒携带组、肝炎组、肝硬化组总体趋势变化中呈上升趋势,肝硬化到肝癌组中的水平却下降;其中CPS和IRI水平升高到肝炎组有统计学差异(P<0.05),GLU水平升高到肝硬化组有统计学差异(P<0.05);血脂四项中,肝硬化组和肝癌组中CHOL水平明显减低,肝癌组中TG、HDL水平升高,LDL水平在组间起伏较大。结论HCV慢性感染过程中常发生胰岛素抵抗,且糖脂代谢异常和肝纤维化之间存在明显的相关性,与病情的发展程度呈正相关。

绞股蓝皂甙抗自由基损伤作用的实验研究

绞股蓝皂甙在自由基损伤大鼠模型上,抑制肝脏和血浆的脂质过氧化反应,显著降低老年大鼠肝脏脂质过氧化物含量。在体外条件下,不同程度地抑制肝脏脂质过氧化作用。绞股蓝皂甙还能增加自由基损伤模型大鼠和老年大鼠红细胞超氧化物歧化酶活力。提示绞股蓝皂甙有抗氧化和抗自由基损伤作用,初步揭示其延缓衰老的生化基础。

早发型与晚发型新生儿败血症病原菌分布及药敏分析

目的了解医院新生儿败血症早发型与晚发型病原菌分布及药敏情况,为临床抗生素的使用提供依据。方法选择医院新生儿病房2011年1月-2016年6月收治的158例血培养阳性早发型和晚发型败血症患儿的临床资料,并对引起败血症病原菌的分布及药敏情况进行回顾分析。结果 56例早发型败血症病原菌以大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌、B群链球菌为主,102例晚发型败血症病原菌以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌为主。葡萄球菌属对青霉素类、头孢菌素类等抗生素耐药率高,对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺等抗生素敏感。B群链球菌对青霉素、万古霉素敏感,对红霉素、阿奇霉素、四环素耐药率高。结论新生儿早发型与晚发型败血症病原菌分布不同,临床应根据药敏结果合理选用抗生素治疗新生儿败血症。